一株发酵乳杆菌及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一株发酵乳杆菌及其应用。该发酵乳杆菌为Lactobacillus?fermentumHAFI5007，2011年3月11日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏中心登记入册编号：CGMCC?No.4648。本发明专利技术的发酵乳杆菌主要作为动物的饲料添加剂，提高猪营养物质消化率，改善胃肠道微生物菌系组成、肠道粘液蛋白表达以及肠道粘膜免疫功能，改善机体的抗氧化防御系统，缓解氧化应激造成的氧化损伤，改善提高猪的生产性能。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一株发酵乳杆菌及其应用，属于生物

技术介绍
饲料中添加抗生素能够抵抗疾病，促进动物的生长，加快集约化畜牧业的发展。但是随着人们生活水平的提高和对健康程度的不断重视，抗生素添加剂在给人们带来巨大的经济利益的同时其负面效应逐渐显现，最典型的特征就是抗生素引起的耐药性，内源性感染、二重感染以及食品中残留，这些将对养殖业、饲料工业和动物带来严重威胁，进而通过食物链危机人类健康。因此，禁止抗生素添加剂在畜牧业中使用的呼声越来越高，研究和开发新的抗生素替代品的工作迫在眉睫。近年来，益生菌因其安全、绿色无污染且对动物生长具有显著作用而被作为抗生素替代品的首要选择。乳酸杆菌是益生菌中的主要菌种，它是动物消化道栖生微生物，在防治胃肠道感染、调节免疫功能和调节肠道的微生物菌群平衡中具有较好作用，如能够促进仔猪增重、降低猪肠道的PH值、改善血液生化指标，增强消化道内酶活性及降低肠道大肠杆菌数等，使用乳酸杆菌益生素可以调整胃肠道微生态平衡，所以乳酸杆菌是一种很有前途的益生素生产菌种。美国FDA和AAFCO在1989年公布的安全微生物品种共43种，其中乳酸杆菌占12种，中华人民共和国农业部2011年公布允许使用的19种饲用微生物中有6 种是乳酸杆菌。在美国，益生素工业上应用的产品57%含有乳酸杆菌属。大连医学院康白等开发研制的乳酶生，是一种乳酸杆菌的干燥制剂，保存期间稳定性好，每克产品含活乳酸杆菌约IO7个，仔猪每日口服3-4克可以有效治疗腹泻。乳酸杆菌除了能提高动物的生产性能以外，还能提高动物的抗病力，赵庶吏等 (2004)研究发现生物菌对致病性大肠杆菌有很强的抵抗作用，使仔猪下痢和发病率降低 87.4%，治疗效果非常显著。Peran等Q006)研究发现发酵乳杆菌通过释放谷胱甘肽及调节细胞因子(如TNF-α)和诱导型一氧化氮合酶的表达，来防止鼠结肠炎的发生。乳酸菌类产品的开发利用已成为饲料工业一个活跃领域，但也存在一些亟待解决的问题如产品质量不稳定、活菌数量不够、消化率低和成本高等。因此，培养繁殖力强、耐受能力强、产生较高消化酶的菌种以生产出产量高、质量稳定、在体温范围内具有较高活性的乳酸杆菌类产品，以提高其利用率，同时改进工艺、降低生产成本、提高产品的市场竞争力以及对于畜牧业的发展和人类的健康都非常有意义。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是提供一株发酵乳杆菌(LactcAaci llus fermentum) HAFI5007。本专利技术所提供的发酵乳杆菌(LactcAacillus fermentum) HAFI5007，在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)保藏，保藏中心登记入册编号=CGMCC No. 4648。该发酵乳杆菌具有抗逆性强、抗杂菌能力强和益生特性。发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)HAFI5007具有以下生物学特性(1)在ρΗ2· 0处理6小时之后的存活率为78. 6% ；(2)在75°C水浴中加热15min后的存活率为45. 5% ； (3)室温下放置1个月后的存活率为78. 9 % ；(4)接种在肉汤培养基于37°C，5% CO2的培养箱中培养M小时达到最高生长浓度为 IO11CfVml (图 1)。本专利技术的另一个目的是提供一种发酵乳杆菌菌剂。该菌剂能够替代现有的饲用抗生素，并具有抗病、促生长的作用。本专利技术所提供的发酵乳杆菌菌剂，其活性成分为发酵乳杆菌(LactcAacillus fermentum)HAFI5007。