含有来源于肌肉的活性成分的组合物制造技术

本发明专利技术涉及一种具有下列特征的生物活性物质组合物：（ｉ）它来源于肌肉组织；（ｉｉ）它通过最大截留分子量大约为１０，０００道尔顿，优选小于３，０００道尔顿的滤膜过滤；以及（ｉｉｉ）它具有抑制肿瘤细胞增殖和刺激白细胞和嗜中性白细胞增殖的生物效应；以及制备上述物质组合物的方法。本发明专利技术还涉及含有此处公开的物质组合物的药物和辅助（ｎｅｕｔｒａｃｅｕｔｉｃａｌ）制剂。按照一种实施方案，此药物制剂用于治疗或预防癌症。按照另一种实施方案，此药物制剂可以用于增强细胞毒性药物对靶细胞例如癌细胞的效力。此药物制剂可以胃肠外给药，但是优选口服给药。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术一般涉及一种新的用于生产抑制肿瘤细胞生长和刺激正常细胞增殖的组合物的方法。本专利技术还涉及这样一种组合物在预防和治疗多种恶性疾病中的用途。它还可以联合化疗治疗使用。术语下面是说明书和权利要求书中贯穿使用的词，按照本专利技术它们应该理解如下生物活性——具有下列生物活性抑制肿瘤细胞的增殖、刺激白细胞主要是嗜中性白细胞的增殖、体内抗转移效应和减少化疗治疗的细胞毒性副作用。物质组合物——含有一种或多种每种均具有一种或多种生物活性的物质的组合物。肌肉组织——直接从动物中获得的肌肉组织或细胞。为了从肌肉组织或细胞中制备生物活性组合物，此肌肉组织或细胞可以在从动物中获得后立即使用，或在使其最终能够制备本专利技术组合物的条件下保存不同的时间。靶细胞——受组合物影响的细胞。抗-转移效应——预防或减轻受治疗者转移进程的效应。此效应可以表现在预防转移灶的出现、降低转移性肿瘤的发生率、或降低个体中出现的转移性肿瘤的数目、或降低癌症的死亡率。化学保护效应——减轻化疗的细胞毒性副作用，特别是在接受化疗治疗的个体中白细胞和嗜中性白细胞减少的细胞毒性副作用。本专利技术的
技术介绍
具有小于3kD的分子量并且能够抑制多种肿瘤细胞增殖的小分子，以前已经描述于国际专利申请公开说明书No.WO 96/09060中。这些分子，被称为“肌肉因子”(MF)，显示出一方面对肿瘤细胞具有抑制性，另一方面在体外可以促进非肿瘤、正常细胞例如成纤维细胞和骨髓细胞的增殖。由于可以降低或预防接受化疗治疗的个体白细胞数目和嗜中性白细胞百分数减少，这些MF还发挥出一种体内的化学保护效应。上述MF从于培养物中生长的肌肉细胞或白细胞的培养基中制备。本专利技术的一般描述按照本专利技术发现具有非常有效的生物活性的物质组合物，可以从多种动物来源所获得的肌肉组织中较容易地大量制备。因此，本专利技术提供了一种制备生物活性物质组合物的方法，该方法包括(i)提供肌肉组织；(ii)在液体介质中处理组织；条件是其中组织中包含的所述物质的组合物游离进入介质成为上清液；(iii)从细胞物中分离上清液；以及(iv)从上清液中分离包含分子量低于大约10,000道尔顿，优选低于大约3,000道尔顿的组分；所述组分为所述生物活性的物质组合物。可以从中制备本专利技术的生物活性物质组合物的肌肉组织，可以是例如鸡肉，可以是火鸡肉、牛肉、猪肉等。本专利技术的生物活性物质组合物可以跨物种发挥其作用。因此，例如，从鸡的肌肉组织中制备的所述物质组合物将影响哺乳动物包括人的靶细胞。本专利技术的物质组合物可以在从动物中提取出肌肉组织后立即从肌肉组织中制备。或者，提取的肌肉组织可以在从动物中提取出后，在将不妨碍最终从中制备出生物活性物质组合物的条件下，保存不同的时间。这样的条件可以是例如冷藏，有时用防腐剂。而且，肉还可以是煮熟的，一般是适中的，并且在煮肉的肉汤中储存了一段时间。这样的煮制本身提高了物质组合物向周围培养基中的释放，因此，肉汤有时也可以用于制备本专利技术的物质组合物。从肌肉组织中获得的生物活性物质组合物可以是天然的粗提取物的形式。天然的粗提取物可以以原始的液体形式保存，或者例如通过冷冻干燥进行干燥后保存。另外，本专利技术的物质组合物还可以是纯化的提取物的形式。为了获得较纯的物质组合物物，还可以对如上所述从上清液中分离的组分进行附加的纯化步骤，例如通过层析法分离，一般是高压液相层析(HPLC)，例如反向高压液相层析。另外，还可以对原始的制剂进行附加的过滤步骤，还可以通过渗析等进一步纯化。通过上述方法获得的本专利技术的生物活性物质组合物被发现具有几种生物活性。首先，此组合物抑制恶性细胞的增殖。