抑制基质-金属蛋白酶治疗肿瘤性疾病的组合物制造技术

本发明专利技术涉及一种含有儿茶素化合物，抗坏血酸，赖氨酸和脯氨酸的组合物。本发明专利技术还涉及使用含有儿茶素化合物，抗坏血酸，赖氨酸和脯氨酸的组合物治疗肿瘤性疾病的方法。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及儿茶素化合物联合其它食物成分用于抑制基质-金属蛋白酶的用途。更具体地说，本专利技术涉及一种含有儿茶素，抗坏血酸，赖氨酸和脯氨酸的组合物用于治疗肿瘤性疾病的用途。多酚化合物，也称为儿茶素，存在于绿茶中，并且被提出可提供保护对抗包括癌症在内的多种疾病(Mukhtar H.，Ahmed N.Am.J.Clin.Nutr.711698S-1702S(2000))。Sadzuka等人显示小鼠口服绿茶能增强阿霉素的肿瘤抑制作用。儿茶素的抗癌活性可能与其对参与癌细胞增殖和转移的某些因子的作用相关。已经知道儿茶素能导致人类癌细胞细胞周期的停滞(Ahmad N.，Feyes D.K.，Nieminen A.L.，Agarwal R.，Mukhtar H.J.Natl.Cancer Inst.891881-1886(1997))。绿茶中的多酚组分显示出能够保护对抗肿瘤诱发的炎症和细胞因子。绿茶中的多酚化合物占30％干重。包括黄烷醇，黄烷双醇，类黄酮和酚酸。黄烷醇是绿茶中最为丰富的多酚物质，通常被称为儿茶素。绿茶中有4种主要的儿茶素1)(-)-表儿茶酸，2)(-)-表儿茶酸-3-没食子酸盐，3)(-)-表没食子儿茶精和4)(-)-表没食子儿茶精-3-没食子酸盐(EGCG)。在这些儿茶素中，EGCG是绿茶中存在的主要多酚成分。EGCG是一种有效的抗氧化化合物(J.Cell.Biochem.265236-257(1996))，并且可能促成绿茶的抗癌活性。有报道儿茶素化合物通过阻止血管发生过程从而发挥它的抗转移活性(Cao Y.，Cao R.Nature 398381(1999))。EGCG还显示出干扰尿激酶(u-纤溶酶原激活物)的活性，尿激酶是人类癌症中最常表达的酶之一(Jankun J.，Selman S.H.，Swiercz R.，Skrzypczak J.E.Nature387-567(1997))。然而，已经确定人体内多酚的生物利用率非常低(Chen L.，Lee M.J.，Yang C.S.Drug Metab.Dispos.251045-1050(1997)；Yang C.S.，Chen L.，Lee M.J.，Balentine D A.，Kuo M.C.，Schantz S.CancerEpidemol.Biomark.Prev.7351-35(1998)；Bell J.R.，Donovan J.L.，Wong R.，Waterhouse H.，German J.B.，Walzem R.L.，Kasim K.Am.J.Clin.Nutr.71103-108(2000)；Sherry Chow H.H.，Cai Y.，Alberts D.S.，Hakim I.，Dorr R.，Shahi F.，Crowell J.A.，Yang S.C.，Hara H.CancerEpidemol.Biomark.Prev.1053-58(2001))。引用的参考文献全部引入本文作为参考。低的组织浓度大大降低了包括EGCG的多酚物质的治疗价值。一直需要寻找一种更好的含有多酚的、能有效治疗肿瘤性疾病的组合物。我们惊奇地发现，一种含有儿茶酸，抗坏血酸，脯氨酸和赖氨酸的组合物可发挥有效的对抗肿瘤性疾病的抗增殖和抗转移活性。本专利技术涉及一种生物化学物质的组合物，含有儿茶素，抗氧化剂，脯氨酸和赖氨酸，所述物质能有效治疗人类疾病。本专利技术涉及一种生物化学物质的组合物，含有儿茶素，抗氧化剂，脯氨酸和赖氨酸，所述物质能有效抑制基质-金属蛋白酶。本专利技术涉及一种治疗与胞外基质过度降解有关的肿瘤性疾病的方法，包括给予有效量的组合物，该组合物含有儿茶素化合物，抗氧化剂，脯氨酸和赖氨酸。附图说明图1显示的是EGCG对乳腺癌细胞(MDA-MB 231)细胞增殖的抑制作用。图2显示的是EGCG，抗坏血酸，脯氨酸和赖氨酸的组合对乳腺癌细胞(MDA-MB 231)细胞增殖的协同抑制作用。图3显示的是EGCG，抗坏血酸，脯氨酸和赖氨酸的组合对结肠癌细胞(HCT116)细胞增殖的协同抑制作用。图4显示的是EGCG(20μg/ml)抑制乳腺癌细胞对基质凝胶(Matrigel)侵入作用约25％。抗坏血酸，脯氨酸和赖氨酸的组合物抑制约65％。抗坏血酸，脯氨酸和赖氨酸与EGCG(20μg/ml)的组合完全抑制(约100％)基质凝胶侵入作用。图5显示的是抗坏血酸，脯氨酸和赖氨酸与EGCG(20μg/ml)的组合协同抑制黑素瘤细胞(A2058)对基质凝胶侵入作用至100％。图6以酶谱表明EGCG降低乳腺癌细胞分泌的MMP2的活性。图7显示的是在基质凝胶侵入试验后，黑素瘤细胞正常的形态。图8显示的是抗坏血酸，脯氨酸和赖氨酸的组合诱发的黑素瘤细胞形态的变化。图9显示的是抗坏血酸，脯氨酸和赖氨酸与EGCG的组合的凋亡作用。在另一个实施方案中，本专利技术涉及一种含有存在于绿茶提取物、红酒中的儿茶素与其它食物成分相组合的组合物，该组合物对于肿瘤性疾病和多种其它疾病有协同对抗作用。本申请所涵盖的食物成分包括但不限于本申请所详细描述的那些食物成分。儿茶素化合物可与其它抗氧化剂例如维生素E，谷胱甘肽，与其它类黄酮，与促进剂象叶酸以及与硒等金属联合使用，已知这些物质可适当地修饰基质-金属蛋白酶的活性，将使我们可降低EGCG能发挥其抗肿瘤活性的有效浓度。在另一个实施方案中，本专利技术涉及一种含有儿茶素的组合物，它能有效减少正常体细胞向癌细胞的转化。在另一个实施方案中，本专利技术涉及一种含有儿茶素的组合物，它能有效阻止癌细胞的细胞增殖并减少消化胞外基质(ECM)的多种基质-金属蛋白酶的合成、分泌和/或活性。在另一个实施方案中，本专利技术涉及一种预防和治疗肿瘤性疾病的方法，通过口服给予或局部给予这种含有儿茶素，抗坏血酸，脯氨酸和赖氨酸的组合物。参照下面的实施例进一步详细描述本专利技术，但不意味着对本专利技术的限制。一般实验条件(a)细胞系实验中使用下述从ATCC获得的癌细胞系(i) 人乳腺癌细胞MDA-MB 231(ii) 人结肠癌细胞HCT 116(iii)人黑素瘤细胞A 2058(b)细胞增殖研究为了研究儿茶素和食物组合物对人癌细胞的细胞增殖的影响，根据ATCC(细胞系的提供者)指定的培养条件，在24孔培养板中培养各种人癌细胞系。细胞通常培养3-4天(在达到聚结之前)。用活体染料(MTT)对细胞染色，随后测定染色溶液的OD值，从而确定培养孔中的细胞总数。MTT只能染色死亡的细胞，并且染料摄取量与培养液中死亡细胞的数目相关。通过比较处理组和对照组的OD值计算抑制百分率。(c)基质凝胶侵入研究用基质凝胶(Becton Dickinson)插入物在相容的24孔板中进行基质凝胶侵入研究。该实验能够可靠地评价癌症转移。用含～10％血清的培养基，在24孔板中接种和培养人成纤维细胞。当成纤维细胞聚结时，倾出含有血清的培养基并用不含血清的新鲜培养基替换。向不含血清的培养基中加入儿茶素化合物和食物组合物的组合，在基质凝胶插入物的上表面接种人癌细胞。18小时后，倾除培养基。保留一些培养基用于酶谱研究。用棉签轻轻擦去插入物上表面的细胞，对已穿透了基质凝胶膜并迁移到基质凝胶下表面中的细胞用Quick Stain进行染色并在显微本文档来自技高网...

