用于治疗糖尿病的方法和组合物技术

本发明专利技术涉及哺乳动物血液干细胞优选ＣＤ３４＋／ＣＤ３８－细胞的ＴＶＥＭＦ扩增，还涉及由ＴＶＥＭＦ扩增细胞产生的组合物，还涉及使用所述组合物治疗疾病或修复组织的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于治疗糖尿病的方法和组合物的制作方法用于治疗糖尿病的方法和组合物 专利
本专利技术涉及修复和/或再生胰腺组织包括胰岛细胞的方法以及提 供这种修复和/或再生的组合物。
技术介绍
哺乳动物尤其是人类胰腺组织的再生长期以来是医学界的期 望。就一些组织而言，人体组织的修复大部分是依靠移植来自供体的相似组织来实现。组织移#本上是以自Herrick双胞胎中一个 到另一个的肾脏移植开始的，后来，南非医生Christian Barnard在 1967年12月3日将DeniseDarval的心脏移植给Louis Washkansky， 这使得这一技术举世闻名，从此组织移植成为了用于延长晚期病人 寿命的广泛接受的方法。成功的胰腺移植已经实现，尽管胰腺组织的移植还可能存在很 多问题。另外，糖尿病不被视为绝症，因此大多数糖尿病患者使用 可用的药物对该疾病进行治疗，而不是去忍受移植的风险和后效应。 人体组织(包括胰腺组织)的移植可能包含很多问题，主要是由于 身体的天然免疫系统产生的组织排斥。为了克服身体免疫系统的问题，很快开发出了许多抗排斥药(比 如Imuran、环孢霉素)以抑制免疫系统并因此延长组织在排斥之前 的应用。但是，排斥问题仍然产生了对组织移植替代方法的需求。近年来，研究人员使用多能性胚胎干细胞作为胰腺再生的替代 方案进行了实验。使用胚胎干细胞所基于的理论是它们在理论上能 够用于再生身体内几乎任何组织。然而，胚胎干细胞在组织再生上 的应用也遇到了问题。在这些问题中较为严重的有，所移植的胚胎 干细胞的的可控性有限，它们有时生长成为肺瘤，并且可用于研究 的人胚胎干细胞将受到患者免疫系统的排斥(Nature, June 17, 2002: Pearson, Stem Cell Hopes Double, news@imture.com, published online: 21 June 2002 )。另外，胚胎干细胞的广泛应用还负担了伦理、 道德和政治因素，使得其广泛应用仍然存在疑问。干细胞的多能性特点首先在骨髓中得到的成体干细胞中发现。Verfaille, C.M. et al Pluripotency of mesenchymal stem cells derived from adult marrow. 7Vaft#i*e 417， published online 20 June; doi: 10.1038/nature00卯0， (2002) cited by Pearson, H. Stem cell hopes double, ncws@imturc.com, published online: 21 June 2002j doi: 10.1038/news020617画11。Boyse et al.，美国专利No. 6,569,427 Bl公开了低温^M^以及低 温保存的胎儿和新生儿血液可用于治疗或预防多种疾病与病症如贫 血、恶性肿瘤、自身免疫病和多种免疫功能障碍及缺陷。Boyse还7〉 开了使用异源基因序列的造血重建在基因治疗中的应用。但是， Boyse的公开缺乏用于治疗应用的细胞扩增。脐带血库CorCell提供 了对脐带血干细胞扩增、低温保存和移植的统计。Expansion of Umbilical Cord Blood Stem Cells, Information Sheet Umbilical Cord Blood， CorCell， Inc. (2003). —种扩增方法乂^开了4吏用一种生 物反应器，所述生物反应器具有位于中央的基于胶原蛋白的基质。 Research Center Julich: Blood Stem Cells from the Bioreactor. Press release May 17, 2001。研究继续致力于阐明干细胞扩增中涉及的分子机制。例如， CorCell的文章公开了 ，名为A-l的信号分子辅助脐带血干细胞的发 育。Ohishi K. et al Delta-1 enhances marrow and thymus repopulating ability of human CD34+/CD38- cord blood cells. Clin. Invest. 110:1165-1174 (2002)。因此，需要提供不基于器官移植或应用胚胎干细胞的修复胰腺 组织的方法。胰岛细胞的再生将提供治疗糖尿病如I型糖尿病、II 型糖尿病、胰島素受体紊乱诱发的糖尿病、胰腺性糖尿病以及其它 糖尿病形式的有效方法。专利技术概述本专利技术涉及修复胰腺组织和/或补充胰腺细胞(优选胰岛细胞) 以治疗糖尿病的方法，其具体通过使用来源于经TVEMF扩增的血 的成体干细胞和身体的自我修复能力来实现。用于治疗患糖尿病的 哺乳动物(优选人)的本专利技术方法包括将治疗有效量的来源于血的扩增成体干细胞引入所述哺乳动物，所述成体干细胞在每单位体积 中的细胞数至少比其来源的血液中的每单位体积中细胞数扩增七倍，其中所述经TVEMF扩增的干细胞保持其三维几何结构 (three-dimensional geometry)及其细胞-细胞支持(cdl-to-cell support)以及细胞-细胞三维结构(cell-to-cell geometry )。所述方法 包括在足以允许人体系统利用所i^jfit细胞有效修复受损胰腺的时间 中进行这样的引入。本专利技术还部分涉及来自哺乳动物(优选人)的血液干细胞组合 物，优选地，其中所述干细胞经过TVEMF扩增。本专利技术还涉及来 自哺乳动物(优选人)的血液干细胞，其中所述干细胞单位体积中 的数目至少是它们来源材料(例如，TVEMF扩增之前干细胞的血 来源)的7倍；并且其中所述血液干细胞的三维几何结构和细胞-细 胞支持以及细胞-细胞几何结构与天然(即来源的)血中的干细胞基 本相同。这些细胞优选通过本文所述的TVEMF扩增方法制得。本 专利技术也涉及包含这些细胞的用于治疗糖尿病的组合物，其按照需要 添加其它成分，包括可药用载体、低温保存剂和细胞培养基。本专利技术还涉及通过以下步骤制备用于治疗糖尿病的干细胞和干 细胞组合物的方法将血混合物置于TVEMF生物反应器的培养室 中，对血混合物施加TVEMF,以及在TVEMF生物应_应器中TVEMF 扩增血液干细胞以制备经TVEMF扩增的血液干细胞和干细胞组合 物。优选地，施加在细胞上的TVEMF从约0.05高斯到约6.0高斯。 本专利技术还涉及通过以下步骤低温保存所述经扩增干细胞的方法将 其温度降低至-120 °C到-196 °C并持续 一年或更长，之后将温度升高到 适于将所述细胞引入哺乳动物的温度。本文还包括本专利技术组合物用于治疗糖尿病或制备用于治疗糖尿 病的药物中的用途，或者用于修复或再生胰腺(优选胰岛细胞)的 用途，或者用于补充这些胰岛细胞的用途，所述糖尿病包括I型糖 尿病、II型糖尿病、胰岛素受体紊乱诱发的糖尿病、胰腺性糖尿病 以及其它糖尿病形式。附图简述附图中，图1以示意图方式举例说明了生物反应器的培养载体流程(flow loop)的一个优选实施方案；图2是本专利技术的TVEMF生物反应器的一个优选实施方案的侧视图； 图3是图2的TVEMF生本文档来自技高网...

