骨生成诱导因子的用途制造技术

本发明专利技术公开了骨生成诱导因子的用途。所述的用途是用于抑制哺乳动物的食欲。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及蛋白质应用领域，尤其涉及一种骨生成诱导因子的用途。
技术介绍
胃帛(osteoinductive factor OIF), osteoglycin mimecan, 是一种分泌蛋白，最早是从牛的骨基质中分离出的一 12KDa的蛋白质。其生物学功能尚不明确。在牛的组织内因不同的剪接或PolyA位点的不同而形成多种OIF异形体，但这些不同长度的OIF基因异形体中，其编码的蛋白质结构完全相同，而且该基因在不同物种之间， 结构也是高度保守的，这提示OIF蛋白在生物体内可能具有重要的功能。人的OIF基因编码298个氨基酸的分泌蛋白前肽，与牛的OIF同源性达86%，其第1_19位为信号肽结构， 20-193位为前肽，成熟区在194-298位，由105个氨基酸残基组成，在1M-260位有6个重复的亮氨酸富集区。对OIF最早的研究认为OIF可能与骨的代谢调节有关，但在OIF基因剔除的小鼠模型中发现，剔除后的小鼠能正常发育，不影响其生育；与野生型小鼠相比，其骨骼发育无明显异常，说明OIF在骨代谢调节中可能不起重要的作用。在OIF基因剔除的小鼠中，仅发现角膜和皮肤的胶原纤维的直径增粗，皮肤的抗张力下降。与此同时，国际上一些研究组对 OIF基因的转录调控机制进行了深入的研究，发现在OIF基因上游中，含有3个起始元件，一个E盒(E-box)和Oct-1、NF-nB、金属反应元件(MRE)结合位点，而在该基因的第一个内含子中，含有该基因转录调控的增强子和沉默子序列。进一步研究发现，在OIF基因第一个内含子区含有P53基因的结合位点，而且P53可以增强OIF基因的转录活性。由此可见OIF在人体的生理过程中可能发挥着重要作用。虽然OIF是一种重要的分泌蛋白，但目前对OIF基因的功能尚不清楚。因此，本领域迫切需要了解OIF的生理作用，并提供相应的应用。
技术实现思路
本专利技术旨在提供一种OIF的用途。在本专利技术的第一方面，提供了骨生成诱导因子(osteoinductive factor, 0IF)在制备抑制食欲的药物中的用途。在另一优选例中，所述的骨生成诱导因子为人骨生成诱导因子；所述的人骨生成诱导因子选自野生型人骨生成诱导因子、或重组人骨生成诱导因子；更佳地，所述的人骨生成诱导因子是OIF核心蛋白片段、或OIF成熟蛋白片段。所述人骨生成诱导因子核心蛋白片段如SEQ ID NO :1所示(AKYNKIKSRGIKANAFKK LNNLTFLYLDHNALESVPLNLPESLRVIHLQFNNIASITDDTFCKANDTSYIRDRIEEIRLEGNPIVLGKHPNSFIC LKRLPIGSYF)。所述人骨生成诱导因子成熟蛋白片段如SEQ ID N0:2所示(PNEKSU1LQKDEAITPLP PKKENDEMPTCLLCVCLSGSVYCEEVDIDAVPPLPKESAYLYARFNKIKKLTAKDFADIPNLRRLDFTGNLIEDIEDGTFSKLSLLEELSLAENQLLKLPVLPPKLTLFNAKYNKIKSRGIKANAFKKLNNLTFLYLDHNALESVPLNLPESLR VIHLQFNNIASITDDTFCKANDTSYIRDRIEEIRLEGNPIVLGKHPNSFICLKRLPIGSYF)。在本专利技术的第二方面，提供了一种组合物，所述的组合物含有有效量的骨生成诱导因子。在另一优选例中，所述的骨生成诱导因子为人骨生成诱导因子；所述的人骨生成诱导因子选自野生型人骨生成诱导因子、或重组人骨生成诱导因子；更佳地，所述的人骨生成诱导因子是OIF核心蛋白片段、或OIF成熟蛋白片段。据此，本专利技术提供了 OIF的应用。附图说明图1显示了 OIF核心蛋白对C57BL/6J小鼠食欲的影响。图2显示了 OIF核心蛋白对db/db小鼠食欲的影响。图3显示了 OIF核心蛋白对KKAy小鼠食欲的影响。图4显示了 SD大鼠侧脑室注射OIF核心蛋白对食欲的影响。图5显示了 OIF成熟蛋白(HIS-OIF)对C57BL/6J小鼠食欲的影响。