本发明专利技术公开了蛭弧菌游泳体在海参育苗中的应用，通过在水体和／或饲料中添加蛭弧菌游泳体菌液实现，具体包括育苗设施与水质条件，亲参采捕，亲参蓄养，产卵孵化与幼体培育，采苗和稚参培育，关键技术是在水体中添加终浓度为１０～１０７ｐｆｕ／ｍＬ的蛭弧菌游泳体菌液，和／或同时饲料要用浓度为１０～１０７ｐｆｕ／ｍＬ的蛭弧菌游泳体菌液浸泡３０ｍｉｎ，应用本发明专利技术平均育苗成活率达到５０％以上，且可有效改善水质，实验表明最长可长达２０天不换水，节约成本，人力，大大提高了经济效益，且育苗成活率高、苗种质量好、节水节能、绿色低碳。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物
，涉及一种细菌的应用，特别涉及蛭弧菌游泳体菌液在 海参育苗中的应用。
技术介绍
海参自古被列为“海中八珍”之一，有“海中人参”的美誉。据研究，海参特别是北 方刺海参具有高蛋白、低脂肪、低糖的特点，有很高的食用价值和医用价值。近年来，随着城 乡居民生活水平的不断提高以及医疗保健意识的增强，海参的消费需求不断上升，价格不 断上涨，由此带动了海参养殖的兴起，海参养殖已成为继对虾养殖之后又一新的海水养殖执占。苗种是大规模养殖的先决条件，工厂化育苗技术的产生、发展和成熟极大地促进 了海参养殖业的发展。但是，随着工厂化育苗技术的普及和无序发展，很多问题也日益显 现追求利润最大化导致近亲繁殖、亲体小型化、病害猖獗和无序大量使用抗生素等，造成 海参体内药物残留，品质下降；室内强化培育，人为地减少了自然选择，保护了病弱者，降低 了苗种的生存力；按目前的生产工艺，多数育苗场用水量大，水不经处理直接入海，严重污 染环境。微生态制剂是从自然环境中筛选出来的微生物菌体，经培养繁殖后制成的含有大 量有益菌的活菌制剂。它具有成本低、无毒副作用、不污染环境的特点。蛭弧菌是寄生于其他细菌，并能导致宿主细菌裂解的一类细菌。比一般细菌小，能 通过细菌滤器，有类似噬菌体的作用，是一种新型的微生态制剂。蛭弧菌一方面能够裂解 水体中的(潜在)致病菌，减少用水量，另一方面能改善养殖生物肠道环境，提高免疫力，促 进幼苗发育和生长，提高苗种成活率。蛭弧菌游泳体是指蛭弧菌侵入宿主细菌前的生长形式。蛭弧菌游泳体侵入宿主细 菌的过程非常快，一般几秒钟内即可完成。蛭弧菌游泳体菌液具有起效快、活力强的优点。到目前为止，国内外尚无在海参育苗过程中使用蛭弧菌游泳体菌液的研究报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服已有方法的不足，提供蛭弧菌游泳体在海参育苗中的应用 方法，是一种节能、减排，绿色、无公害的新型育苗方法，能有效控制病害发生，提高苗种质 量和育苗成功率。本专利技术的目的可以通过以下方案实现蛭弧菌游泳体菌液在海参养殖中的应用。所述蛭弧菌蛭弧菌为蛭弧菌(Bdellovibrio sp. Strain)BDMOl于2008年4月沘 日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国武汉武汉大学，保藏编号为CCTCC NO M 208066。对BDMOl进行负染后于电子显微镜下形态观察蛭弧菌BDMOl呈单细胞，弧形， 大小为1. 7 X 1. 0 μ m，端生鞭毛，鞭毛长度为3. 5 μ m ；将其以双层平板法于培养三天可3形成直径3-4mm的透明圆形噬菌斑。所述蛭弧菌游泳体菌液在海参养殖中的应用是将饲料在蛭弧菌游泳体菌液中浸 泡 15-45min。所述蛭弧菌游泳体菌液在海参养殖中的应用是在水体中添加蛭弧菌游泳体菌液， 使水体中蛭弧菌游泳体浓度为IO1 l(fpfu/mL。本专利技术相对于现有技术，具有如下的优点及效果1、蛭弧菌游泳体是指蛭弧菌侵入宿主细菌前的生长形式。蛭弧菌游泳体侵入宿主 细菌的过程非常快，一般几秒钟内即可完成。相对于蛭弧菌蛭质体而言，虽然存在着制备繁 琐、不易保存的弱点，但用蛭弧菌游泳体裂解致病菌具有起效快、活力强的优点。2、本专利技术所述蛭弧菌游泳体在海参的应用中安全性好。蛭弧菌游泳体通过裂解而消除致病菌的方法是生物方法，绿色、安全、无污染。蛭 弧菌可侵染、裂解宿主细菌的特性使之适合作为抑制或清除生物体及其环境中致病菌的生 物净化因子，且其在裂解完宿主细菌后，会因饥饿而自动消亡，从而克服了抗生素滥用带来 的副作用。