改进的药物组合物制造技术

含有ＢＰＩ蛋白或其生物活性片段类似物或变种以及聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯表面活性剂和ｐｏｌｏｘａｍｅｒ表面活性剂的药物组合物。（*该技术在2014年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

技术介绍
本专利技术总的来说涉及药物组合物，更具体地说涉及用作非肠道药物的改进的蛋白质和多肽药物。近来遗传工程技术发展的进步使多种生物活性多肽可获得足够大的量以用作药物。然而，多肽可通过多种化学和物理方法，包括加热、冷冻及暴露在极端pH下的变性或其它化学降解，形成颗粒并丧失生物活性。颗粒形成与生物活性的丧失也可由下列原因引起物理振荡和溶液中多肽分子的相互作用以及在贮存小瓶中液-气界面上多肽分子的相互作用。人们认为多肽分子吸附在气-液界面上，其疏水基团向空气中伸展而亲水基团浸在水相中。一旦在表面这样排布，多肽分子便容易聚集、形成颗粒和沉淀。人们还认为在诸如由于运输或其它过程中发生的振动而导致界面的伸缩过程中，吸附于气-液和固-液界面的多肽发生进一步的构象变化。这种振荡能引起蛋白质缠结、聚集、形成颗粒并最终与其它吸附的蛋白质沉淀。表面变性引起的颗粒形成在某种程度上能通过贮存小瓶大小的适当选择及减少这些小瓶中的空气体积(顶部空间)来控制。在这点上，部分充满的容器代表振动引起沉淀的最差状况。颗粒形成还能通过向含有蛋白质的组合物中掺入表面活性剂以降低溶液-空气界面的表面张力来控制。采用表面活性剂和乳化剂的传统的药物稳定方法集中于在表面活性剂分子中同时含有疏水和亲水性分子基团的两亲本质。因此该技术表明，通过选择适当的表面活性剂作为相容剂可制得诸如水包油或油包水型不混溶分子的稳定溶液。用poloxamer188(PLURONIC F-68，BASF Wyandotte Corp.，Parsippany，NJ)对豆油进行的稳定的乳化作用便是一个实例。另一个实例是用聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯80(吐温80，ICI Americas，Inc.，Wilmington，DE)来乳化水溶液中的油溶性维生素A、E和K以通过口服或血管途径给药。由Krantz等人的工作，“糖醇-XXVIII.对吐温80的毒理学、药效学及临床观察”(Bull.of the School ofMed.，U.of MD.，36，48(1951))为将聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯列为一种药物成分奠定了工作基础，其USP/NF要求已发表在美国药典XXII上。本专利技术感兴趣的是涉及利用吐温80对基于抗体的产物制剂进行稳定的工作，如Levine等，J.Parenteral Sci.Technol.，45，3，160-165(1991)所述。这项工作揭示了稳定作用所需的表面活性剂的量超过减小表面张力所需的理论上的最小量。此工作进一步表明需要超过理论最小量的过量表面活性剂可能由于(1)在随机振荡过程中在涌动的界面上保持一个完整的保护层所需的浓度；(2)表面活性剂松散地与蛋白质结合及与容器壁结合。受规章限制的必要条件使能混入用于注射入人体的非肠道组合物的表面活性剂的类型与特性受到限制。通常公认的具有使用历史并列入美国药典XXII的表面活性剂包括poloxamer和聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯聚合物。但是，它们中任何一种在0.1％或更低浓度下单独使用时，均不能对药物组合物提供完全的稳定作用。增大表面活性剂的浓度会出现毒作用增加的危险、溶血的较早产生以及中性白细胞与血小板的可观察到的变化，而中性白细胞与血小板均参与血液补体的活化。当poloxamer188在有限的剂量下用作血液代用品并在血流中被稀释10倍时，poloxamer188在允许的非肠道溶液中的最高安全浓度为2.7％。类似地，已批准用于非肠道溶液20多年的吐温80在100毫升或更大的溶液体积中的使用浓度很少高于0.1％。Krantz等(见上)鉴定狗在0.1％的聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯浓度下90分钟时出现溶血。