免疫调制聚合物制造技术

本文提供了诱导ＩＬ－２分泌，诱导ＩＬ－１０分泌，激活Ｔ细胞，抑制对特异抗原的ＩｇＧ抗体反应，改善同种异体移植存活，减少术后手术粘连形成，抵抗与外科手术、损伤或易使宿主脓肿形成的疾病有关的脓肿形成的方法和产品。本发明专利技术的方法通过使用免疫调制剂来实施，该免疫调制剂是含有被至少一个确定的最小距离隔开的至少两个重复电荷基元的聚合物。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术的领域本专利技术涉及调制免疫反应的免疫调制剂和方法。本专利技术还涉及激活T细胞，诱导IL-2，使受试体免于遭受细菌感染或污染引起的脓肿的形成，及在受试体内减少术后外科粘连的形成。使患者对脓肿形成免疫，如在腹部内手术的情况下一直是不切实际的，因为有太多的能引起脓肿形成的细菌菌株，而对一种细菌的抵抗作用不会具有抵抗另一种细菌的性能。此外，接种疫苗和随后的免疫反应诱导是否会对任何具体细菌引起的脓肿形成都有充分的抵抗作用还未确定。并且，对于人类还存在与服用活的或减毒细菌菌株有关的问题和危险，进一步阻碍了制备含有多种不同细菌的疫苗的努力。在人类的一些细菌致病源的表面可发现覆盖着荚膜多糖。多糖已定性为不依赖于T细胞的抗原，仅引起体液抗体反应。尽管多种多糖已显示出是免疫原性的，但一些多糖最好也不过是弱免疫原性的。类杆菌属(Bacteroides fragilis)是从腹内脓肿分离出来的起支配作用的厌氧生物。荚膜多糖复合物(CPC)已确定为引发脓肿形成的类杆菌属(B.fragilis)区域。这种碳水化合物复合物覆盖在类杆菌属(B.fragilis)表面。单独的分离复合物能与宿主免疫系统相互作用，在存在辅剂的情况下(灭菌盲肠内容物和硫酸钡)，引发病理生物反应，在腹腔内注射复合物的个体内产生充分形成的腹腔内脓肿。研究在啮齿动物模型中实施，其中类杆菌属(B.fragilis)或其CPC实施腹腔内注射。完整的类杆菌属(B.fragilis)和单独的CPC都能促使与腹内脓血症有关的脓肿形成。对是否类杆菌属(B.fragilis)的CPC能用来免疫接种受试体抵抗由类杆菌属(B.fragilis)引起的并发感染和脓肿形成进行了研究。这种研究可能仅基于单独的CPC促使脓肿形成的属性，因为“免疫性”和脓肿形成是由间接相关免疫性反应引起的还不了解，所以它决不是可预测的。当皮下服用CPC时，在田鼠模型中发现了对腹腔内CPC-介导脓肿诱导免疫学上的抵抗作用。确定由这种多糖复合物引起的脓肿形成由依赖于T细胞宿主反应介导。尽管在用类杆菌属(B.fragilis)或CPC攻击后，皮下服用类杆菌属(B.fragilis)或CPC足以使动物免于遭受脓肿形成，但没有如所预计的对其他细菌菌株有免疫性。因此，它们不能用作为由在结肠中常发现的多种生物体引起的脓肿形成的“疫苗”。CPC包括两种不同的大分子量多糖，称为A和B。每种多糖由不同的寡糖重复单元组成，具有含有游离氨基，羧基和磷酸酯基团的不常见的组分糖。多糖糖A含有四糖重复单元，具有平衡的正电氨基基团和负电羧基基团。多糖B含有六糖重复单元，包括含有游离氨基和负电磷酸盐基团的不常见的磷酸2-氨基乙基酯取代基。半乳糖醛酸残基含有一个额外的负电羧基基团。两条糖链之间的离子相互作用牢固地将多糖A和B结合成大分子量的CPC复合物。对于到目前为止已检测的所有类杆菌属(B.fragilis)菌株，复合物荚膜基元是一个保留特性。目前，已发现含有具体结构基元的多糖能使动物免于遭受诱导脓肿细菌的攻击。美国专利Nos.5,700,787和5,679,654。较好地，多糖是类杆菌属(B.fragilis)的多糖A的电荷基元特性的重复单元聚合物，基元是一个正电游离氨基组成和从下列组中选取的一个负电组成，包括羧基，磷酸盐，磷酸酯，硫酸盐和磺酸酯。这样的聚合物能诱导“交叉抵抗作用。”即，单一聚合物能产生对由多种细菌引起的脓肿形成的抵抗作用。因此，聚合物可用来诱导对与手术，损伤或使宿主易患脓肿的疾病有关的脓肿形成的抵抗作用。聚合物的药物制备品可结合腹部内手术给受试体服用，或根据易患脓肿的病况的表现给受试体服用。