HHV8的MIP同源物在防治艾滋病的药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及ＨＨＶ８的同源物在制药领域中的新用途，尤其涉及在防治艾滋病的药物中的应用。本发明专利技术用ＨＨＶ８的Ｋ６（ｖＭＩＰ－Ⅰ）、ＨＨＶ８的Ｋ４（ｖＭＩＰ－Ⅱ）来源的基因产物封闭ＨＩＶ感染的辅助受体，具有不引起宿主细胞粘附反应、释放介质等人源趋化因子的功能，使有效控制艾滋病成为可能。根据目前技术水平，本发明专利技术所指ｖＭＩＰ－Ⅰ和ｖＭＩＰ－Ⅱ蛋白在制药工业上能够工业化生产，实现本发明专利技术前景好。（*该技术在2019年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及HHV8的MIP同源物的用途，尤其涉及在防治艾滋病的药物中的应用。自从美国疾病控制中心流行病学专家于1981年在美国首先发现艾滋病，1983-1984年分离到HIV以后，人类抗艾滋病研究已经历了近二十年，由于无有效控制措施，HIV在全球讯速播散，据世界卫生组织98年调查报告，现今每天约有16000人感染HIV，而且艾滋病的严重威胁在青少年。因在治疗上没有特效药物，艾滋病死亡率仍为100％。我国艾滋病流行之快更令人担忧，由于人口密集，HIV携带者正逐年成倍增加，遍布全国各省市，而且社会不能有效监管这些HIV带毒者，使他们在社会上继续传播。我国带毒者的迅速增加已构成了日后艾滋病爆发的根源。因此，专利技术预防和治疗艾滋病的药物是医学界迫切解决的课题。目前艾滋病防治方面主要用针对HIV的有关疫苗。由于HIV基因变异问题，特别是编码外膜蛋白的env基因的高度变异，使得HIV能逃避免疫系统的临视，这是HIV疫苗研制的主要障碍。应用各类基因工程抗原或无活病毒免疫动物和人体，产生的体液或细胞免疫都是型(Type)特异性的，似乎不能得到具有广泛保护性的疫苗抗原。尽管已证明各类疫苗抗原可以刺激其特异性体液或细胞免疫，但究竟哪一种具有保护作用还不很清楚。除了HIV基因的高度变异不断导致“新抗原”的出现外，也由于HIV长期的潜伏感染，不表达或仅表达少量病毒结构蛋白，造成“无抗原”状态，这些因素导致了HIV很易逃脱机体的免疫监视，其结果使机体免疫系统处于一种相对无能状态。因此，单纯应用疫苗防治艾滋病效果不理想。基于近年对HIV辅助受体感染机制的阐明，尤其是近两年陆续发现的一些辅助受体的变异可阻止艾滋病的发病，目前研究者正加紧从辅助受体和趋化因子(作为此辅助受体的配体)两方面寻找HIV感染的防治药物，包括①受体功能抑制剂；②受体的中和抗体，因为gp120与CCR5的结合对中和抗体非常敏感；③改造的趋化因子，人们希望经改造的趋化因子只封闭受体而不激活受体，即不影响机体功能，是目前最为理想的抗HIV药物研究方案。有关作用于HIV辅助受体方面的药物，包括上述提到的受体中和抗体和趋化因子类物(受体的配体)；在趋化因子类物中有正常的人源趋化因子和变异的RANTES。这些新型药物目前均在试验中，尚未见其他来源的趋化因子类物用于艾滋病的防治。人疱疹病毒8，英文为Human herpesvirus 8，属于γ2疱疹病毒，是HIV感染者或移植病人用免疫移植剂后常发生的一种恶性血管内皮细胞增生即Kaposis肉瘤得病原菌。1996年测序成功，至今已对此病毒编码的Bcl-2、Cyclin D、GPCR等类似与人源蛋白的病毒产物进行了较多研究。此病毒尚编码的人MIP类似物，MIP为单核细胞炎症蛋白，英文为Mononuclecyte inflammatory protein，是人体CC类趋化因子，其受体主要为单核细胞表面的CCR5。目前对此病毒所编码的人MIP类似物的功能尚未见任何文献报道。本专利技术的目的在于提供HHV8的MIP同源物的新用途，即人疱疹病毒8的趋化因子基因分子产物在防治艾滋病药物中的新应用。本专利技术所公开的HHV8所编码的类似于人的MIP，具有封闭趋化因子受体但不具备人MIP功能，在防治艾滋病药物中可成为理想的HIV辅助受体拮抗剂(附图说明图1所示)。HHV8的开放读框K4编码的蛋白产物vMIP-II类似于人MIP-1β，其核苷酸序列和氨基酸序列如下。