一种从红三叶干草中提取叶蛋白的方法技术

本发明专利技术涉及一种从红三叶干草中提取叶蛋白的方法，提供一种能规模化生产，不受时间限制，工艺简单，成本低，效率高的制备方法。本法采用酸化加热法配合加盐处理提取叶蛋白。将风干或烘干的红三叶草粉碎，加入适量焦亚硫酸钠，按料水比1∶5-1∶40加水打浆5min，120目滤布抽滤或离心，得到绿色汁液，用1moL/L的HCl或1moL/L的NaOH调pH值为2-6，迅速放入沸水浴中加热到40-90℃后移入相同温度的恒温水浴中絮凝3min-40min。常温冷水快速冷却至室温，静置1h，抽滤(或离心)得叶蛋白膏，60℃-70℃烘箱中烘干，即得叶蛋白成品。本提取方法以红三叶干草为原料提取叶蛋白，与以新鲜红三叶为原料的传统方法相比，降低了成本，大幅提高了产出效率，而且克服了生产时间受植物生长季节限制的缺陷。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于一种植物活性成分的提取方法，具体地涉及。
技术介绍
蛋白质资源不足，是一个世界性问题。叶蛋白是地球上最丰富的蛋白质，其开发利用已引起了世界各国的关注。绿叶单位面积的蛋白质产量，一般是粮食作物的2-4倍，被誉为世界上最大的蛋白质源。叶蛋白或称绿色蛋白浓缩物(Leaf protein concentration， 简称LPC)营养极为丰富，其蛋白质含量一般为45-65%，富含18种氨基酸、叶黄素以及多糖， 还含有胡萝卜素、碳水化合物、矿物质、维生素E、维生素C、B组维生素及促生长发育的未知因子等，氨基酸组分配比合理，口感好，极易被消化，可与鸡蛋、牛乳媲美。红三叶草pratense Z)也叫做红车轴草、红荷兰翘摇，为豆科车轴草属多年生草本植物。原产于小亚西亚及欧洲西南部，是欧洲、美国东部、新西兰等海洋性气候地区的最重要的牧草之一。在我国云南、贵州、湖南、湖北、江西、四川、新疆等省、自治区都有栽培，并有野生状态分布。红三叶是著名的优质牧草，营养丰富、蛋白质含量高、草质柔软、适口性好、各种牲畜都喜食。调制干草叶片不易脱落，是温带地区最重要的调制干草牧草。因此，红三叶是一种极有价值的牧草，随着叶蛋白提取技术的运用和推广，做为刈割型的豆科牧草，红三叶将会在草业生产中起到更大的作用。植物叶蛋白的提取有加热法、酸法、发酵法、电浓缩法和盐析法等。其中酸化加热法能形成紧密而稳定的凝结物，便于过滤处理；能迅速钝化酶；又能终止脱镁叶绿素的形成而避免饲喂动物产生光敏反应；还能起到杀菌作用，是提取叶蛋白效果最好的方法，且此法有较广泛的适应性。叶蛋白的提取一般以新鲜牧草为原料，但由于牧草营养成分含量与生长期、生长季节紧密相关，而在较短的最佳生长期内加工大量的新鲜牧草在我国存在一定困难，同时在非生长季节又会造成生产设备的闲置和浪费。为了使其能更适应工业化生产，提取工艺有待于改善。
技术实现思路
本专利技术采用的目的是提供，与以新鲜红三叶草为原料的传统方法相比，提取率相近，但却能克服了生产时间受植物生长季节限制的缺陷。操作较为简便易行，适合于大规模生产。节约了能源的投入。工艺中采用成本低廉的水作为溶剂，无毒无污染。有利于红三叶叶蛋白作为人类保健品和畜禽饲料添加剂应用。本专利技术提供的技术方案，其特征在于包括以下工艺步骤(1)将风干或烘干的红三叶草粉碎，过60目筛，加入与红三叶草粉重量比为0.2%-12% 的焦亚硫酸钠，再加入重量比5-40倍于草粉的水；(2)打浆5min，120目滤布抽滤或离心，得绿色汁液。(3)将绿色汁液用ImoL/L的HCl或ImoL/L的NaOH调pH值为2-6，迅速放入沸水浴中加热到40°C -90°C后移入相同温度的恒温水浴中絮凝;3min-40min。(4)用常温冷水快速冷却至室温，静置lh，抽滤或离心得叶蛋白膏，在60°C -70°C 烘箱中烘干，即得叶蛋白成品。装入密封容器中保存。叶蛋白最高产率可达10%，纯度可达 42%。本专利技术是通过多次试验的基础上，综合考虑叶蛋白得率、粗蛋白提取率及叶蛋白中粗蛋白含量三项指标，对提取过程中的加盐量、絮凝时间、絮凝温度、PH值、料水比等因素分别进行考察，确定了红三叶干草叶蛋白的最佳提取条件，为红三叶叶蛋白的开发和生产提供依据。本专利技术的积极效果以红三叶干草为原料提取叶蛋白，与以新鲜红三叶干草为原料的传统方法相比，提取率相近，但却克服了生产时间受植物生长季节限制的缺陷。操作较为简便易行，适合于大规模生产。