人体冷冻保护复活液制造技术

本发明专利技术涉及一种人体冷冻保护复活液，它是由含有下述原料的有效组份，重量百分比为：二甲基亚枫１９％～２３％、乙酰胺１５％～２０％、丙三醇１５％～１９％、丙二醇１０％～１４％、乙酸８％～１０％、乙酸正丙酯６％～９％、氨基酸４％～６％。本发明专利技术能大幅减少细胞在冷冻和复温过程中的损坏。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于一种人体冷冻保护复活液。技术背景对细胞来说，到目前为止己取得成功实例的低温保存方法大致可分为两类， 一是冻结化的方法，另一则是玻璃化方法。成功的低温保存绝大多数都是应用冻结化的方法，而玻璃化的方法是从20世纪80年代开始的， 目前己经取得重要进展。在生物细胞中，水占很大的份额，同时绝大多数细胞 只有在水溶液中才能生存。因此，当温度降低到水溶液的冰点以下时，就会出 现晶状的冰。在常温下，细胞及其溶液处于渗透平衡的状态。当温度降到冰点 以下时，首先是细胞外溶液部分冻结出冰；细胞外溶液的浓度升高，破坏 了细胞外溶液的平衡，水分由细胞内通过细胞膜向外渗透，细胞收縮，细胞内 浓度提高，使细胞脱水，蛋白质变性即产生溶液效应。另一方面来不及渗出的 水份在细胞内形成大的冰晶而导致细胞死亡，复温时，随着温度的升高，冻结 的冰不断融化，水分由细胞外向细胞内渗透，使收缩的细胞膨胀。为使细胞在 降温、复温、渗透过程中不被损伤而死亡，要求在降温和复温的程序加入抗冻 剂，能使细胞在冷冻和解冻后能动性得到改善，但目前使用的冷冻剂仍可造成 细胞的60%的损坏。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种人体冷冻保护复活液，能大幅减少细胞在冷冻和 复温过程中的损坏。本专利技术含有下述原料的有效组份，重量百分比为二甲基亚枫19% 23%、乙 酰胺15% 20%、丙三醇15% 19%、丙二醇10% 14%、乙酸8% 10%、乙酸正丙脂 6% 9%、氨基酸4% 6%。本专利技术最佳方案含有二甲基精亚枫22%、乙酰胺18%、丙三醇17%、丙二醇12%、乙酸9%、乙酸正丙脂8%、氨基酸5%。本专利技术的优点是能大幅减少细胞在冷冻和复温过程中的损坏。试验表明采 用传统的冷冻剂用细管法冷冻人体精液在5'C和37C时，解冻的能动性为45。/。65%，72%的冷冻人体精子为不可逆的细胞损坏。而采用 本专利技术的冷冻剂用细管法冷冻人体精液在5C和37C时，解冻的能动性为75。/。85%，正常精子仅减少15% 20%，仅有约20%左右的冷冻人体精子为不可逆的细胞损坏。采用传统的冷冻剂冷冻人体卵巢组织进行-196T:液氮中深度低温冷冻后行 组识学和电镜检查，能恢复形成正常的原始卵泡比例不足80%，而采用本专利技术的 冷冻剂冷冻人体卵巢组织进行-196t:液氮中深度低温冷冻后行组识学和电镜检 查，能恢复形成正常的原始卵泡比例达95%。本专利技术还具有原料易得，配制成本低， 能大幅减少细胞在冷冻和复温过程中损坏的优点。 具体实施方案配方一二甲基亚枫22%、乙酰胺18%、丙三醇17%、丙二醇12%、乙酸9%、乙 酸正丙脂8%、氨基酸5%，余量为PBS液和常规溶剂，将粉氨基酸溶于PBS液中，再加 入二甲基亚枫混均，再加入其它余料，混均，用一个当量的盐酸或氢氧化钠调PH 值到8. 0，得混合液，加入灭菌蒸馏水，得本专利技术保护复活液，使混合液在保护复 活液中的浓度在l. 5 2. Omol / L，装瓶，蒸汽消毒灭菌。所述的PBS液制备方法如下氯化钠8g、氯化钾0.2g、磷酸氢二钠1.56g、磷 酸二氢钾O. 2g，倒入盛有蒸馏水的烧杯中，搅拌充分溶解，把溶液倒入容量瓶中 定容至1000ml。为传统方法，故不再累述。所述的常规溶剂为灭菌蒸馏水、乙醇、盐酸、氢氧化钠。所述的氨基酸为赖氨酸、精氨酸、组氨酸、谷氨酸、天门冬氨酸、甘氨酸、 丙氨酸、色氨酸中的一种或数种混合。配方二 二甲基亚枫19%、乙酰胺16%、丙三醇19%、丙二醇14%、乙酸8%、 乙酸正丙脂6%、谷氨酸3%、天门冬氨酸3%,余量为常规溶剂，将谷氨酸和天门冬 氨酸溶于灭菌蒸馏水中，再加入二甲基亚枫混均，再加入其它余料，混均，用一个 当量的盐酸或氢氧化钠调PH值到8. 0，得混合液，加入灭菌蒸馏水，得本专利技术保护 复活液，使混合液在保护复活液中的浓度在l. 5 2. Omol / L，装瓶，蒸汽消毒灭 菌。总之,本专利技术具有良好的效果，且还具有成本低，生产程序简单，稳定性好。可推广使用。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种人体冷冻保护复活液，其特征在于：含有下述原料的有效组份，重量百分比为：　　　　二甲基亚枫１９％～２３％、乙酰胺１５％～２０％、丙三醇１５％～１９％、丙二醇１０％～１４％、乙酸８％～１０％、乙酸正丙脂６％～９％、氨基酸４％～６％。

【技术特征摘要】
1、一种人体冷冻保护复活液，其特征在于含有下述原料的有效组份，重量百分比为二甲基亚枫19％～23％、乙酰胺15％～20％、丙三醇15％～19％、丙二醇10％～14％、乙酸8％～10％、乙酸正丙脂...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑葵飞，
申请(专利权)人：郑葵飞，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]