K4核苷酸序列，长度为285bp1 atggacacca agggcatcct gctcgtcgct gtgctgactg ccttgctttg tttgcaatct61 ggggacacgc tgggagcgtc ctggcataga ccggacaagt gctgtctcgg ttaccagaaa121 agaccattac cacaggtgct tctgtccagc tggtacccca cctcccaact gtgcagcaag181 ccgggtgtga tatttttgac aaagcgtggt cgccaggtgt gtgccgacaa atcgaaagac241 tgggtgaaga agctgatgca gcaattacca gtcactgctc gctgaK4氨基酸序列(94个氨基酸)ORF K4(macrophage inflammatory protein vMIP-II homolog)MDTKGILLVAVLTALLCLQSGDTLGASWHRPDKCCLGYQKRPLPQVLLSSWYPTSQLCSKPGVIFLTKRGRQVCADKSKDWVKKLMQQLPVTARHHV8开放读框K6编码的蛋白产物vMIP-I类似于人MIP-1α，其核苷酸序列和氨基酸序列如下。K6核苷酸序列，长度为288bp1 atggcccccg tccacgtttt atgctgcgtt agcgtactgc ttgccacgtt ttacctgacg61 cccacagaaa gcgcggggtc actcgtgtcg tacacgccta atagctgctg ctacgggttc121 cagcagcacc caccgcccgt ccaaattcta aaagagtggt atcccacgtc cccagcgtgc181 ccaaaacccg gagttatttt gctgaccaag cgagggcgtc agatctgcgc agacccttcc241 aaaaactggg ttaggcagct gatgcagcgg ctgcctgcca tagcttagK6的氨基酸序列(95个氨基酸)ORF K6 protein(functional macrophage inflammatory protein vMIP-I homolog)MAPVHVLCCVSVLLATFYLTPTESAGSLVSYTPNSCCYGFQQHPPPVQILKEWYPTSPACPKPGVILLTKRGRQICADPSKNWVRQLMQRLPAIA这些病毒基因与人源基因具有高度同源性，而且保留人源基因的功能结构区。所以在理论上这些病毒类似物可以结合相应的人源受体，即K6的蛋白产物vMIP-I可以与人MIP-1α的受体(分布于单核、淋巴细胞膜上的CCR5、CCR4、CCR5)相结合，K4的蛋白产物vMIP-II可以与人MIP-1β的受体(分布于单核细胞膜上的CCR5)结合。由于各种人源趋化因子之间均具有相似的功能区和较高的基因同源性，vMIP-I和vMIP-II有可能结合多种人源趋化因子的受体。实验证明HHV8的MIP同源物具有高效地竞争结合HIV辅助受体，且不引起宿主细胞粘附反应释放介质等人源趋化因子的功能。K4编码的vMIP-II(A)与人MIP-Iβ(B)氨基酸残基相似比较如下A31 PDKCCLGYQKRPLPQVLLSSWYPTSQLCSKPGVIFLTKRGRQVCADKSKDWVKKLMQQL 89P CC Y R LP+ + +Y TS LCS+P V+F TKR +QVCAD S+ WV++ + LB31 PTACCFSYTARKLPRNFVVDYYETS本文档来自技高网...

【技术保护点】
ＨＨＶ８的ＭＩＰ同源物在防治艾滋病的药物中的应用。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：孙晗笑，谢作煊，利奕成，郑佩娥，严群超，钟瑛，何文芳，
申请(专利权)人：暨南大学，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]