一种以白术为主方的动物免疫增强剂制造技术

本发明专利技术公开了一种以白术为主方的动物免疫增强剂，该增强剂的配方组分（按重量计）为：白术３５～４５份、党参１５～２５份、当归１８～２２份和陈皮１５份。本发明专利技术的动物免疫增强剂，成本低，且能提高动物免疫能力、改善其生长性能。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种动物免疫增强剂的配方，特别涉及一种以白术为主方的动物免疫增强剂的配方。
技术介绍
为了防止所饲养的动物生病，提高动物的抗病能力，饲料中一般会添加一定比例的抗生素。但是这样不仅会导致动物产生抗药性，而且还会使抗生素残留在动物体内，作为食物链最上端的人如果直接或间接食用了此种动物，会对身体健康造成极大的隐患。因此人们迫切希望有一种纯天然的、健康、无毒副作用的动物免疫增强剂，以提高动物的抗病能力。天然药物中的草药是人类最早应用的抗病防病物质，也是最早被应用的饲料添加剂。我国有12807种天然物中草药资源，而其中只有10％为常用，仍需深入研究利用。白术作为中草药中“扶正固本”类补益药物，能滋虚扶弱，调理肠道微生态平衡，提高机体非特异性免疫能力。但以白术为主方的动物饲料免疫增强剂却未见相关报道。
技术实现思路
针对现有技术中存在的不足之处，本专利技术提供一种成本低，能提高动物免疫能力、改善其生长性能的动物免疫增强剂。本专利技术为达到以上目的，是通过这样的技术方案来实现的提供一种以白术为主方的动物免疫增强剂，该增强剂的配方组分(按重量计)为白术35～45份、党参15～25份、当归18～22份和陈皮15份。作为本专利技术的一种以白术为主方的动物免疫增强剂的改进该增强剂的配方组分(按重量计)为白术40份、党参20份、当归20份和陈皮15份。本专利技术的以白术为主方的动物免疫增强剂，选用的都是常见原料，因此能最大限度控制生产成本。特别是主方白术，具有在我国资源丰富、价格低廉、安全无毒的特点；以其为原料制成的动物免疫增强剂作为一种饲料添加剂使用，能提高动物免疫功能，在改善动物肠道微生态平衡的同时还可补充饲料蛋白作用，因此能改善动物生长性能。本专利技术的动物免疫增强剂，适宜动物长期服用，不会使动物产生抗药性，可全部或大部分替代饲料中的抗生素。本专利技术的以白术为主方的动物免疫增强剂，对动物免疫能力的增强和对动物肠道微生态平衡的改善功能可通过以下的实验方法来证明1、选取60只体重相近的杜长大断奶仔猪，随机分为2组(参照组和试验组)，每组3个重复，每个重复10只。在试验组所食用的饲料中添加了1％重量比的本专利技术的动物免疫增强剂，食用普通饲料的称为参照组。试验预饲7天，正试期30天，每日记录采食量。2、试验结束时屠宰取样，采集血样制备血清，采用免疫浊度法试剂盒测定血清抗体IgA、IgG、IgM，补体C3、C4，ELISA方法试剂盒测定血清中细胞因子IL-1、IL-2含量，在CHEM-5半自动生化分析仪上测定；取上述实验猪静脉血10ml，加入事先加有1％无菌肝素的离心管中，带回实验室进行细胞培养。3、采集新鲜血液和脾脏，采用MTT法进行外周血淋巴细胞培养和脾脏淋巴细胞增殖试验，测定T/B淋巴细胞增殖效果1)取2.0ml无菌抗凝血与等量Hanks液混合，稀释悬浮细胞。将细胞悬液小心缓慢加在与血液等量(2.0ml)的淋巴细胞分离液上，使血液重叠于分层液上，室温水平离心2000r/min离心20min。除去最上面的血浆，用毛细管将血浆和分层液之间较薄、但比较清楚的乳白色淋巴细胞层吸至含5ml Hanks液的试管中，混匀后1000r/min离心10min，清洗两次，洗去残余的淋巴细胞分离液。用台盼蓝染色检测细胞活力＞95％并计数。用含20％胎牛血清的细胞培养液将细胞调整为2×106个细胞/ml。2)96孔细胞培养板每孔加入单细胞悬液100ul和100ul PHA，每组设置5个重复孔，同时设置培养液空白对照，放5％CO2、37℃细胞培养箱静置培养48h，终止培养前4小时每孔加入5mg/ml四甲基偶氮唑盐(MTT)溶液20ul继续培养4小时后每孔再加入DMSO溶液100ul，溶解蓝黑色甲臜沉淀，之后用酶联免疫检测仪(BIO-RAD)检测每孔OD570nm。