本发明专利技术公开了一种三聚氰胺快速现场检测试剂及检测方法，向20-25％的三氯乙酸水溶液中加入AlCl3、ZnCl2或MgCl2得提取剂，使其离子浓度为10-30mmol/L；配制CuCl2的饱和水溶液作为指示剂；按体积份数将4-5份液态试样与1份提取剂充分混合得提取液，去除提取液中的沉淀得待检测液；按体积份数将1份指示剂加入20份待检测液中混匀，并观察沉淀生成情况。与国标上已有的检测方法相比，本发明专利技术的检测原理不同于色谱分析检测方便快捷，检测时间缩短到10-20分钟，本检测方法下限不大于30mg/kg，满足一般检测要求，可以作为国标检测的辅助手段，检测对象的范围广。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及食品及饲料安全监测中三聚氰胺的快速定性检测技术，特别涉及一种 乳粉、蛋白粉、动物饲料和液体乳制品中。
技术介绍
三聚氰胺(Mel)是一种用途广泛的具有氮杂环结构的有机化工原料，因其结构中 不仅有氮杂环且含有多个氨基氮，使其含氮量高达66%以上，因此Mel被一些不法商贩添 加到商品中以虚高商品蛋白含量。2007年美国发生的猫狗宠物非正常死亡事件以及2008 年国内的奶粉事件都由此造成。目前，检测Mel的主要方法是高压液相色谱法、液质联用和气质联用等，不仅对仪 器、操作人员素质及实验室要求都很高，检测费时且运行费用高，也难以满足现代食品安全 现场监测对检测方法简单、快速、便携的要求。自从2008年国家征集Mel快速监测方法以来，有数十个Mel检测专利技术问世， 其中大部分是采用免疫学原理而研发的ELISA试剂盒，检测特异性强，敏感度相对高，但试 剂盒制备中涉及Mel完全抗原的制备、动物免疫、Mel与酶的交联等复杂程序，试剂成本价 格高。
技术实现思路
本专利技术的第一个目的在于提供一种对奶粉、蛋白粉、饲料以及酸奶、鲜乳等样品中 Mel进行简单、快速的定性检测、价格低廉、适宜于非专业人员操作的便携式三聚氰胺快速 现场检测试剂。本专利技术的第二个目的在于提供一种采用该检测试剂进行三聚氰胺快速现场检测 的方法。为达到上述目的，本专利技术三聚氰胺快速现场检测试剂包括三聚氰胺提取剂和三聚 氰胺指示剂，所述提取剂由20-25g/100mL的三氯乙酸水溶液与A1C13、ZnCl2或MgCl2混合 而成，三聚氰胺提取剂中Al、Si或Mg的离子浓度为10-30mmol/L，所述三聚氰胺指示剂为 CuCl2的饱和水溶液。本专利技术的检测方法包括如下步骤1)提取剂制备向20-25g/100mL的三氯乙酸水溶液中加入A1C13、ZnCl2或MgCl2 得提取剂，提取剂中Al、Si或Mg的离子浓度为10-30mmol/L ；2)指示剂制备配制CuCl2的饱和水溶液作为指示剂；3)提取将液态试样与提取剂按3-4 1的体积比充分混合得提取液，去除提取 液中的沉淀得待检测液；4)检测和结果判读将指示剂与待检测液按1 20的体积比混勻，若混勻后的溶 液为天蓝色浑浊液，则说明试样中含有三聚氰胺，浊度越高则含量越大，含量低于30mg/kg 的待检测液则为清澈透亮的天蓝色溶液。所述液态试样包括液态样品以及35_50g/100mL的固态样品水溶液。所述提取液中沉淀的去除方法为将提取液超声处理2分钟，然后于4000g离心力 下离心3-5分钟；或者用经过4-5倍稀释的提取剂润湿滤纸，然后用润湿的滤纸过滤提取液。本专利技术的有益效果体现在1)与国标检测方法相比，本专利技术的检测原理不同于色普分析，对设备要求低耗资 少，而且大大提高检测效率，节省劳动量。国标法(高压液相色谱法等)除过需要昂贵的设 备和专业的操作人员外，过程步骤复杂，一个样品检测需数小时才能完成；本检测方法无需 设备，检测试剂廉价、简单，而且检测时间缩短到10-20分钟，满足科技部对快速检测方法 的时间(30分钟)要求。2)本检测方法可组装成试剂盒，检测方便快捷。由于检测试剂简单、检测组件体积 小巧，依此组装的试剂盒小巧便携；检测方法简单；沉淀反应快速，适合于现场快速报告； 结果鲜明便于目测辨别，使用极其方便简单，大大简化了检测程序。满足当前食品安全检测 对检测方法“简单、快速、便携”的要求，适合于现场筛查和监督。3)本检测方法灵敏度不高于:3mg/100mL或30mg/kg。，满足一般检测要求，可以作 为国标检测的辅助手段。