【技术保护点】
治疗糖尿病的方法，其包括对哺乳动物施用治疗有效量的血液干细胞药物组合物的步骤，所述组合物包含扩增的血液干细胞，其在每单位体积中的数目是天然血中血液干细胞数目的至少７倍，并且其中所述血液干细胞具有与天然血中的干细胞基本相同的三维几何结构和细胞－细胞支持以及细胞－细胞几何结构。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】US 2005-2-28 60/657,5531.治疗糖尿病的方法，其包括对哺乳动物施用治疗有效量的血液干细胞药物组合物的步骤，所述组合物包含扩增的血液干细胞，其在每单位体积中的数目是天然血中血液干细胞数目的至少7倍，并且其中所述血液干细胞具有与天然血中的干细胞基本相同的三维几何结构和细胞-细胞支持以及细胞-细胞几何结构。2. 治疗糖尿病的方法，其包括对哺乳动物施用治疗有效量的血液干 细胞药物组合物的步骤，所述组合物包含TVEMF扩增的血液干细胞， 其在每单位体积中的数目是天然血中血液干细胞数目的至少2倍，并 且其中所述血液干细胞具有与天然血中的干细胞基^目同的三维几何 结构和细胞-细胞支持以及细胞-细胞几何结构。3. 根据权利要求2的方法，其中每单位体积中TVEMF扩增的血液 干细胞数量是至少7倍。4. 根据权利要求3的方法，其中所i^t尿病选自I型糖尿病、II型 糖尿病、胰岛素受体紊乱诱发的糖尿病和胰腺性糖尿病。5. 根据权利要求3的方法，其中所述施用步骤包括将所述细胞引入 哺乳动物外周血流、脱泉、胰腺邻近组织或者胃十二指肠动脉中至少 一处。6. 根据权利要求3的方法，其中所述血液干细胞药物组合物还包含 人GM-CSF和人G-CSF中至少一种。7. 根据权利要求3的方法，其中所述哺乳动物是人。8. 根据权利要求3的方法，其在施用步骤之前，另外包括以下步骤a. 将血混合物置于TVEMF生物反应器的培养腔室中；b. 在TVEMF生物反应器中，4吏血液混合物受到TVEMF并对 血液干细胞进行TVEMF扩增，直至每单位体积中TVEMF扩 增血液干细胞的数目是置于TVEMF生物反应器中的每单位体 积内血液干细胞数目的7倍以上；和c. 将TVEMF扩增细胞与可药用载体混合以形成血液干细胞药 物组合物。9. 根据权利要求8的方法，其中所述TVEMF为约0.05到约6.0高斯。10. 才艮据权利要求8的方法，其在将血混合物置于TVEMF生物反应 器中之前还包括收集血的步骤，其中所a收集自自体来源。11. 根据权利要求8的方法，其在将血混合物置于TVEMF生物反应 器中之前还包括收集血的步骤，其中所...

【专利技术属性】
技术研发人员：唐尼拉德，大卫A沃尔夫，
申请(专利权)人：雷格内泰克公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]