有利于苜蓿叶蛋白作为人类保健品和畜禽饲料添加剂应用。同时综合利用酸化加热法，大幅减少了红三叶叶蛋白的浸提时间，并提高了提取效率， 节约了能源的投入。工艺中采用成本低廉的水作为溶剂，无毒无污染。具体实施例方式下面以实施例进一步说明本专利技术的实质内容，但本专利技术的内容并不限于此。实施例1(1)将风干或烘干含水率小于15%的红三叶草粉碎，过60目筛，称取IOg红三叶草粉， 加入与红三叶草粉重量比为3%的焦亚硫酸钠，即为0. 3g，再加入重量比15倍于草粉的水。(2)打浆5min，120目滤布抽滤或离心，得绿色汁液。(3)将绿色汁液用ImoL/L的HCl或ImoL/L的NaOH调pH值为3. 5，迅速放入沸水浴中加热到70°C后移入相同温度的恒温水浴中絮凝15min。(4)用常温冷水快速冷却至室温，静置lh，抽滤或离心得叶蛋白膏，在60°C -70°C 烘箱中烘干，即得叶蛋白成品。装入密封容器中保存。叶蛋白得率可达8. 93%，纯度可达 42. 02%o实施例2(1)将风干或烘干含水率小于15%的红三叶草粉碎，过60目筛，称取IOg红三叶草粉， 加入与红三叶草粉重量比为m的焦亚硫酸钠，即为0. 2g，再加入重量比20倍于草粉的水。(2)打浆5min，120目滤布抽滤或离心，得绿色汁液。(3 )将绿色汁液用ImoL/L的HCl或ImoL/L的NaOH调pH值为4，迅速放入沸水浴中加热到70°C后移入相同温度的恒温水浴中絮凝15min。(4)用常温冷水快速冷却至室温，静置lh，抽滤或离心得叶蛋白膏，在60°C -70°C 烘箱中烘干，即得叶蛋白成品。装入密封容器中保存。叶蛋白得率可达10. 08%，纯度可达 41. 18% ο实施例3(1)将风干或烘干含水率小于15%的红三叶草粉碎，过60目筛，称取IOg红三叶草粉， 加入与红三叶草粉重量比为m的焦亚硫酸钠，即为0. 2g，再加入重量比25倍于草粉的水。(2)打浆5min，120目滤布抽滤或离心，得绿色汁液。( 3 )将绿色汁液用ImoL/L的HCl或ImoL/L的NaOH调pH值为3. 5，迅速放入沸水浴中加热到70°C后移入相同温度的恒温水浴中絮凝20min。(4)用常温冷水快速冷却至室温，静置lh，抽滤或离心得叶蛋白膏，在60°C -70°C 烘箱中烘干，即得叶蛋白成品。装入密封容器中保存。叶蛋白得率可达9. 76%，纯度可达 41. 61%。考察实例1 考察絮凝时间对红三叶干草粗蛋白提取的影响。称取IOg红三叶草粉， 加入焦亚硫酸钠(占试样重)，即为0. lg，按料水比1 10加水打浆5min后抽滤，将所得绿色汁液调 PH值至 3，70°C下分别水浴 3min、5min、lOmin、15min、20min、30min、40min。 由表1可见，絮凝时间在;3min-40min范围内都有较好的粗蛋白提取率。总体来看，粗蛋白提取率可达14%以上，叶蛋白中的粗蛋白含量可达43%以上，叶蛋白得率可达6%以上。表1絮凝时间对红三叶干草粗蛋白提取的影响本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种从红三叶干草中提取叶蛋白的方法，其特征在于包括以下步骤：（１）将风干或烘干的红三叶草粉碎，过６０目筛，加入与红三叶草粉重量比为０．２％－１２％的焦亚硫酸钠，再加入重量比５－４０倍于草粉的水；（２）打浆５ｍｉｎ，１２０目滤布抽滤或离心，得绿色汁液；（３）将绿色汁液用１ｍｏＬ／Ｌ的ＨＣｌ或１ｍｏＬ／Ｌ的ＮａＯＨ调ｐＨ值为２－６，迅速放入沸水浴中加热到４０℃－９０℃后移入相同温度的恒温水浴中絮凝３ｍｉｎ－４０ｍｉｎ；（４）常温冷水快速冷却至室温，静置１ｈ，抽滤或离心得叶蛋白膏，６０℃－７０℃烘箱中烘干，即得叶蛋白成品。

【技术特征摘要】
1. 一种从红三叶干草中提取叶蛋白的方法，其特征在于包括以下步骤(1)将风干或烘干的红三叶草粉碎，过60目筛，加入与红三叶草粉重量比为0.2%-12% 的焦亚硫酸钠，再加入重量比5-40倍于草粉的水；(2)打浆5min，120目滤布抽滤或离心，得绿色汁液；(3)将绿色汁液用ImoL/L的HCl或ImoL/L的NaOH调pH值为2-6，迅速放入沸水...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱宇旌，张勇，刘勇，
申请(专利权)人：沈阳农业大学，
类型：发明
国别省市：89