用于预防和治疗移植中的免疫应答的肝脏基质细胞制造技术

本发明专利技术包括用于在受体中减少针对移植物的免疫应答的方法和组合物，其通过用有效地减少或抑制宿主对所述移植物的排斥的量的肝脏基质细胞治疗所述受体。本发明专利技术还公开了通过用肝脏基质细胞治疗而诱导减少的外源组织抗宿主免疫应答，即，移植物抗宿主疾病的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于预防和治疗移植中的免疫应答的肝脏基质细胞的制作方法
技术介绍
肝脏是一种在多种生理过程中起重要作用的动力学器官。肝脏的复杂功能包括新陈代谢、储存、排泄、胞质蛋白诸如白蛋白的分泌以及通过细胞色素P-450系统的酶进行的有害物质的解毒作用。另外，在某些环境下，通常静止的肝脏也能有显著的有丝分裂活性。肝脏的主要细胞群是实质细胞(PC)，也叫作肝细胞。肝脏还包含一些其它的细胞类型，诸如内皮细胞、脂肪细胞、成纤维细胞和Kupffer细胞。当肝脏受到损伤或者部分移除时，肝细胞进行快速再生的能力使得肝脏成为干细胞的潜在来源。目前，据信肝脏具有干细胞和谱系(lineage)系统，其具有几种内脏、皮肤和造血系统的相似物(Sigal等.，1993 Amer.J.Physiol.，263139-148)。同样地，在所有年龄的动物肝脏中存在祖先细胞群。当从肝脏分离时，这些细胞可以作为细胞治疗的潜在的候选。哺乳动物免疫系统在保护个体免受传染剂和防止肿瘤生长中起着关键作用。然而，相同的免疫系统可以产生不理想的作用，诸如对来自不相关供体的细胞、组织和器官的排斥。免疫系统不能区分有利的入侵物诸如移植的组织和有害的那些入侵物，并且因此免疫系统排斥移植的组织或器官。移植器官的排斥通常由宿主中存在的同种异体反应性T细胞介导，其识别供体同种异体抗原或异种抗原。作为抗原-诱导的功能性失活或对所述抗原特异的淋巴细胞的死亡的结果，免疫耐受性是针对特异抗原的活性诱导的不反应性。诱导这样的耐受性的抗原叫作“耐受原”，以便与免疫原区分开来，所述免疫原是产生免疫应答的抗原。B细胞耐受性和不能产生抗体的一种机制包括在不存在辅助T细胞或其它抗原呈递细胞的刺激时(B细胞活化的第二步)抗原与特异性B细胞的相互作用(B细胞活化的第一步)。已经提出了B细胞耐受性的其它机制。例如，在不存在T细胞时，由于表面免疫球蛋白-介导的信号传导的封闭(“抗原-竞争”)，B细胞可以变得没有反应力。另外，在不存在抗原呈递细胞的共同刺激时，B细胞表面免疫球蛋白通过抗原的强交联可以诱导正常的、成熟的B细胞的程序性细胞死亡，但是不在产生自体免疫抗体的B细胞中诱导程序性细胞死亡(Tsubata等.，1994，Curr.Biol.48-17)。T细胞耐受性这样获得1)在胸腺中，其中与自体肽起反应的胸腺细胞通过克隆缺失而被消除(中心耐受性)，和2)在周隙中，通过在耐受原条件下暴露于自体抗原(外周耐受性)。克隆缺失还可以由细胞死亡分子在抗原呈递细胞上的表达而引起。细胞死亡分子的经典实例是Fas配体(FasL)和肿瘤坏死因子-相关的程序性细胞死亡-诱导的配体(TRAIL配体)，其在激活的T细胞上分别连接它们的受体，Fas和DR4，这诱导T细胞的程序性细胞死亡。TNFR超家族的一员CD27和CD27-配体(CD70)的相互作用也诱导T细胞的程序性细胞死亡。遗传全异的个体之间的细胞、组织和器官移植总是与移植排斥的风险相关。几乎所有细胞都表达主要组织相容性复合体的产物，I类MHC分子。此外，当暴露于炎性细胞因子时，许多细胞类型可以被诱导表达II类MHC分子。其它的免疫原性分子包括那些衍生于次要组织相容性抗原的分子，诸如由雌性受体识别的Y染色体抗原。同种异体移植物的排斥主要由CD4和Cd8亚类的T细胞介导(Rosenberg等.，1992 Annu.Rev.Immunol.10333)。同种异体反应性的CD4 T细胞产生加剧针对同种异体抗原的溶细胞性CD8反应的细胞因子。在这些亚类中，抗原刺激后，发展细胞的竞争亚群，其特征在于它们产生的细胞因子。产生IL-2和IFN-γ的Th1细胞主要参与同种异体移植排斥(Mossmann等.，1989 Annu.Rev.Immunol.7145)。产生IL-4和IL-10的Th2细胞可以通过IL-10下调Th1应答(Fiorentino等.1989 J.Exp.Med.1702081)。实际上，已经花费了很多努力来将不需要的Th1应答转换成Th2途径。患者中不需要的同种异体反应性T细胞应答(同种异体移植排斥、移植物抗宿主疾病)典型地用免疫抑制性药物诸如泼尼松、硫唑嘌呤和环孢素A进行治疗。不幸地，这些药物通常需要患者终生施用，并且它们具有多种危险的副作用，包括普遍的免疫抑制作用。器官移植的主要目的是供体器官的永久性移植，不诱导由受体产生的移植排斥免疫应答，同时保持受体针对其它外来抗原的免疫活性。