新生儿死亡与吐温80的使用浓度高于1％有关。因此，本领域需要能提供改进的蛋白质稳定性的药物组合物，该组合物中只包含那些被认为是安全的并包括在制定规章的权威批准的商用非肠道药中的成分。本专利技术的概述本专利技术涉及多肽的药物组合物并针对下面发现poloxamer表面活性剂以及它与聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯表面活性剂联合应用提高杀菌/渗透性增强(BPI)蛋白、BPI的生物活性片段、BPI的生物活性类似物以及BPI的生物活性变种(由重组或非重组方式产生)在水溶液中的溶解性/稳定性。本专利技术特别提供了杀菌/渗透性增强蛋白的增溶/稳定方法，杀菌/渗透性增强蛋白是BPI或其类似物和其变种的生物活性氨端基片段。BPI的氨端基片段，例如那些称做rBPI23或包括BPI的大约头193个至约头199个氨端基氨基酸残基的任何氨端基片段，被认为在水溶液中特别容易失去稳定性。本专利技术特别针对下面发现两种特定类型的表面活性剂的结合与其中任何一种表面活性剂单独使用相比，使药物组合物的蛋白质稳定性有令人吃惊的改进。特别是发现含有poloxamer(聚氧丙烯-聚氧乙烯嵌段共聚物)表面活性剂与聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯表面活性剂的混合物的药物组合物可改善蛋白质药剂的稳定性和对凝聚、颗粒形成及沉淀的抑制作用。与任何一种单独使用相比，这两种类型表面活性剂的结合提供了改善的稳定性及对表面变性、凝聚、颗粒形成和沉淀的抑制作用。用于稳定含有少于或等于2mg/ml蛋白质的溶液时poloxamer表面活性剂成分的重量浓度优选为约0.01％至1％，更优选为0.1％至0.2％。聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯表面活性剂成分的重量浓度优选为约0.0005％至约1％，优选为0.002％。含有0.1％(重量)至0.2％(重量)poloxamer188及0.002％(重量)吐温80的混合物是最优选的。该混合物对防止降解极敏感蛋白质如杀菌/渗透性增强蛋白(BPI)的颗粒形成特别有用，也可用于增进其它多肽药物的稳定性。此poloxamer和聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯表面活性剂的混合物可单独使用或与其它表面活性剂混合使用。再者，本专利技术不限于一种poloxamer表面活性剂与一种聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯表面活性剂混合，还包括一种或多种poloxamer表面活性剂与一种或多种聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯表面活性剂混合。本专利技术的另一方面涉及下述发现poloxamer表面活性剂对含有BPI蛋白或其生物活性片段、类似物或变种(由重组或非重组方式产生)的水溶液的组合物的增溶/稳定尤其有用。本专利技术提供了一种通过将多肽与poloxamer表面活性剂接触来增溶/稳定这种多肽的方法。不必受本专利技术的一个理论的约束，据信poloxamer表面活性剂稳定BPI蛋白产物不是通过降低水溶液表面张力的机制而是在较高温度下通过稳定伸展的和部分伸展的BPI蛋白质分子并防止这些分子沉淀。优选的poloxamer表面活性剂的特点是HLB值大于约14，在室温、0.1％浓度的水溶液中测得的表面张力为10-70mN/m，更优选的poloxamer表面活性剂的HLB值为25至35，并且在室温、0.1％浓度的水溶液中测得的表面张力为30至52mN/m最优选的是市售的商品名为PLURONIC F-68的poloxamer188(BASF Wyandotte，Parsippany，N.J.)，其特点是表面张力为50mN/m，HLB值为29。优选的聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯表面活性剂在室温、浓度为0.1％的水溶液中测得的表面张力为10至70m本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：W·C·麦克格雷格，J·施图斯塔德，P·张，
申请(专利权)人：爱克索马技术有限公司，
类型：发明
国别省市：