本发明专利技术提供了一种瑞香狼毒正己烷萃取物和进一步分离得到的活性化合物Ａ、Ｂ在农药中的应用。以菜青虫为靶标昆虫，生物活性测试结果表明：狼毒正己烷萃取物在稀释３０倍时，对菜青虫７２ｈ内的校正死亡率为１００％；化合物Ａ：１，５－二苯基－３－羟基－１－戊酮（１，５－Ｄｉｐｈｅｎｙｌ－３－Ｈｙｄｒｏｘｙ－１－Ｐｅｎｔａｎｏｎｅ），其对菜青虫的触杀活性为４８３．４ｍｇ／Ｌ（ＬＣ↓［５０］）；和化合物Ｂ：４－羟基倍半萜烯丙酯（４－Ｈｙｄｒｏｘｙ－Ｓｅｓｑｕｉｔｅｒｐｅｎｅ－Ｐｒｏｐｙｌｅｎｅ－Ｅｓ ｔｅｒ），其对菜青虫的触杀活性为５３０．３ｍｇ／Ｌ（ＬＣ↓［５０］），这为进一步利用瑞香狼毒创制新型无公害植物农药奠定了基础。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种瑞香狼毒活性物质在农药中的用途，属于农药领域。
技术介绍
由于化学农药长期不合理使用，带来了诸多弊端，如造成环境污染，对非靶标生物的直接毒害，害虫易产生抗药性等。近来年，随着IPM理论的实施、可持续发展战略的发展和人类对自身健康要求的提高，环境兼容性好、安全、低残留、经济的生物农药地研究与开发日益受到人们的重视，正逐渐为市场所接受。植物农药正成为创制新农药的研究热点。瑞香狼毒(StellerachanlaejastneL.)，红狼毒、绵大戬、一把香、红火柴头、断肠草。蒙古名达伦-图茹。为瑞香科狼毒属植物，始载于《神农本草经》，与大戟科植物狼毒大戟，月腺大戟同作狼毒入药，其性味苦平、有毒，有逐水祛痰，破积杀虫之功效。民间用其水煎液治疗胃癌、肠癌、水气肿胀、淋巴结核、骨结核和肺结核等。近年来，狼毒已成为中国草地危害较为严重的植物之一。据报道，狼毒的根可以用来制成生物农药-植物杀虫剂，这种杀虫剂对害虫有触杀、熏蒸及胃毒作用。并且具有药效快，有效期长，高效低毒，无残留，不污染环境，不破坏生态平衡，无抗药性等优点。解庆珂报道用狼毒溶液喷雾，可防治菜青虫、蚜虫、大豆食心虫、棉红蜘蛛、夜盗虫、松峭蛾、松毛虫、松叶蜂等，用狼毒制剂还可杀蚊、驱蝇、灭蛆，对臭虫、虱子及跳蚤均有特效，可用来防治农作物、饲料牧草、果树、蔬菜及森林害虫。瑞香狼毒提取物在农药领域的研究很多，比如张国洲等，但主要停留在乙醇提取物对菜粉蝶幼虫的触杀等，目前未见使用正己烷提取物的报道，且报道的的提取物活性成分部明确。目前，从瑞香狼毒中主要分得即黄酮类和香豆素类化合物；另外刘桂芳等从瑞狼毒中还分出β-谷甾醇，胡萝卜甙(Daucosterol)等化合物。冯宝民、裴月湖、韩冰，“瑞香狼毒化学成分研究”，沈阳药科大学学报，2000，17(4)，p258-259公开了鉴定的三个化合物，其中包括化合物A 1，5-二苯基-3-羟基-1-戊酮，但是没有指出该化合物的用途。
技术实现思路
本专利技术的技术方案在于提供一种瑞香狼毒正己烷提取物在杀虫农药中的用途。所述瑞香狼毒正己烷提取物中含有化合物A、B中的一种或多种。 化合物A1，5-二苯基-3-羟基-1-戊酮 化合物B4-羟基倍半萜烯丙酯本专利技术还提供了以瑞香狼毒正己烷提取物、化合物A、化合物B为主要活性成分的农药。所述农药可以是由瑞香狼毒正己烷提取物为活性成分制备而成，它含有正己烷提取物2000～3000mg/L，或500～1000mg/L的化合物A；或1500～2000mg/L的化合物B。其中，所述的正己烷提取物是由如下方法制备将瑞香狼毒根粉用7～15倍量无水乙醇浸泡、提取、浓缩，再以正己烷萃取、浓缩得正己烷提取物。所述化合物A和/或B的制备方法如下其中固定相为硅胶H；a、大柱粗分固定相硅胶H；流动相用正己烷-乙酸乙酯(体积比为20~1∶1)、正己烷-乙酸乙酯-二氯甲烷(体积比为1∶1∶1)；柱径12cm，常规湿法装柱，硅胶高度约15cm，以流程一中的正己烷萃取物为分离样品，每次上样量25g，流速10ml/min，梯度洗脱，分三段收集得大柱段1、段2、段3，各段用薄层检测并进行生物活性测定。活性较强部分作为下一步骤起始样品进一步细分。b、中柱细分固定相硅胶H，柱径5cm，常规湿法装柱，硅胶柱高约40cm，将活性较高的大柱粗分样品段2、段3上中柱，每次上样5g；流速2.5ml/min，流动相用正己烷-乙酸乙酯(体积比为10～1∶1)、正己烷-乙酸乙酯-二氯甲烷(体积比为1∶1∶1)、二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇(体积比为10∶10∶2)；梯度洗脱，分部收集，经薄层层析检测后合并Rf值相同流分，得到三个流分，中柱段1、段2、段3进行生物活性测定，选择生物活性高的流分，进行下一步柱层析细分。