凡使用此法检测结果为阳性者，均可肯定三聚氰胺掺假，无需再用 高精仪器检测。这样便可大大减轻工作量，减少耗资并缩短检测时间，提高检测效率。4)检测对象的范围广，市场范围宽，可以提供给食品安全监管相关部门用于劣质 产品筛查。附图说明图1为不同金属水溶液与三聚氰胺的定性反应；图2为三聚氰胺分子式；图3为Cu(II)与三聚氰胺分子间的配合体平面结构；图4为不同含量MEL掺假鲜乳的检测结果；图5为不同含量MEL掺假玉米面的检测结果；图6为MEL掺假酸牛乳的检测结果；图7为不同含量MEL掺假蛋白粉的检测结果。具体实施例方式下面结合附图和实施例对本专利技术作进一步说明。一、三聚氰胺快速现场检测试剂包括三聚氰胺提取剂和三聚氰胺指示剂三聚氰胺提取剂的制备向20_25g/100mL的三氯乙酸水溶液中加入A1C13、ZnCl2 或MgCl2得三聚氰胺提取剂，三聚氰胺提取剂中Al、&!或Mg的离子浓度为10-30mmol/L ；本 专利技术采用低浓度金属离子破坏蛋白胶体水化膜协助三氯乙酸彻底沉淀蛋白质，提取剂是能 沉淀蛋白质但可溶解三聚氰胺的溶液。乳品蛋白质完全沉淀需要采用终浓度为12g/100mL 的三氯乙酸(IS08968)；但实验证明，此浓度不适宜于三聚氰胺检测，因为10g/100mL以上 浓度的三氯乙酸将会导致三氯乙酸共沉，因而可能导致假阴性结果。本专利技术在多次实验基 础上，采用低浓度金属离子的联合作用，降低了蛋白质完全沉淀对三氯乙酸的浓度要求，协助三氯乙酸在较低浓度下快速彻底沉淀蛋白，此方案未见报道。经实验证实该提取剂对蛋 白质的沉淀效果十分理想，也不会使三聚氰胺产生沉淀。三聚氰胺指示剂的制备三聚氰胺指示剂为氯化铜的饱和溶液，参考质量体积浓 度为75g/100mL。指示剂是可以与三聚氰胺发生特异性沉淀反应、表现出肉眼可见浑浊现象 的溶液。二、具体的检测操作方法1)提取剂制备向20-25g/100mL的三氯乙酸水溶液中加入A1C13、ZnCl2或MgCl2 得提取剂，提取剂中Al、Si或Mg的离子浓度为10-30mmol/L ；2)指示剂制备配制CuCl2的饱和水溶液作为指示剂；3)样品中Mel的提取此步骤目的是将样品中的Mel抽提至提取剂中，并使样品 中的蛋白质和对后续检测有干扰的物质被沉淀除去。操作过程为，如果待检样为粉末状固 体(蛋白粉、奶粉、饲料等)，首先要将其配制成35-50g/100mL的液态试样待用。若为液体 样品(鲜乳，发酵乳等)则直接作为液态试样；将液态试样与提取剂按3-4 1的大体积比 充分混合得提取液，将提取液超声处理2分钟，然后于4000g离心力下离心3-5分钟，去除 沉淀并取上清液做为待检测液，或者用经过4-5倍稀释的提取剂润湿滤纸，然后用润湿的 滤纸过滤提取液去除沉淀，取滤液作为待检测液。4)检测与结果判读将指示剂与待检测液按1 20的体积比混勻，若混勻后的溶 液为蓝色浑浊液，则说明试样为含Mel且浓度超过30mg/kg的问题乳，浊度越高，含量越大； 含量低于30mg/kg的待检测液则为清澈透亮的天蓝色溶液。所使用技术原理及产品工作原理本检测过程实质上是顺序偶联的2个选择性沉淀反应。首先采用提取剂从样品中 提取溶解Mel，同时沉淀去除蛋白质等悬浮态大分子杂质，方便下步反应现象观察；第二步 则是用Mel特异的沉淀反应指示提取液中究竟有没有Mel存在。以下分别介绍待检样品中 杂质和Mel的性质及其检测原理。1、待检样品的理化性质和其中蛋白质的沉淀原理人为添加Mel的目的都是为了虚高产品的蛋白含量以欺骗消费者，因此被加入 Mel的产品常常是对蛋白含量有要求的本文档来自技高网...
【技术保护点】
１．三聚氰胺快速现场检测试剂，其特征在于：包括三聚氰胺提取剂和三聚氰胺指示剂，所述提取剂由２０－２５ｇ／１００ｍＬ的三氯乙酸水溶液与ＡｌＣｌ３、ＺｎＣｌ２或ＭｇＣｌ２混合而成，三聚氰胺提取剂中Ａｌ、Ｚｎ或Ｍｇ的离子浓度为１０－３０ｍｍｏｌ／Ｌ，所述三聚氰胺指示剂为ＣｕＣｌ２的饱和水溶液。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：杨水云，张孝宗，段安虎，房磊，
申请(专利权)人：西安交通大学，
类型：发明
国别省市：87
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