新的无白蛋白的因子Ⅷ制剂制造技术

不以白蛋白配方的因子Ⅷ组合物，其包括因子Ⅷ及下列制剂赋形剂：４％至１０％的选自一组包括甘露醇、甘氨酸和丙氨酸的填充剂；１％至４％的选自一组包括蔗糖、海藻糖、棉子糖和精氨酸的稳定剂；１ｍＭ至５ｍＭ的钙盐；１００ｍＭ至３００ｍＭ ＮａＣｌ；以及使ｐＨ保持在约６和８之间的缓冲剂。此外，该制剂可以包括２％至６％的羟乙基淀粉；１％至４％的选自一组包括蔗糖、海藻糖、棉子糖和精氨酸的稳定剂；１ｍＭ至５ｍＭ的钙盐；１００ｍＭ至３００ｍＭ ＮａＣｌ；以及使ｐＨ保持在约６和８之间的缓冲剂。在另一种实施方案中，该制剂可以包括：３００ｍＭ至５００ｍＭ ＮａＣｌ；１％至４％的选自一组包括蔗糖、海藻糖、棉子糖和精氨酸的稳定剂；１ｍＭ至５ｍＭ的钙盐；和缓冲剂。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本
技术介绍
因子VIII是在血浆中发现的导致凝血地级联反应中的辅助因子。血液中因子VIII活性量的缺乏可导致称为甲型血友病的凝血障碍，一种主要影响男性的遗传病。目前甲型血友病以因子VIII的疗效性制剂治疗，所述因子VIII制剂来源于人血浆或采用重组DNA技术制备。这些制剂或者针对急性出血(需要治疗)给药或者经常性间隔给药以防止失控性出血(预防)。已知因子VIII在疗效性制剂中相对不稳定。在血浆中，因子VIII通常与另一种血浆蛋白，维勒布兰得(von Willebrand)因子(vWF)形成复合体，后者以大于因子VIII的摩尔量存在于血浆并且被认为可防止因子VIII的早熟降解。另一种循环血浆蛋白，白蛋白，可能也在体内起到稳定因子VIII的作用。因此目前市售的因子VIII组合物主要依靠采用白蛋白和/或vWF使因子VIII在制备过程和贮藏过程中保持稳定。目前应用于市售的因子VIII组合物中的白蛋白和/或vWF来源于人血浆，然而，这些物质的采用存在某些缺点。由于通常加入比因子VIII大的摩尔量的白蛋白以增加因子VIII在这些制剂中的稳定性，因而这些制剂中因子VIII蛋白难以体现其自身特性。对重组制备的因子VIII组合物来说加入来源于人的白蛋白到因子VIII中也发现是有缺陷的。这是因为没有这些另加的白蛋白时，重组来源的因子VIII组合物不会含有来源于人的蛋白，因此理论上的传播病毒的危险应当会减少。配制不含白蛋白或vWF(或使用相对低水平的这些赋形剂)的因子VIII的几种尝试已有描述。例如，Freudenberg的美国专利No.5565427(EP 508194)(转让至Behringwerke)中描述的因子VIII组合物中，除赋形剂如氯化钠和蔗糖外，还含有去污剂和氨基酸的特殊组合，特别是精氨酸和甘氨酸。所描述的去污剂，聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80，以0.001至0.5％(v/v)间的量存在，而精氨酸和甘氨酸的存在量在0.01至1mol/L之间。所描述的蔗糖存在量在0.1至10％之间。该专利的实施例2提出了溶液中稳定性不超过16小时的溶液(1)0.75％蔗糖、0.4M甘氨酸、和0.15M NaCl，和(2)0.01M柠檬酸钠、0.08M甘氨酸、0.016M赖氨酸、0.0025M氯化钙、和0.4M氯化钠，而溶液(3)1％蔗糖、0.14M精氨酸、0.1M氯化钠以及(4)1％蔗糖、0.4M甘氨酸、0.14M精氨酸、0.1M氯化钠、和0.05％吐温80则呈现出稳定性。Nayer的美国专利No.5763401(欧洲专利818204)(转让至Bayer)也描述了不含白蛋白的治疗用因子VIII制剂，其包括15-60mM蔗糖、最多50mM的NaCl、最多5mM的氯化钙、65-400mM甘氨酸、以及最多50mM的组氨酸。下列特定制剂经检测是稳定的(1)150mMNaCl、2.5mM氯化钙、和165mM甘露醇；和(2)1％蔗糖、30mM氯化钠、2.5mM氯化钙、20mM组氨酸、和290mM甘氨酸。发现一种糖含量较高的制剂(10％麦芽糖、50mM NaCl、2.5mM氯化钙、和5mM组氨酸)在冷冻干燥状态下与制剂(2)相比呈现出较差的稳定性。Osterberg的美国专利No.5733873(欧洲专利627924)(转让至Pharmacia & Upjohn)公开的制剂中含有0.01-1mg/ml的表面活性剂。该专利公开的制剂中含有下列范围内的赋形剂至少0.01mg/ml量的聚山梨醇酯20或80，优选0.02-1.0mg/ml；至少0.1M NaCl；至少0.5mM钙盐；和至少1mM组氨酸。