具体实施例方式专利技术人经过广泛而深入的研究，发现0IF，尤其是人OIF的两个不同大小蛋白片段，即OIF成熟蛋白和OIF核心蛋白具有抑制动物食欲的作用。在此基础上，完成了本专利技术。具体地，专利技术人构建和表达了两种不同大小的人OIF蛋白，分别命名为人OIF成熟蛋白(如SEQ ID NO :2所示，26. 4KD，66-298位氨基酸，)或同其氨基酸序列基本相同；和人OIF核心蛋白(如SEQ ID NO :1所示，12KD，194-298位氨基酸，)或同其氨基酸序列基本相同。人OIF全长cDNA序列的GenBank登录号为AF100758。术语“氨基酸序列基本相同”是指序列相同或由一个或多个氨基酸改变(缺失、增加、取代)引起的不同，但这种改变基本上不降低其生物学活性，即可以通过结合OIF靶细胞受体而发生生物学功能。任何符合“基本相同”要求的OIF均包括在本专利技术内，无论它是糖基化的(即来源于天然的或来源于真核生物表达系统的)或是非糖基化的(即来源于原核生物表达系统或化学合成的)。术语“治疗”是指基于治愈、缓解、改善、减轻、影响治疗对象疾病、症状、疾病体质 (predisposition)的目的而给予需要治疗的对象本专利技术的0IF。术语“治疗对象”是指鼠、人及其他哺乳动物。术语“治疗有效量”是指能够在治疗对象体内达到治疗目的的His-OIF或MBP-OIF 的量。本领域的普通技术人员应理解，所述“治疗有效量”可随His-OIF或MBP-OIF的给药途径、所用药物辅料以及与其他药物联合用药情况的不同而有所不同。His-OIF的功能代表人OIF成熟蛋白的功能；MBP-OIF的功能代表人OIF核心蛋白的功能。本专利技术所引用参考资料的
技术实现思路
就其整体一并引入本文作为参考。可用于表达或克隆本专利技术的His-OIF或MBP-OIF的宿主细胞包括原核细胞、酵母细胞或者高等真核生物细胞。适用的原核宿主细胞包括，但不限于G+或G—菌，如大肠杆菌E. coli.，能够通过公共途径得到的E. coli.菌株包括K12 MM294(ATCC31，446)、 X1776(ATCC31,537), W3110 (ATCC27, 325)和 K5772 (ATCC53，635，JM109, DH5 α，B 株系列，Β834, BL21, BLR等。其他可用的原核细胞包括但不限于欧式杆菌(Erwinia)、克雷伯杆菌(Klebsiella)、变形杆菌(Proteus)、沙门杆菌(Salmonella)如鼠伤寒杆菌 (Salmonellatyphimurium)、沙雷菌属(Serratia)如粘质沙雷菌(Serratiamarcescans)、 志贺菌属Shigella)、枯草杆菌.(B. subtilis)、地衣芽胞杆菌(B. Iicheniformis)、假单胞菌属(Pseudomonas)如绿胺杆菌(P. aeruginosa)、链球菌(Streptomyces)0 E. coli. W3110因其常被用作重组DNA产品的发酵宿主而被推荐为优选。除了原核细胞，真核细胞如丝状真菌(filamentousfimgi)或酵母菌 本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．骨生成诱导因子（ｏｓｔｅｏｉｎｄｕｃｔｉｖｅ　ｆａｃｔｏｒ，ＯＩＦ）在制备抑制食欲的药物中的用途。

【技术特征摘要】
1.骨生成诱导因子(osteoinductivefactor,OIF)在制备抑制食欲的药物中的用途。2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的骨生成诱导因子为人骨生成诱导因子。3.如权利要求2所述的用途，其特征在于，所述的人骨生成诱导因子选自野生型人骨生成诱导因子、或重组人骨生成诱导因子。4.如权利要求3所述的用途，其特征在于，所述的人骨生成诱导因子是OIF核心蛋白片段、或OIF成熟蛋白片段。5.如权利要求4所述的用途，其特征在于，所述人骨生成诱导因子核心蛋白片段如SEQ ID NO...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋怀东，李圣贤，操黄明，马俊花，姜鹤，
申请(专利权)人：上海交通大学医学院附属瑞金医院，
类型：发明
国别省市：31