含有混合载体的多价疫苗组合物制造技术

本发明专利技术涉及治疗或预防由细菌等病原体引起的某些感染的药物组合物，包括来自一种或几种病原体、作为免疫原的一种或几种多糖。所述多糖为与载体蛋白偶联的偶联物形式。该组合物至少含有两种偶联物，每一种偶联物至少有一种不同的蛋白载体。（*该技术在2018年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术的主题是治疗或预防由细菌等病原体引起的多种感染的药物组合物，包括来源于一种或多种病原体、作为免疫原性制剂的多糖。细菌以及酵母等真菌在其表面结构中含有多糖。因此，大多数细菌覆盖有多糖性质的渗出物，该渗出物与细菌的结合或紧或松，但严格地说并不是被膜。该渗出物被称为糖萼或荚膜。此外，革兰氏阴性细菌的外膜由脂多糖(LPS)和其它成分组成。最后，多糖也见于真菌的细胞壁。这些多糖实际上是引发被感染哺乳动物的免疫应答的表面抗原。这些多糖以其中成分和连键确定的单位产生，这些单位是被研究的细菌或真菌种的特征。这些重复单位含有表位，即决定抗原性的结构。病原微生物的多糖被认为是良好的疫苗制剂。它们在成人和儿童中的有效期可长达两年以上。另一方面，在授乳婴儿中，某一些只有轻微的免疫原性或没有免疫原性，不能引发免疫应答。这一问题可通过经共价键将多糖偶联至所谓的载体蛋白(如白喉或破伤风类毒素)，从而获得多糖-载体蛋白偶联物而得以克服。同一疫苗组合物可含有几种偶联物。实际上，现在的趋势是组合几种旨在预防或治疗由不同种类病原体引起的感染的疫苗制剂，这主要是为了限制个体一生中的给药次数。此外，在同一种内，可能有几种血清组/血清型广泛分布在地区或世界范围内，血清组/血清型主要是通过荚膜多糖的性质来鉴定，各种血清组的多糖通常没有免疫交叉反应。因此，有必要组合来自几种血清组的多糖以便有效地抵抗由一个种引起的感染。在接种疫苗抵抗肺炎链球菌感染时情况就是如此。肺炎球菌感染是受到关注的公共卫生问题，特别是因为在几种严重的肺炎、败血症和脑膜炎中发现了肺炎球菌。在工业化国家，每年每100,000名3岁以下的儿童中感染者为30到100人。菌血症和脑膜炎的死亡率是1 5-30％，而死于肺炎的儿童为5％。1985年到1989年在芬兰进行的一项研究显示，90％的侵染性感染由8个血清组/血清型引起。血清组/血清型14，6和19占病例的54％，血清型14主要见于两岁以下儿童。其它经常分离到的肺炎球菌属于血清组7，18和23；其它的较为少见，属于血清组/血清型9和4。在其它工业化国家中也证实了类似的分布，特别是在美国。并且，肺炎链球菌引起多种更为温和但非常常见的骨炎。六岁前感染骨炎的儿童估计为75％，由肺炎球菌引起的骨炎为30％到50％。在发达国家，由肺炎球菌引起的骨炎感染中，25％是由血清组19引起的，其次是血清组/血清型23(13％)，6和14(12％)，9和18(4％)，以及4和1(2％)。含有23种血清型多糖的肺炎球菌疫苗已经商业化。该疫苗可有效抵抗成人中的侵染性感染，对7个月以上的儿童具有短暂的作用。肺炎球菌的荚膜多糖是T-非依赖性抗原，即它们可不借助T细胞的帮助诱发抗体产生，主要是IgM型抗体，但它们不能促进IgG型抗体的加强应答。当它们偶联于载体蛋白时，这些多糖可引发T-依赖性应答，特别是在新生儿中，因此应能提供长期保护。含有6B、9V、18C和23F偶联物的四价肺炎球菌疫苗已在芬兰和以色列进行临床研究，在该疫苗中多糖偶联于Dt或Tt。每种多糖的剂量为1，3或10μg。这些制剂的每一种与抗嗜血菌疫苗(聚核糖醇磷酸偶联于Tt；商品名Act-HIB，Pasteur Merieux Connaught)和抗白喉、破伤风、百日咳疫苗(芬兰，商品名D.T.Coq，KTL)同时给药。并且，同时给予或不给予口服或注射脊髓灰质炎疫苗。间隔几周，给药两次，然后在第一次免疫后一年再次给药。这些研究的结果在以下表格中报导，这证明了给予白喉和破伤风类毒素在最后一次免疫后对诱导抗Hib抗体的负面影响 >在冰岛的临床研究也证实了类似的干扰作用，在该项研究中，授乳婴儿接受Pro HIBit(PRP偶联于Dt；Connaught)代替Act-HIB。