更特殊地，下列特别实施例被公开(1)14.7-50-65mM组氨酸、0.31-0.6M NaCl、4mM氯化钙、0.001-0.02-0.025％聚山梨醇酯80、有或无0.1％ PEG 4000或19.9mM蔗糖；以及(2)20mg/ml甘露醇、2.67mg/ml组氨酸、18mg/ml NaCl、3.7mM氯化钙、和0.23mg/ml聚山梨醇酯80。其它采用低或高浓度氯化钠的尝试也被描述。Lee的美国专利No.4877608(欧洲专利315968)(转让至Rhone-Poulenc Rorer)指出含相对低浓度氯化钠的制剂，即制剂含有0.5mM-15mM NaCl、5mM氯化钙、0.2mM-5mM组氨酸、0.01-10mM赖氨酸盐酸盐和最多10％的糖。该“糖”可以是最多10％的麦芽糖、10％蔗糖、或5％甘露醇。Lee的美国专利5605884(欧洲专利0314095)(转让至Rhone-Poulenc Rorer)指出含有相对高浓度氯化钠的制剂。这些制剂包括0.35M-1.2M NaCl、1.5-40mM氯化钙、1mM-50mM组氨酸、和最多10％的“糖”如甘露醇、蔗糖或麦芽糖。作为实例的一种制剂中含有0.45M NaCl、2.3mM氯化钙、和1.4mM组氨酸。Roser的国际专利申请书WO 96/22107(转让至Quadrant HoldingsCambridge Limited)描述了含有海藻糖的制剂。这些制剂包括(1)0.1MNaCl、15mM氯化钙、15nM组氨酸、和1.27M(48％)海藻糖；或(2)0.011％氯化钙、0.12％组氨酸、0.002％ Tris、0.002％吐温80、0.004％PEG 3350、7.5％海藻糖、和0.13％或1.03％ NaCl。已有技术中的其它治疗用因子VIII组合物一般包含为使因子VIII稳定的白蛋白和/或vWF，因而与本专利技术无关。例如，Schwinn的美国专利No.5328694(EP 511234)(转让至Octapharma AG)描述的制剂中包括100-650mM二糖和100mM-1.0M氨基酸。特别是，公开了下列制剂(1)0.9M蔗糖、0.25M甘氨酸、0.25M赖氨酸、和3mM氯化钙；以及(2)0.7M蔗糖、0.5M甘氨酸、和5mM氯化钙。尽管已经进行了几项配制不含白蛋白或vWF的因子VIII的尝试，但对在不含白蛋白或其它蛋白下稳定的治疗用因子VIII制剂的需求仍然存在。本专利技术概述本专利技术涉及在不含白蛋白条件下的稳定的治疗用因子VIII组合物。特别地，本专利技术包括因子VIII组合物，除因子VIII外，还包含4％至10％的选自甘露醇、甘氨酸和丙氨酸的填充剂；1％至4％的选自蔗糖、海藻糖、棉子糖、精氨酸的稳定剂；1mM至5mM钙盐；100mM至300mM NaCl；以及使pH保持在约6和8之间的缓冲剂。该组合物还可含表面活性剂如聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯80、普卢兰尼克(Pluronic)F68、或玻雷吉(Brij)35。当表面活性剂为聚山梨醇酯80时，其存在量应低于0.1％。根据本专利技术的因子VIII组合物的缓冲剂优选以10mM至50mM的浓度存在，并优选选自组氨酸、Tris、BIS-Tris丙烷、PIPES、MOPS、HEPES和ACES。缓冲剂最好是组氨酸或Tris。本专利技术的因子VIII组合物还可以包含抗氧化剂。本专利技术的因子VIII组合物同时包括填充剂和稳定剂。填充剂的存在量可以从约6％至约8％，优选约8％。稳定剂的存在量优选约2％。氯化钠也存在于这些组合物中，优选量本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种因子Ⅷ组合物，所述组合物在配制时不加入白蛋白，除因子Ⅷ外还包括下列制剂赋形剂：４％至１０％的填充剂，其选自甘露醇、甘氨酸和丙氨酸；１％至４％的稳定剂，其选自蔗糖、海藻糖、棉子糖和精氨酸；１ｍＭ至５ｍＭ的钙盐；１００ｍＭ至 ３００ｍＭ ＮａＣｌ；和维持ｐＨ在约６和８之间的缓冲剂。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：M贝斯曼，E比约恩松，F雅梅，R卡施，M皮拉，S彻萨洛夫，J卡彭特，
申请(专利权)人：巴克斯特国际有限公司，康涅狄格州大学，
类型：发明
国别省市：US[美国]