试验结果用刺激指数SI来表示SI＝实验组OD570/空白OD570，所述实验组分别指参照组和试验组。4、脾脏细胞培养试验1)无菌取猪脾脏，置于无血清RPMI-1640培养液(含青霉素和链霉素)平皿中，反复冲洗，用针桶栓小心将脾压碎，经400目不锈钢滤网过滤，用培养液清洗两次(1000rpm/min，5分钟)，用含20％胎牛血清的RPMI-1640培养液制成细胞悬液。用含20％胎牛血清的RPMI-1640培养液调整脾淋巴细胞数为6×106个细胞/ml。2)细胞接种用96孔平板培养，每孔加上述细胞悬液100ul、另加ConA或PHA，每组设置5个重复孔，同时设置培养液空白对照，放5％CO2、37℃细胞培养箱静置培养48h。3)MTT法测细胞增殖于终止培养前4小时每孔加5mg/mlMTT溶液20ul，继续放培养箱培养4小时后每孔再加入DMSO溶液100ul，在微型震荡器上震荡10分钟，之后用酶联免疫检测仪(BIO-RAD)570nm波长下检测每孔OD570值。试验结果用细胞增殖率百分率来表示增殖率(％)＝(实验组OD570-空白OD570)/空白OD570×100％，所述实验组分别指参照组和试验组。试验结果如下表所示表1为本专利技术对杜长大断奶仔猪日增重、料重比和腹泻率的影响；表2为本专利技术对杜长大断奶仔猪外周血淋巴细胞转化率的影响；表3为本专利技术对杜长大断奶仔猪脾脏淋巴细胞增殖的影响；表4为本专利技术对杜长大断奶仔猪血清IgG、IgA和IgM及C3、C4水平的的影响；表5为本专利技术对杜长大断奶仔猪血清中IL-1和IL-2水平的影响；表1 与参照组相比，试验组日增重9.16％(P＜0.05)、料重比9.55％(p＜0.05)、腹泻率降低52.48％(P＜0.01)。表2 与参照组相比，试验组在Con诱导下外周血T-淋巴细胞转化率提高了72.22％(P＜0.01)。在LPS诱导下B-淋巴细胞转化率提高了50％(p＜0.05)。表3 与参照组相比，试验组在Con诱导下脾脏细胞转化率提高了53.37％(P＜0.01)。在LPS诱导下脾脏细胞转化率提高了44.85％(P＜0.05)。表4 与参照组相比，试验组仔猪血清中IgG、IgA和C4水平分别提高了35.29％(P＜0.01)、23.68％(P＜0.01)和19.57％(p＜0.05)，血清中IgM、C3水平提高了3.61％、11.86％，但差异不显著。表5 与参照组相比，试验组血清中IL-1水平提高了33.79％(p＜0.05)，血清中IL-2水平提高了32.07％(p＜0.01)。具体实施例方式实施例1、一种以白术为主方的动物免疫增强剂，按下述配比称取原料(kg)白术40、党参20、当归20和陈皮15。将上述原料简单加以混合。实施例2、一种以白术为主方的动物免疫增强剂，按下述配比称取原料(kg)白术35、党参25、当归22和陈皮15。将上述原料简单加以混合。实施例3、一种以白术为主方的动物免疫增强剂，按下述配比称取原料(kg)白术45、党参15、当归18和陈皮15。将上述原料简单加以混合。最后，还需要注意的是，以上列举的仅是本专利技术的若干个具体实施例。显然，本专利技术不限于以上实施例，还可以有许多变形。本领域的普通技术人员能从本专利技术公开的内容直接导出或联想到的所有变形，均应认为是本专利技术的保护范围。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种以白术为主方的动物免疫增强剂，其特征是该增强剂的配方组分（按重量计）为：白术３５～４５份、党参１５～２５份、当归１８～２２份和陈皮１５份。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：汪以真，胡迎利，赵燕飞，胡晓蕾，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]