【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种苹果中五种多酚的检测方法，特别涉及利用多酚检测含量进行不同品种的识别方法的建立。
技术介绍
多酚类物质是具有苯环并结合有多个羟基化学结构的物质总称，包括黄酮类、单宁类、酚酸类以及花色苷类等。一般作为生长代谢中的次生产物，广泛存在于植物的组织中，对植物的生长发育和调节，基因的诱导表达，信号转导，紫外辐射的吸收，生物固氮以及果蔬加工过程中风味的形成，颜色变化(如褐变)，果蔬饮料的混浊与沉淀，等都有一定的影响。其中，没食子酸，绿原酸，咖啡酸，原儿茶酸和芦丁是植物中广泛存在的五种多酚，以其抗病毒，抗癌症等药理特性越来越受到中外学者的关注。这五种化合物的结构式如下所不
【技术保护点】
１．一种同时检测苹果中五种多酚的ＨＰＬＣ方法，其特征是，包括以下步骤：（１）苹果的前处理将苹果去核，加入足量的抗坏血酸水溶液，用榨汁机粉碎后采用超声、氮气保护或加热方法防止褐变；（２）多酚物质的提取采用甲醇－水溶液或乙酸乙酯提取，所述甲醇－水溶液提取为：称取粉碎好的苹果样品，加入甲醇－水溶液，涡旋震荡后超声；离心，将上清液过滤至烧瓶，然后重复萃取一次，合并上清液；取上清液过０．４５μｍ的滤膜，然后用ＨＰＬＣ检测；所述乙酸乙酯提取为：称取粉碎好的苹果样品，加入乙酸乙酯，涡旋震荡后超声；离心，将上清液过滤至烧瓶，然后重复萃取一次，合并上清液；旋转蒸干后用乙腈定容，然后用ＨＰＬＣ检测；（３）五种多酚的同时检测ＨＰＬＣ－ＤＡＤ检测：色谱柱：Ａｔｌａｎｔｉｓ Ｃ１８，规格为：５μｍ，２５０ｍｍ×４．５ｍｍ，选择柱温，选择流动相梯度洗脱，选择测定波长后检测；（４）多酚含量测定方法的建立用甲醇－水溶液逐级稀释五种多酚标准品，配制成一组混合工作标准溶液，以每个浓度下的标准溶液所得的相对响应值为纵坐标，标准溶液的浓度为横坐标，分别建立标准校正曲线，在检测样品时，根据样品所得的相对响应值，然后分别从标准曲...
【技术特征摘要】
1.一种同时检测苹果中五种多酚的HPLC方法，其特征是，包括以下步骤(1)苹果的前处理将苹果去核，加入足量的抗坏血酸水溶液，用榨汁机粉碎后采用超声、氮气保护或加热方法防止褐变；(2)多酚物质的提取采用甲醇-水溶液或乙酸乙酯提取，所述甲醇-水溶液提取为称取粉碎好的苹果样品，加入甲醇-水溶液，涡旋震荡后超声；离心，将上清液过滤至烧瓶，然后重复萃取一次， 合并上清液；取上清液过0. 45 μ m的滤膜，然后用HPLC检测；所述乙酸乙酯提取为称取粉碎好的苹果样品，加入乙酸乙酯，涡旋震荡后超声；离心，将上清液过滤至烧瓶，然后重复萃取一次，合并上清液；旋转蒸干后用乙腈定容，然后用HPLC检测；(3)五种多酚的同时检测HPLC-DAD检测色谱柱=Atlantis C18，规格为5 μ m, 250mmX 4. 5mm，选择柱温，选择流动相梯度洗脱，选择测定波长后检测；(4)多酚含量测定方法的建立用甲醇-水溶液逐级稀释五种多酚标准品，配制成一组混合工作标准溶液，以每个浓度下的标准溶液所得的相对响应值为纵坐标，标准溶液的浓度为横坐标，分别建立标准校正曲线，在检测样品时，根据样品所得的相对响应值，然后分别从标准曲线中读出样品中各种多酚含量。2.如权利要求1所述的同时检测苹果中五种多酚的HPLC方法，其特征是，所述步骤(1)采用超声方法防止褐变，所述抗坏血酸溶液的质量百分浓度为1%。3.如权利要求1所述的同时检测苹果中五种多酚的HPLC方法，其特征是，所述步骤(2)多酚物质的提取为称取5g粉碎好的苹果样品，加入20mL甲醇-水溶液，涡旋震荡IOs 后超声30min，以4000rpm离心5min，将上清液过滤至150ml烧瓶，然后重复萃取一次，合并上清液；取2. Oml上清液过0. 45 μ m滤膜后，取40 μ L用HPLC检测，所述甲醇-水溶液中甲醇与水的体积比为1 1。4.如权利要求1-3中任意-项所述的同时检测苹果中五种多酚的HPLC方法，其特征是，所述步骤(3)流动相为A 乙酸-水溶液，B:乙腈；所述梯度洗...
【专利技术属性】
技术研发人员：吕潇，赵善仓，郭长英，邓立刚，谷小红，陈宁宁，李增梅，苑学霞，陈学兵，
申请(专利权)人：山东省农业科学院中心实验室，
类型：发明
国别省市：88
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