一种控制苹果展青霉素的方法技术

本发明专利技术公开了一种控制苹果展青霉素的方法，属于植物采后病害得控制方法。按照下述步骤进行：将胶红酵母(Rhodotorulamucilaginosa)活化，接种到NYDB培养基中进行培养，离心得到菌体；将菌体用0.2%植酸溶液稀释制备成1×108个/mL的菌悬液；在果实伤口处加入30μl酵母菌悬液，自然晾干后，将果实放入塑料筐并用保鲜膜密封。本发明专利技术使用植酸结合胶红酵母控制苹果展青霉素，环保、安全、经济、高效、实用，具有重要的社会价值和经济价值。?

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及利用植酸(phytic acid)和胶红酵母mucilaginosa) 结合使用控制苹果展青霉素的方法，属于植物采后病害得控制方法。
技术介绍
展青霉素又称棒曲霉素，是青霉属、曲霉属、丝衣霉属等霉菌代谢产生的一种有毒的真菌代谢产物，主要存在于霉烂的水果及制品中，是影响水果及果汁饮料质量的主要因素之一。展青霉素是一种世界范围内的水果污染物，在多种水果、水果制品和果酒中均有发现，特别是苹果及其加工品，展青霉素的污染相当严重。展青霉素的限量标准在大多数欧美国家为0 - 50 yg/kg;WH0推荐展青霉素在苹果汁中的最高限量标准为50 μ g/ kg ； 我国相应的标准规定，苹果、山楂半成品限量标准为100 μ g/kg，果汁、果酱、果酒、罐头和果脯的限量标准为50 μ g/kg。我国水果及其制品上的展青霉素污染，不仅威胁我国人民的身体健康，而且对我国水果及制品的出口创汇造成影响。引起苹果采后腐烂的致病菌主要有灰葡萄孢(彻iiriis ci/^rea)和扩展青霉 iPenicillium expansum )。灰葡萄孢不会产生展青霉素，苹果中的展青霉素主要是由扩展青霉产生的。因此要控制苹果上的展青霉素，最主要的是防治苹果污染扩展青霉及其产生展青霉素。低温贮藏、气调贮藏是抑制水果采后病害的有效方法，但两者都需要相应的设备， 在广大的发展中国家，已有的设备往往不能满足大多数水果的需要。另外，有些致病霉菌比较耐低温，在冷藏情况下仍能够在水果上生长，并造成水果腐烂，甚至产生霉菌毒素。有些水果，特别是热带亚热带水果不能在低温下贮藏(低温下贮藏冷害严重)，只能在亚低温下贮藏，此时致病霉菌繁殖仍然比较快，水果在贮藏期的腐烂比较严重，产生霉菌毒素，特别是展青霉素的机会就更多。长期以来，控制水果采后病害及霉菌毒素污染的主要措施是使用杀菌剂。杀菌剂的长期和大量使用，严重污染环境，有损于人类健康。美国科学院 (National Academy of kinces)的一份报告显示，在用于处理食品的杀菌剂中，60%有致癌的危险性。目前多种杀菌剂(如Captan、Benomyl等)已被美国环保局明令禁止使用或者在部分水果产品上限制使用。为了保证农产品的卫生和安全，各国科学家都在积极地探索能代替化学杀菌剂的安全、高效的新型水果采后病害防治方法。当前国际上对用拮抗微生物进行水果采后病害的生物防治的研究已经取得了阶段性的成果，并认为这是最有希望取代化学杀菌剂的方法之一。随着酵母分类、生态、生理、生物化学和分子生物学的研究取得进展，人们对果蔬贮藏中利用酵母的兴趣日益提高。国内外的研究表明，许多酵母菌应用于水果表面，可以防治水果由致病霉菌引起的病害，这些酵母被称为拮抗酵母。酵母菌遗传稳定，抑菌谱广、效价高，一般不产生对人和寄主植物有害的代谢产物，安全性高，且对营养要求低，生长快，并对多种胁迫、逆境具有较强的耐受力，对大多数杀菌剂不敏感，对其它化学和物理处理能够相容。因此近年来拮抗酵母作为水果采后病害生防菌，受到国际上的广泛关注。通过近20年的研究，已经有数十种酵母显示具有拮抗真菌的特性，特别是假丝酵母属(Candida )、隐球酵母属(Cryp tococcus )、毕赤酵母属iPichia )、红酵母属 0 oi/oiorWa)、梅奇氏酵母属(ifetschi^wia)、丝孢酵母属(Jrichosporon )私(类酵母) 短梗霉属Uareo力腫)等的研究相对较多。毕赤酵母O0ZcAia guilIiermondiΩ ^M 际上最早被报道能抑制果实病原真菌的生物防治酵母，而Candida oleophilia isolate 1-182已经在1995年作为生物杀菌剂在美国环境保护署(EPA)登记，并已经由美国Ecogen 公司商业化。