【技术保护点】
生化物质的组合物，包含儿茶素化合物，抗氧化剂，脯氨酸和赖氨酸，其有效抑制基质－金属蛋白酶。

【技术特征摘要】
US 2002-1-8 10/041,4271.生化物质的组合物，包含儿茶素化合物，抗氧化剂，脯氨酸和赖氨酸，其有效抑制基质-金属蛋白酶。2.权利要求1所述的组合物，其中儿茶素化合物选自表儿茶酸，表没食子儿茶精，表儿茶酸没食子酸盐和表没食子儿茶精没食子酸盐。3.权利要求1所述的组合物，其中儿茶素化合物是表没食子儿茶精没食子酸盐。4.权利要求1所述的组合物，其中抗氧化剂选自抗坏血酸，维生素E，生育三烯酚类，类胡萝卜素，谷胱甘肽，α-硫辛酸，泛醌醇，生物类黄酮和肉碱。5.权利要求1所述的组合物，其中抗氧化剂是抗坏血酸。6.权利要求5所述的组合物，其中抗坏血酸选自抗坏血酸前体，抗坏血酸代谢物和抗坏血酸盐。7.权利要求1所述的组合物，其中抗氧化剂还包括叶酸。8.权利要求7所述的组合物，其中叶酸是叶酸盐。9.权利要求1所述的组合物，其中该组合物还包含硒。10.权利要求9所述的组合物，其中硒选自selinite和甲基selinate。11.权利要求1所述的组合物，其中基质-金属蛋白酶选自基质-金属蛋白酶1，基质-金属蛋白酶2，基质-金属蛋白酶3，基质-金属蛋白酶4，基质-金属蛋白酶5，基质-金属蛋白酶6，基质-金属蛋白酶7，基质-金属蛋白酶8，基质-金属蛋白酶9，基质-金属蛋白酶10，基质-金属蛋白酶11，基质-金属蛋白酶12和基质-金属蛋白酶14。12.权利要求1所述的组合物，其中基质-金属蛋白酶是基质-金属蛋白酶2。13.权利要求1所述的组合物，其中基质-金属蛋白酶是基质-金属蛋白酶9。14.一种治疗与基质-金属蛋白酶活性升高有关的人类疾病的方法，通过给予有需要的患者一种生化物质的组合物，所述组合物含有儿茶素化合物，抗氧化剂，脯氨酸和赖氨酸，所述物质有效抑制基质-金属蛋白酶。15.权利要求14所述的方法，其中儿茶素化合物选自表儿茶酸，表没食子儿茶精，表儿茶酸没食子酸盐和表没食子儿茶精没食子酸盐。16.权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：马蒂亚斯拉特，施里郎内克，瓦迪姆伊万诺夫，沃希德鲁姆，亚历山德拉尼德兹维克，
申请(专利权)人：马蒂亚斯拉特，
类型：发明
国别省市：NL[荷兰]