在先有技术中还有报道，当几种细胞因子，如白细胞介素-10(IL-10)，用作为阻断脓肿形成的常用免疫调制剂时，其他细胞因子，如白细胞介素-2(IL-2)，肿瘤坏死因子，和干扰素可能参与了脓肿形成，因为对这些物质特异的抗体可协助阻断脓肿形成，美国专利Nos.5,700,787。术后手术粘连是腹部，骨盆，妇产科，心脏胸外科，整形外科和神经外科手术的一种主要并发症。腹部内的手术粘连有很高的发病率并能致命。它们可能导致肠阻塞和器官衰竭。仅在美国每年实施约150万例腹部手术。这些手术中的25％到35％病例导致手术粘连。对引发肠阻塞和器官衰竭的粘连的修复需要重新手术将粘连除去。传统上，这些粘连认为是由包括操作性损伤和在手术本身进行期间组织变干的综合因素引起的。很多试图改善这些情况的技术预先已有描述。直接减少术后手术粘连形成的通用临床方法通常是将膜或凝胶直接放置到手术部位中，目的是在可能变成与粘连形成有关的表面之间造成物理阻挡。对于外科医生这些方法很麻烦。为了最小化组织变干在外科手术前或期间已使用了多种聚合物的高度浓缩溶液来覆盖手术区域，并用作衬垫来预防一些操作性损伤。这些技术的实例在Goldberg等人的美国专利No.4,819,617和De Belder等人的美国专利No.4,886,787中进行了描述。所使用的物料中有聚乙烯吡咯烷酮(PVP)，右旋糖苷，羧甲基纤维素，和多种其他聚合物如蛋白质或多肽溶液。一种用来减少术后手术粘连形成的聚合物是透明质酸(HA)。Goldberg等人的系列专利，具体地是美国专利No.5,140,016，显示用透明质酸溶液对手术部位进行与处理作为一种预防手术粘连的一种方式。Goldberg公开当用来进行手术粘连预防时，大分子量的HA(＞500kDa)的稀释溶液在0.01到0.6％(重量/体积)浓度时有效。约1500kDa分子量的HA的0.01％溶液可有效地预防通常产生超过70％粘连作用的田鼠粘连模式中所有严重的腹部内粘连现象。同脓肿形成一样，术后手术粘连形成与炎症部位内的血纤蛋白沉积有关。虽然粘连形成的确切机理还不了解，但很多注意力集中在转化生长因子β(TGF-β)特别是TGF-β1的明显作用上。TGF-β在调节炎性反应和成纤维细胞产生胞外基质中是一个关键因素。这两个过程与腹部手术后纤维性粘连的形成相关。TGF-β还增加了整联蛋白受体的合成，从而增强了细胞和胞外基质间的相互作用。在田鼠中，Lucas等人使用腹部粘连模型演示了与接受对照物IgG，抗-TGF-β2或泛特异抗-TGF-β的田鼠相比，注射抗-TGF-β1的田鼠具有显著较低的粘连评分。Lucas PA等人，外科研究期刊，65135(1996)。Elson的美国专利No.5,679,658中公开了一种预防手术粘连的方法，其中手术部位用有效量的共价交联的N，O-羧甲基几丁聚糖(NOCC)凝胶覆盖，并在手术操作后使用未交联的NOCC溶液灌洗。NOCC是一种聚合物，其中在几丁聚糖结构的葡萄糖胺单元的一些氨基和伯羟基部位上都存在羧甲基取代基。Hayes的美国专利No.4,619,995。使用此领域中已知的传统方法可将NOCC交联到稳定凝胶中。Krause等人研究了NOCC对粘连形成的作用影响TGF-β活性调节的可能性。Krause，TJ等人，研究外科血期刊，11105(1998)。Krause等人在田鼠中使用肠阻塞模型，报道NOCC可以抑制释放到血清和腹腔中的细胞增殖抑制剂的量。然而，这种活性与如使用TGF-β中和抗血清和TGF-β抗性细胞增殖本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种药物组合物，包括：含有至少两个重复电荷基元少于５０千道尔顿的聚合物和药物可接受的载体，其中重复电荷基元由正电游离氨基组分和负电荷组成，其中至少两个重复电荷基元的正电游离氨基组分被至少３２埃的间插序列隔开，其中间插序列是中性的。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：阿瑟O特兹安鲍斯，丹尼斯L凯斯佩尔，安德鲁B奥德多克，王英，
申请(专利权)人：布赖汉姆妇女医院，
类型：发明
国别省市：US[美国]