此外，在南非一株采后拮抗酵母白隐球酵母(frj^iococcm a从idks)也已经商业化，商品名为Yield Plus。值得注意的是，一些拮抗酵母不仅能直接抑制病原真菌，而且还能分解真菌毒素。 Coelho等(2007)用体外试验(// vitro test)的方法研究拮抗酵母对展青霉素的降解作用，结果表明，将223Pg的展青霉素添加到含有25mL酵母培养液的三角瓶中，再在其中接种3X106 cells奥默毕赤酵母O^icAiao—eri)，在25° C培养，经过两天，展青霉素减少 83% ；经过 五天，展青霉素减少99% ；再经过十五天的培养，展青霉素的量减少到无法测定的水平。近年来，国外一些学者将拮抗酵母应用于苹果等水果展青霉素的控制上，得到了令人振奋的结果。Castoria等(2005)报道粘红酵母O^oWor^a glut in is)和罗伦隐球酵Οτρtococcus在体外培养(// vitro test)情况下能分解展青霉素；将其应用于苹果上，可以显著降低展青霉素在苹果上的积累。Morales等(2008)报道清酒假丝傳母(Candida m^O在冷藏条件下(1°C )既能降低苹果上青霉病的发生率，又能防治展青霉素在苹果的积累。Tolaini等(2010)的研究发现，在实验室及半商业贮藏情况下，香菇 {Lentinula ei/oifes)培养液能够增强罗伦隐球酵母(C IaurentiO防治苹果上扩展青霉的生长及展青霉素产生的作用。Lima等(2011)将罗伦隐球酵母(C)与低剂量的杀菌剂boscalid (BOSC), cyprodinil (CYPR)结合使用，有效地降低了苹果上青霉病的发病率及展青霉素的积累。目前，生物降解展青霉素以降低水果及其制品中霉菌毒素含量已成为国际学术界研究的热点。但到目前为止，已实际应用于生产的拮抗菌种类不多，只有Biosave和Aspire 等少数几种产品上市，而我国目前尚没有拮抗菌应用于实际生产。主要原因在于商业生产条件下，目前已报道的拮抗微生物的防治效果往往不如化学杀菌剂的效果，从而达不到保鲜要求。这些因素影响了拮抗菌作为果蔬保鲜剂在生产中的使用。胶红酵母是我们课题组从镇江江心洲无公害果园的土壤中筛选分离到的一株拮抗酵母。我们的大量研究表明胶红酵母对草莓、桃、苹果等水果的采后病害具有显著的抑制作用。然而，我们的试验结果也表明胶红酵母对果实病害的防治效力与化学杀菌剂相比仍有较大的差距。因此进一步提高胶红酵母的拮抗效力，是提高其对水果展青霉素控制水平，并将其应用于水果贮藏保鲜的重要策略之一。植酸是以玉米、米糠或小麦为原料制备的。作为一种可生物降解的天然物质，植酸不仅资源丰富，而且价格低廉、无毒安全。因其具有众多独特的生物学特性，在食品和水果采后保鲜等领域都有着广泛的研究和应用。在水果采后保鲜领域，植酸被作为理想的水果涂层，用来延缓果实中维生素C的降解，保持果实中的可溶性固形物和含酸量。研究表明植酸对多种病原菌引起的腐烂的抑制效果较弱，因此植酸作为保鲜剂应用时，必须与其它防腐剂配合使用。近年来，如何将植酸与其它安全的非杀菌剂方法有效整合，以获得对水果采后真菌病害更高水平的控制，已成为国际上非常受关注的一个研究热点。但国内外对植酸与拮抗酵母结合使用控制苹果展青霉素尚无相关报道。
技术实现思路
本专利技术为了克服上述现有技术中的不足，提供了一种增强本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种控制苹果展青霉素的方法，其特征在于按照下述步骤进行：将胶红酵母（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ　ｍｕｃｉｌａｇｉｎｏｓａ）活化，接种到ＮＹＤＢ培养基中进行培养，离心得到菌体；将菌体用植酸溶液稀释制备成１×１０８　个／ｍＬ的菌悬液；在果实伤口处加入酵母菌悬液，自然晾干后，将果实放入塑料筐并用保鲜膜密封，恒温恒湿培养箱中培养，即可控制苹果展青霉素。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张红印，赵利娜，任晓锋，张晓云，张海晖，朱淑云，
申请(专利权)人：江苏大学，
类型：发明
国别省市：32