已有研究表明蛭弧菌对海参无毒性作用，对人类无致病性。3、所述新技术可有效提高种苗免疫力蛭弧菌游泳体菌液可调节参苗自身的菌系，维护肠道系统环境，促进免疫系统的 发育，增强苗种的体质，方案于实际实施中所测定的各项免疫指标均高于使用传统的方法。4、本专利技术方案可有效减少换水、倒池的次数，经实验证实在幼体培育期无需换水， 在稚参的培育期最长可达20天不换水、倒池，减少了污水的排放，降低了能耗及对环境的 影响，节约人力物力，是一种绿色、环保、低碳的节水型新育苗技术。附图说明图1为实施例育苗试验后免疫因素一酸性磷酸酶(Acidphosphatase，ACP)结果图2为实施例育苗试验后免疫因素一碱性磷酸酶(Alkalin印hosphatase，AKP) 结果具体实施例方式下面结合实施例对本专利技术作进一步详细的描述，但本专利技术的实施方式不限于此。实施例1蛭弧菌游泳体菌液的制备接种0. 5mL 106cfu/mL嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila，购于广东省微生物 所菌种保藏中心，编号GIM1. 172)于IOOmL营养肉汤(蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化钠5g， 蒸馏水lOOOmL，pH 7.4)液体培养基中，28°C培养20h，培养液经6000rpm离心15min后， 沉淀用5mL DNB (dilute nutrient broth)液体培养基(营养肉汤0. 8g，酪蛋白酸水解物 0. 5g，酵母精提物0. lg，溶于IOOOmL蒸馏水中，pH值为7. 5)悬浮，之后加入至IOOmL DNB 中，接入ImL lXl(fpfu/mL蛭弧菌BDM01J8°C培养48h，培养液经7000rpm离心20min后， 将蛭弧菌游泳体的上清液经16000rpm离心20min后，沉淀用ImL DNB液体培养基悬浮，得 到 ImL蛭弧菌游泳体菌液，经0D600nm测定(LYSIS OF VIBRIOS BYBDELL0VIBRI0-AND-LIKE ORGANISMS (BALOs) IS0LATEDFR0M MARINE ENVIRONMENT. Journal of FoodSafety，2008， 28 (2) :220-235.)，蛭弧菌BDMOl游泳体菌液的浓度为108pfu/mL。实施例2蛭弧菌游泳体在海参育苗中的应用实验实施地点山东某海参养殖场，育苗海参种类仿刺参又名灰参1.亲参采捕在自然海区采捕；采捕时间海水底层水温达到15 16°C时，亲参产卵前5天集 中采捕；选择300g以上、3龄以上、无损伤的个体。2.亲参蓄养蓄养密度15只/m3，蓄养的水温16 18°C，蓄养时间为7天，在蓄养池中进行。蓄 养池中的水经过精细过滤。在水中加入蛭弧菌游泳体菌液，使培育池中的蛭弧菌游泳体浓 度达到IO1 l(fpfu/mL。短期蓄养过程不投饵，不换水，每天早晚利用虹吸作用清理池中 的粪便等污物。3.产卵孵化与幼体培育受精采用混合受精方式。为保证受精质量，防止精液过多，及时将过多的雄参(已 见排精的个体)挑出并移入另外的水池中。亲参产卵受精后及时将亲参移出，并用过滤海 水洗卵，直到池水变清为止，再向各池中加入蛭弧菌游泳体菌液，使其终浓度分别为IO1 107pfu/mL,受精卵直接在蓄养池中孵化。受精卵的孵化密度为5个/mL，孵化水温为20°C。孵化期间每隔0. 5h用搅水耙 将池水上、下翻动一次，翻水时应不留死角且不能向一个方向旋转，以避免将胚体旋向池中心聚集。4.幼体培育当胚胎发育到小耳幼体时，进行选育。将上浮的幼体移入培育池内继续培养。培育 池中的海水为经砂滤的海水，再向各池中加入蛭弧菌游泳体菌液，使其终浓度分别为IO1本文档来自技高网...
【技术保护点】
蛭弧菌游泳体菌液在海参养殖中的应用。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：蔡俊鹏，孙丽滢，
申请(专利权)人：华南理工大学，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]
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