与此相反，本专利技术的物质组合物不抑制非恶性细胞的增殖，而且有时刺激白细胞特别是嗜中性白细胞的增殖。本专利技术的物质组合物的另一个生物活性是它的体内抗转移效应。此物质组合物在多种动物模型中的给药显示与未经过本专利技术的物质组合物治疗的患肿瘤的动物相比，试验动物中的感染灶的数目减少。除上述的活性外，本专利技术的物质组合物还在接受化疗治疗的个体中具有一种化学保护效应。这样的治疗对许多细胞包括造血细胞例如骨髓细胞、白细胞特别是嗜中性白细胞及其他等具有严重的细胞毒性副作用。本专利技术的物质组合物减轻或抑制了这样的治疗的一些毒性作用，使得非恶性白细胞的数目非常有限的减少，并且有时甚至增加了接受本专利技术的组合物联合治疗的个体中白细胞，主要是嗜中性白细胞的数目。当本专利技术的物质组合物胃肠外给药以及口服给药时，均发挥其生物活性。按照本专利技术，本专利技术的物质组合物口服给药是优选的给药方式，这一点在下面也将说明。本专利技术还提供了一种具有下列特征的生物活性物质组合物(i)它来源于肌肉组织；(ii)它通过最大截留分子量大约为10,000道尔顿，优选小于3,000道尔顿的滤膜过滤；(iii)它具有抑制肿瘤细胞增殖和刺激白细胞和嗜中性白细胞增殖的生物效应。优选地，所述物质组合物还具有一种抗转移活性。令人期望地是，本专利技术的组合物还在接受化疗治疗的个体中具有化学保护效应。本专利技术还提供了一种含有本专利技术的物质组合物作为一种活性成分的药物或辅助(neutraceutical)制剂。按照本专利技术还提供了一种治疗或预防癌症的方法，或一种抑制化疗毒性副作用的方法，它们包括向需要的个体给予有效量的本专利技术的物质组合物。如此处使用的“有效量”一词，应当理解为本专利技术的物质组合物足以达到所需治疗效果的数量。本专利技术还提供了所述物质组合物在生产药物或辅助(neutraceutical)制剂中的用途。本专利技术的物质组合物可以含有一种或多种活性物质，每种活性物质均具有此组合物的一种或多种生物活性。本专利技术的生物活性组合物具有低分子量，并且溶于水。“低分子量”一词，应当理解为能够通过最大截留分子量约为10,000道尔顿的滤膜过滤的物质的分子量。优选此组合物具有5,000道尔顿的最大分子量，最优选的组合物具有约3,000道尔顿的分子量。按照本专利技术的一个实施方案，本专利技术的生物活性物质组合物用于治疗或预防癌症。为了预防癌症，可以向没有患癌症的个体，特别是高危患癌个体，给予此物质组合物。在这种情况下，此物质组合物一般在一个延长的时间内，如以一日一次剂量、一日几次剂量作为一个单剂量，在数日内给药等。为了治疗癌症，可以向处于癌症各个阶段的个体给予本专利技术的物质组合物。一般地， 此物质组合物可以作为原发性癌的最初治疗例如为预防发展为转移性肿瘤进行的化疗、放疗或手术的后续治疗。但是，为了减少或防止肿瘤的生长，也可以向患有早期阶段癌症的个体给予本专利技术的物质组合物。按照这一实施方案，“有效量”一词，将是在所给的治疗方案中足以抑制或减少肿瘤细胞生长和增殖的此生物活性物质组合物的数量。在为了治疗癌症而给予此物质组合物的情况下，其有效量是使所述组合物将产生例如原发肿瘤生长抑制、转移性肿瘤发生率下降或在个体中出现的转移性肿瘤数目下降、或与癌症相关的死亡率下降的数量。在为了预防癌症而给予此组合物的情况下，其有效量将是所述组合物在接受治疗的个体中足以抑制或减少原发性肿瘤的发生率的数量。按照本专利技术的另一个实施方案，此物质组合物可以用于抑制(即预防或减轻)化疗药物的一些细胞毒性副作用。如上所述，这样的药物的主要细胞毒性作用是接受如此治疗的个体中白细胞数量特别是嗜中性白细胞数量的减本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种制备生物活性物质组合物的方法，该方法包括：（ｉ）提供肌肉组织；（ｉｉ）在液体介质中处理组织；条件是组织中包含的所述物质游离进入介质成为上清液；（ｉｉｉ）从细胞物中分离上清液；（ｉｖ）从上清液中分离包含分子量低于大约１０， ０００道尔顿，优选低于大约３，０００道尔顿的组分；所述组分为所述生物活性组合物。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：P费施曼，
申请(专利权)人：坎菲特生物药物有限公司，
类型：发明
国别省市：IL[以色列]