并且，预期不论是哪一种基于偶联多糖的疫苗，在偶联疫苗中或联合或组合疫苗给药时，Dt和Tt或任何其它蛋白存在最大负荷，超过这一负荷对与蛋白偶联的多糖的免疫应答会降低。为了克服由多糖偶联物组成的多价疫苗中的负面影响这一问题，本专利技术提出使用不是一种而至少是两种载体蛋白，从而不会达到每种载体蛋白的最大负荷。因此，本专利技术的主题是含有n种偶联物C1到Cn的组合物，每种偶联物由以下成分组成i)多糖，特别是分别来自肺炎链球菌血清型/血清组S1到Sn的多糖，ii)载体蛋白P1到Pn，n等于或大于2；在该组合物中，多糖S1到Sn相同或不同，载体蛋白P1到Pn各自独立地选自m种载体蛋白A1到Am，m等于或大于2，条件是载体蛋白P1到Pn中至少有一种与其它蛋白不同。另一方面，本专利技术的主题是含有n种偶联物C1到Cn的组合物，每一种偶联物由以下成分组成i)多糖S1到Sn，ii)载体蛋白P1到Pn，n等于或大于2；其中多糖S1到Sn相同或不同，载体蛋白P1到Pn各自独立地选自白喉(Dt)和破伤风(Tt)类毒素，条件是载体蛋白P1到Pn中至少有一种与其它蛋白不同；其特征在于，Dt和Tt的量分别小于或等于200和50μg/剂。换而言之，本专利技术的组合物含有多糖偶联于白喉类毒素(Dt)的一种或多种多糖偶联物和多糖偶联于破伤风类毒素(Tt)的一种或多种多糖偶联物，其特征在于Dt和Tt的量分别小于或等于200和50μg/剂。例如，本专利技术包括以下组合物1).含有通式S1-P1，S2-P2，S3-P3......Sn-Pn的C1，C2，C3，...Cn偶联物中至少3种的组合物，其中，S1到Sn彼此相同，P1到Pn彼此各不相同；2).含有通式S1-P1，S2-P2，S3-P3......Sn-Pn的C1，C2，C3，...Cn偶联物中至少3种的组合物，其中，S1到Sn彼此各不相同，P1和P2彼此相同，P3到Pn彼此相同，P1和P2与P3到Pn不同；3).含有通式S1-P1，S2-P2，S3-P3......Sn-Pn的C1，C2，C3，...Cn偶联物中至少3种的组合物，其中，S1和S2彼此相同，S3到Sn彼此相同，S1和S2与S3到Sn不同，P1和P3彼此相同，P2到Pn中除P3外彼此相同，P1和P3与P2到Pn(-P3)不同。因此，在本专利技术中，需要彼此各不相同的偶联物C1到Cn，可通过其多糖配对，或通过其载体蛋白配对，或通过其多糖和载体蛋白配对。根据一个具体实施方案，所使用的多糖彼此各不相同。组合物中偶联物的数值“n”等于或大于2，具体可以等于或大于3，4，6，8，10，11，12，15或20。通常，该数值n可由本领域技术人员确定，其为多种标准的函数，具体与以下因素有关组合物的性质，组合物要达到的目的，和组合物的目标人群。例如，在组合物旨在治疗或预防授乳婴儿的肺炎感染时，为了提供高水平和世界范围的保护，组合物中应当含有至少8个，优选至少10个，最优选至少11个效价，即至少含有11种或更多的偶联物。“多糖”是指由多个糖重复单位，特别是四个以上糖重复单位组成的聚合物，与多糖链的长度和多糖的平均分子量无关。该术语特别包括寡糖。“偶联物”是指多糖与载体蛋白共价连接的复合物。因此，如前所述，本专利技术的组合物应当使用至少两种载体蛋白。这些载体蛋白可选自疫苗领域常用的载体蛋白。具体可以是白喉类毒素(Dt)，破伤风类毒素(Tt)，白喉毒素的非毒性突变型CRM19本文档来自技高网...

【技术保护点】
含有ｎ种偶联物Ｃ１到Ｃｎ的组合物，每种偶联物由以下成分组成：ｉ）分别来自肺炎链球菌血清型／血清组Ｓ１到Ｓｎ的多糖，ｉｉ）载体蛋白Ｐ１到Ｐｎ，ｎ等于或大于２；在该组合物中，多糖Ｓ１到Ｓｎ相同或不同，载体蛋白Ｐ１到Ｐｎ各自独立地选自ｍ种载体蛋白Ａ１到Ａｍ，ｍ等于或大于２，条件是载体蛋白Ｐ１到Ｐｎ中至少有一种与其它蛋白不同。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：O勒罗伊，
申请(专利权)人：巴斯德梅里厄血清及疫苗公司，
类型：发明
国别省市：FR[法国]