所述菌剂具有下述至少一种用途1)清除动物自由基的产品；2)缓解动物氧化应激的产品；3)增强动物机体抗氧化能力的产品；4)制备调解动物肠内微生态平衡的产品；5)增强动物肠道黏膜屏障的产品；6)调节动物粘膜免疫功能的产品；7)促进动物生长的产品。上述发酵乳杆菌(LactcAacillus fermentum) HAFI5007或菌剂可用于制备大肠杆菌抑制剂。所述大肠杆菌抑制剂中的大肠杆菌具体可为大肠杆菌K88、大肠杆菌K99、大肠杆菌 K987P。所述自由基为下述三种自由基中的至少一种轻基自由基、超氧阴离子自由基、1，1-二苯基苦基苯胼自由基。所述缓解动物氧化应激体现为下述1)-3)中至少一种1)提高动物肌肉、肝脏和 /或血浆中抗氧化酶的活性；2)降低动物丙二醛的含量；幻增强动物抑制自由基产生的能力。所述增强动物肠道黏膜屏障体现为改善动物肠道菌群组成和/或促进动物肠道粘液蛋白的表达。所述调节动物粘膜免疫功能体现为下述1)-3)中至少一种1)增加动物外周血 T淋巴细胞⑶4+淋巴细胞亚群的比例；2)促进回肠中TNF-α基因的表达；3)促进回肠中 IFN-Y基因的表达。所述肠道粘液蛋白为MUC2。所述菌剂具体可由发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)HAFI5007和保护剂混合后，冷冻干燥，制成发酵乳杆菌干燥制剂，所述的保护剂为脱脂奶粉、麦芽糊精、稻壳粉、 麦麸中的一种或多种。本专利技术所述发酵乳杆菌(LactcAacillus fermentum) HAFI5007或所述菌可以作为添加剂用于动物饲料，其中的动物包括但不限于猪、羊、牛、鸡等各种动物。该饲料具有与抗生素饲料类似的功能，但无抗生素饲料的副作用。本专利技术的发酵乳杆菌及其发酵乳杆菌菌剂主要作为动物的饲料添加剂，其可以替代现有动物日粮中的抗生素，调节动物肠内微生态平衡，清除体内的自由基，提高抗氧化能力，从而具有增强非特异性免疫功能来预防疾病的作用，同时还可以提供营养因子、促进营养物的消化吸收、促进动物生长和提高饲料转化率、提高断奶仔猪的生产性能。本专利技术的发酵乳杆菌及其发酵乳杆菌菌剂对防治动物消化系统疾病起到保健作用，同时对幼年动物可刺激其胃肠道发育，所以将之作为饲料添加剂应用在饲料中能起到抗病促生长的作用。同时，本专利技术的发酵乳杆菌及其发酵乳杆菌菌剂无耐药性和药物在动物产品中残留从而对人类的健康产生潜在的危害的可能，是一种有前途的绿色饲料添加剂。下面结合具体实施例详细描述本专利技术，所述实施例用于理解而不是限制本专利技术。保藏说明菌种名称发酵乳杆菌拉丁名Lactobacillus fermentum菌株编号HAFI5007保藏机构中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏机构简称CGMCC地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号保藏日期2011年3月11日保藏中心登记入册编号CGMCC No. 4648附图说明图1为发酵乳杆菌生长曲线。图2为平皿挖沟法测定乳酸杆菌培养物对大肠杆菌的抑制。图3为发酵乳杆菌在过氧化氢存在时的存活能力。图4为发酵乳杆菌对羟自由基的清除能力。图5为发酵乳杆菌对超氧阴离子的清除能力。图6为发酵乳杆菌对DPPH的清除能力。图7为发酵乳杆菌对断奶仔猪肠道粘液蛋白的影响(标尺200 μ m) (10X20)。ACE分别是对照组的十二指肠、空肠和回肠，BDF分别是发酵乳杆菌组的十二指肠、空肠和回肠，粘液蛋白(如深棕色颗粒或团块)。图8为发酵乳杆菌对断奶仔猪肠道组织形态的影响(标尺200 μ m) (10X20)。ACE分别是对照组的十二指肠、空肠和回肠，BDF分别是发酵乳杆菌组的十二指肠、空肠和回肠。具体实施例方式本专利技术的发酵乳杆菌(Lact本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．发酵乳杆菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ）ＨＡＦＩ５００７，在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为ＣＧＭＣＣ　Ｎｏ．４６４８。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：谯仕彦，宋青龙，丁修良，张海燕，
申请(专利权)人：北京龙科方舟生物工程技术中心，
类型：发明
国别省市：11