桃树黄化植原体检测用引物及其检测方法技术

本发明专利技术提供了一种桃树黄化植原体检测用引物及其检测方法，所述引物的核苷酸序列如序列表PY-F1/PY-R1及PY-F2/PY-R2所示。本发明专利技术还进一步提供了检测桃树黄化植原体的方法。该方法以样品总DNA为模板，利用上述引物进行巢式PCR扩增，反应结束后根据扩增片段的位置判定结果。本发明专利技术的引物特异性好，检测方法快速简单，准确性高，为桃树黄化植原体的检测提供了保证。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物检测技术，具体地说涉及。
技术介绍
黄化病是最近几年桃树上普遍发生的一种病害，原因比较复杂，可能为生理性的缺素、病毒性感染或植原体感染。由植原体引起的桃树黄化病可随苗木、接穗进行远距离传播，防治上与生理性病害及病毒性感染差异很大。如何对桃树黄化植原体(Peach yellow phytoplasma, PY)进行快速准确的鉴定是该病害防控及植物检疫的前提。本研究选择测定的桃树黄化植原体secY基因序列设计两对巢式PCR引物，建立了桃树黄化植原体的巢式PCR检测方法，PCR反应结束即可根据扩增片段的有无判定是否有桃树黄化植原体。
技术实现思路
本专利技术目的在于提供用于桃树黄化植原体巢式PCR检测的弓I物序列。本专利技术通过分析专利技术人测定的桃树黄化植原体secY基因序列的基础上，利用桃树黄化植原体与其他相近植原体secY基因序列的差异，设计巢式PCR引物。所述引物对由两对正向和反向引物组成，其核苷酸序列如序列表中的PY-Fl、PY-R1、PY-F2和PY-R2所示。具体地，本专利技术提供了一种用以检测桃树黄化植原体的巢式PCR引物，第一轮PCR 的正向引物序列PY-本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种桃树黄化植原体检测用引物，其核苷酸序列为：ＰＹ－Ｆ１：５′－ＧＣＡＧＴＴＧＧＴＧＧＡＡＡＴＡＴＡＧＡＧＧ－３′ＰＹ－Ｒ１：５′－ＡＧＴＧＣＣＴＴＴＡＣＣＡＡＴＴＣＣＴＧＧ－３′ＰＹ－Ｆ２：５′－ＴＡＣＴＡＡＡＴＣＣＣＴＴＧＡＴＴＴＧＴＴ－３′ＰＹ－Ｒ２：５′－ＡＡＡＧＴＴＴＴＣＡＡＡＧＴＴＡＡＡＡＡＡＴＡ－３′。

【技术特征摘要】
1.一种桃树黄化植原体检测用引物，其核苷酸序列为 PY-Fl 5' -GCAGTTGGTGGAAATATAGAGG-3‘PY-Rl 5' -AGTGCCTTTACCAATTCCTGG-3‘ PY-F2 5‘ -TACTAAATCCCTTGATTTGTT-3‘ PY-R2 5' -AAAGTTTTCAAAGTTAAAAAATA-3‘。2.一种检测桃树黄化植原体的方法，该方法以样品总...

【专利技术属性】
技术研发人员：李志红，杨毅，赵文军，朱水芳，陈洪俊，
申请(专利权)人：中国检验检疫科学研究院，中国农业大学，
类型：发明
国别省市：11