一种兔肝金属硫蛋白的提取方法技术

本发明专利技术涉及一种兔肝金属硫蛋白的提取方法。现有提取工艺中使用大量的乙醇和氯仿，成本高，污染环境，且氯仿对人的肝肾等器官有损害。本发明专利技术采用的技术方案依次包括下述步骤：①诱导：给成体肉兔注射硫酸锌，注射次数为为7次，剂量呈依次递增形式。②原料的破碎。③热处理：将研磨液迅速加热至78~80℃，保持5-10min，然后置冰水浴中快速冷却至0~4℃，冷冻离心分离。④酸调节pH沉淀杂蛋白：调上清液pH值，使其pH在4~5.5之间，温度在0~4之间，保持30分钟左右，冷冻离心分离后，调回pH至6.5-7.1之间。⑤超滤和透析袋浓缩。本发明专利技术提取工艺简单，成本低廉，特别可以减少有毒溶剂的使用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及金属硫蛋白
，具体涉及。
技术介绍
金属硫蛋白(metallothionein，简称MT)是一类富含半胱氨酸和金属离子的低分子蛋白质。研究和实验表明MT在人体内具有解除重金属(镉、汞和铝)毒性和抗辐射(包括紫外线)、消除自由基、修复受损组织等功效，其清除羟基自由基(· 0H)的能力比SOD高 10000多倍，清除氧自由基(·0)的能力约是谷胱甘肽(CSH)的25倍，尤其是能为生物体提供多种微量元素(如Zn、Cu、Co等)，参与体内某些微量金属元素(如Zn、Cu、Co等)的储存、 运输和代谢。因而，被广泛用于医药、保健品及化妆品添加剂、基因工程试剂、化学、环保、动物、农业、实验用品等领域中。目前，兔肝金属硫蛋白提取工艺通常采用缓冲液提取、有机溶剂沉淀除杂、热变性除杂、乙醇沉淀MT等工艺(参考专利:92111198. 3,200440013212. χ),在这个工艺过程中，用预冷的缓冲液提取金属硫蛋白，得到的提取液呈浑浊的乳化状，需要加入大量的乙醇和氯仿混合液使溶液澄清，在随后的加热除杂过程时要求温度维持在80°C左右，致使大量的乙醇和氯仿挥发，最后需要在高浓度的本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种兔肝金属硫蛋白的提取方法，其特征在于：其依次包括下述步骤①诱导：采取隔日腹腔注射的方法给成体肉兔注射硫酸锌，注射次数为为７次，注射量范围１０ｍｇ／ｋｇ－２５０ｍｇ／ｋｇ硫酸锌，剂量呈依次递增形式，然后宰杀取肝脏，冰冻保存；原料的破碎：新鲜兔肝脏，生理盐水清理血迹后称重，加入２－４倍量冰箱予冷的缓冲液，并在０～４℃下研磨，要求研磨液呈均匀状；③　热处理：将研磨液迅速加热至７８～８０℃，保持５－１０ｍｉｎ，然后置冰水浴中快速冷却至０～４℃，冷冻离心分离：④　酸调节ｐＨ沉淀杂蛋白：调上清液ＰＨ值，使其ＰＨ在４～５．５之间，温度在０～４之间，保持３０分钟左右，冷冻离心分离后，调回ｐＨ至６．５－...

【技术特征摘要】
1. 一种兔肝金属硫蛋白的提取方法，其特征在于其依次包括下述步骤 ①诱导采取隔日腹腔注射的方法给成体肉兔注射硫酸锌，注射次数为为7次，注射量范围 10mg/kg-250mg/kg硫酸锌，剂量呈依次递增形式，然后宰杀取肝脏，冰冻保存； 原料的破碎新鲜兔肝脏，生理盐水清理血迹后称重，加入2-4倍量冰箱予冷的缓冲液，并在(T4°C 下研磨，要求研磨液呈均勻状；③热处理将研磨液迅速加热至78、0...

【专利技术属性】
技术研发人员：齐凡，党芯叶，蒋志武，权清转，
申请(专利权)人：陕西省动物研究所，
类型：发明
国别省市：87