通过超量表达yerP基因提高枯草芽孢杆菌抗菌肽产量的方法技术

本发明专利技术涉及通过超量达yerP基因提高枯草杆菌抗菌肽产量的方法，属于生物技术领域。本方法首先以枯草芽孢杆菌ATCC9943为出发菌株，以大肠杆菌克隆载体pHCMC04为骨架构建一个基因超量表达载体pHCMC-YerP，通过电转化将其转入到枯草杆菌ATCC9943中使yerP基因超量表达，构建了一个高产抗菌肽菌株FMB45。经过高效液相色谱分析，确定改良菌株产surfactin和fengycin的能力大大提高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及通过超量表达J^rP基因提高枯草芽孢杆菌抗菌肽产量的方法，属于生物

技术介绍
枯草芽孢杆菌OfeCiBm ·5油^Vi1S)是目前公认的安全微生物之一，其抗菌代谢产物丰富多样，尤其是脂肽类抗菌物质，不仅抗菌谱广而且还具有生物表面活性剂的功能，因此不仅可以在农业上用于进行生物防治，而且在工业和环境保护上也有着广泛的应用。枯草芽孢杆菌(feci/^Assubtil is) ATCC 9943 是一种可以分泌 surfactin， fengycin等抗菌月太物质的枯草芽孢杆菌(Val6rie Leclere, Romain Marti, Max Bechet. The lipopeptides mycosubtilin and surfactin enhance spreading of Bacillus subtilis strains by their surface-active properties. Arch Microbiol. (2006) 186: 475-483)。其中，surfactin作为一种生物表面活性剂，与化学表面活性剂相比，其具有拥有生本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．通过超量表达ｙｅｒＰ基因提高枯草芽孢杆菌抗菌肽产量的方法，其特征在于：（１）ｙｅｒＰ基因超量表达载体ｐＨＣＭＣ－ＹｅｒＰ的构建设计引物Ｐ４３－Ｆ和Ｐ４３－Ｒ，以枯草芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｕｂｔｉｌｉｓ）ＡＴＣＣ　９９４３基因组ＤＮＡ为模板ＰＣＲ扩增Ｐ４３启动子基因，获得３００　ｂｐ基因片段；设计引物ＹｅｒＰ－Ｆ和ＹｅｒＰ－Ｒ，以枯草芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｕｂｔｉｌｉｓ）ＡＴＣＣ　９９４３基因组ＤＮＡ为模板ＰＣＲ扩增ＹｅｒＰ基因表达框，获得３１９５　ｂｐ基因片段；扩增得到的两个基因分别克隆至ｐＭＤ１９－Ｔ载体，转化大肠杆菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ）ＤＨ５ａ，经验证、...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陆兆新，曹国强，吕凤霞，别小妹，张充，钟蕾，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：84