c、小柱细分固定相硅胶H，柱径3cm，常规湿法装柱，硅胶柱高约40cm，将活性最高的中柱样品段2上柱，每次上样2g；流动相用正己烷-乙酸乙酯(体积比为4∶1)、二氯甲烷-乙酸乙酯(体积比为1∶1)；梯度洗脱，经薄层层析检测后合并，用于生物活性测定，得小柱段2的生物活性最高。在段2中仍有2条谱带，改变洗脱剂条件无法分离，故采用反相柱层析进行下一步的分离。d、反相硅胶柱分离固定相反相硅胶，柱径2cm，常规湿法装柱，硅胶柱高约30cm，将活性最高的较纯的样品小柱段2上柱，每次2g；流动相甲醇-水-四氢呋喃(体积比为(10～20)∶(2～5)∶(3～7))、甲醇-四氢呋喃(体积比为1∶1)；梯度洗脱，经反相薄层检测后合并相同流分，浓缩得单一谱带样品A与B，反复改变溶剂条件进行薄层检测确定纯度。本专利技术提供的瑞香狼毒正己烷提取物的制备方法中，乙醇渗透性强，易于渗入植物组织，有效组分提取完全，同时乙醇(尤其是热乙醇)溶解性能好，除此之外无水乙醇还有价格低廉、易于回收、对人体毒性小等突出优点，大规模提取时无疑是上选。瑞香狼毒根的正己烷萃取产物尚包括较多的组分，象这样复杂的化合物的分离比较麻烦，采用分段柱层析具有节约溶剂、硅胶、节省人力，分离效果较好等优点。首先进行大柱初分可以进行粗略分类，去除一些永久吸附杂质，实验表明，大柱初分对粗分提取物分段效果十分理想，一步即可将有效成分纯度提高4倍以上，同时样品体积的减少亦有利于下步的进一步纯化。中柱细分采用梯度洗脱，最后采用小柱的梯度洗脱，并且进行反相硅胶柱的分离得到纯品化合物A和B。菜粉蝶Pieris rapae Linnaeus，英文名cabbage butterfly，俗名菜白蝶、白蝴蝶，幼虫别名菜青虫。属鳞翅目粉蝶科，对农业构成较大危害的菜青虫即是菜粉蝶的幼虫。菜青虫在啃食绿色蔬菜的叶片的同时，不仅造成缺口和虫粪污染，还传播大白菜软腐病等病菌，害虫高发期甚至可将蔬菜全部吃光，仅留叶柄，严重影响蔬菜质量。长期以来对这种害虫的防治，主要依赖化学农药，不但杀伤了大量天敌，且造成菜青虫抗药性增强，以至于不得不加大用药量与次数，形成恶性循环，造成蔬菜中农药残留量大，影响蔬菜质量，危及人体健康等。试验证明，本专利技术提供的瑞香狼毒正己烷提取物稀释30倍时，72h内的对菜青虫校正死亡率为100％，触杀活性的致死中浓度(LC50)是812.1mg/L；在测试拒食率的时候，正己烷萃取物的拒食中浓度(AFC50)是4006mg/L，说明狼毒对菜青虫具有较强的毒杀和拒食活性。经过进一步分离获得了有效成分，化合物A1，5-二苯基-3-羟基-1-戊酮(1，5-Diphenyl-3-Hydroxy-1-Pentanone)，其对菜青虫的触杀活性为483.4mg/L(LC50)；和化合物B4-羟基倍半萜烯丙酯(4-Hydroxy-Sesquiterpene-Propylene-Es ter)，其对菜青虫的触杀活性为530.3mg/L(LC50)。总之，本专利技术提供的农药药效快，有效期长，质量可控，为农业提供了一种高效低毒，无残留，不污染环境的新的选择，可防治菜青虫、蚜虫、大豆食心虫、棉红蜘蛛、夜盗虫、松峭蛾、松毛虫、松叶蜂等，还可杀蚊、驱蝇、灭蛆，对臭虫、虱子及跳蚤也有特效。附图说明图1本专利技术瑞香狼毒提取物制备示意图2瑞香狼毒有效活性成分的分离纯化示意图3化合物A的1H核磁共振谱图4化合物B的1H核磁共振谱图。具体实施例方式实本文档来自技高网...
【技术保护点】
化合物Ｂ在杀虫农药中的用途，＊＊＊化合物Ｂ４－羟基倍半萜烯丙酯。
【技术特征摘要】
1、化合物B在杀虫农药中的用途，化合物B 4-羟基倍半萜烯丙酯。2、根据权利要求1所述用途，其特征在于所述的杀虫农药是抗菜青虫农药。3、一种杀虫农药，它是由化合物B为活性成分制备而成，它含有150-2000...
【专利技术属性】
技术研发人员：侯太平，肖波，张可君，陈琳，鲁韬，
申请(专利权)人：四川大学，
类型：发明
国别省市：90[中国|成都]
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