典型地，为了预防宿主排斥反应，使用非特异性的免疫抑制剂，诸如环孢素、甲氨喋呤、类固醇和FK506。这些药剂必须以每日基础进行施用，并且如果停止施用，通常产生移植排斥。然而，使用非特异性免疫抑制剂的主要问题是，它们通过抑制免疫应答的所有方面而起作用，从而极大地增加了受体对传染病和其它疾病包括癌症的敏感性。此外，尽管使用了免疫抑制剂，移植排斥仍然保持为人器官移植中的发病率和死亡率的主要来源。大部分人移植在10年内失败，而没有永久的移植接受性。只有50％的心脏移植存活5年，和20％的肾移植存活10年。(Opelz等.，1981，Lancet 11223)。目前，据信成功的移植取决于预防和/或减少宿主针对移植物的不需要的免疫应答，所述免疫应答由免疫效应细胞介导，从而改变宿主对供体组织的排斥。消除或者减少供体组织针对受体组织的不需要的免疫应答(叫作移植物抗宿主疾病)的方法对于成功的移植也是有利的。因此，对于用来抑制或者另外防止与遗传全异个体之间的细胞、组织和器官的移植相关的不需要的免疫应答的方法存在长久的需要。本专利技术满足这一需要。专利技术简述本专利技术包括减少受体中针对移植物的免疫应答的方法，其通过用有效地减少或抑制宿主对移植物的排斥的量的肝脏基质细胞(LSCs)治疗受体。本专利技术还包括通过用LSCs处理而诱导减少的外源组织抗宿主免疫应答，即，移植物抗宿主疾病的方法。所述LSCs可以在移植之前、同时或之后进行施用。本专利技术还包括治疗移植受体以在受体中减少效应细胞针对所述效应细胞的同种异体抗原的免疫应答的方法，所述方法包括给移植受体施用有效量的LSCs，以减少效应细胞针对所述效应细胞的同种异体抗原的免疫应答，由此在移植受体中，效应细胞具有针对同种异体抗原的减少的免疫应答。在一个实施方案中，所述效应细胞是T细胞。在另一个实施方案中，所述T细胞来自供体，并且所述同种异体抗原来自受体。在另一个实施方案中，所述T细胞来自受体，并且所述同种异体抗原来自供体。在另一个实施方案中，所述T细胞存在于移植物中。在另一个实施方案中，所述移植物是骨髓。在另一个实施方案中，所述移植物是造血干细胞。在一个实施方案中，所述移植物是神经干细胞。在另一个实施方案中，所述LSCs在施用给移植受体之前在培养物中被扩展(expanded)。在另一个实施方案中，所述效应细胞是先前激活的来自供体的T细胞，为了激活所述T细胞，其通过在移植前将T细胞与来自受体的细胞或组织接触而激活，并且其中所述免疫应答是T细胞的再激活。在另一个实施方案中，将所述LSCs施用给移植受体，以治疗受体对移植物的排斥。在另一个实施方案中，所述LSCs是人LSCs。在一个实施方案中，所述方法还包括给受体施用免疫抑制剂。在一个实施方案中，所述移植物是实体器官。优选本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种治疗移植受体以在所述受体中减少效应细胞针对所述效应细胞的同种异体抗原的免疫应答的方法，所述方法包括：　　　　给移植受体施用有效量的肝脏基质细胞，以有效地减少效应细胞针对所述效应细胞的同种异体抗原的免疫应答，由此在移植受体中，所述效应细胞具有针对所述同种异体抗原的减少的免疫应答。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】US 2004-9-10 60/609,0771.一种治疗移植受体以在所述受体中减少效应细胞针对所述效应细胞的同种异体抗原的免疫应答的方法，所述方法包括给移植受体施用有效量的肝脏基质细胞，以有效地减少效应细胞针对所述效应细胞的同种异体抗原的免疫应答，由此在移植受体中，所述效应细胞具有针对所述同种异体抗原的减少的免疫应答。2.权利要求1的方法，其中所述效应细胞是T细胞。3.权利要求2的方法，其中所述T细胞来自供体，并且所述同种异体抗原来自所述受体。4.权利要求2的方法，其中所述T细胞来自所述受体，并且所述同种异体抗原来自供体。5.权利要求2的方法，其中所述T细胞存在于移植物中。6.权利要求1的方法，其中所述移植物是骨髓。7.权利要求1的方法，其中所述移植物是造血干细胞。8.权利要求1的方法，其中所述移植物是神经干细胞。9.权利要求1的方法，其中在所述的给移植受体施用肝脏基质细胞之前，所述肝脏基质细胞已经在培养物中扩展。10.权利要求1的方法，其中所述效应细胞是先前活化的来自供体的T细胞，为了激活所述T细胞，在移植之前，通过将所述T细胞与来自受体的细胞或组织接触而激活，并且更进一步地，其中所述免疫应答是所述T细胞的再活化。11.权利要求1的方法，其中将所述肝脏基质细胞施用给移植受体，以治疗受体对移植物的排斥。12.权利要求1的方法，其中所述肝脏...

【专利技术属性】
技术研发人员：凯文R麦金托什，
申请(专利权)人：同源治疗公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]