新城疫粘膜DNA疫苗及其构建方法技术

新城疫新型粘膜疫苗及其构建方法，涉及一种新城疫疫苗以及构建的方法，先通过反转录－聚合酶链式ＲＴ－ＰＣＲ反应，扩增出新城疫病毒融合蛋白Ｆ基因；再将Ｆ基因与质粒ｐＶＡＸ１进行连接反应，构建ＤＮＡ疫苗ｐＶＡＸ１－Ｆ；最后将质粒ｐＶＡＸ１－Ｆ转化进减毒鼠伤寒沙门氏菌ＳＬ７２０７中，最终获得ＤＮＡ长度为４６４７ｂｐ的新城疫病毒ＤＮＡ疫苗。本发明专利技术采用以减毒鼠伤寒沙门氏菌运送新城疫病毒ＤＮＡ疫苗，构建新城疫新型粘膜疫苗ＳＬ７２０７（ｐＶＡＸ１－Ｆ）。通过口服方式（饮水或拌料）对家禽（鸡、鹅、鸽等）直接进行免疫，较传统的新城疫弱毒疫苗安全，且较传统的新城疫油乳剂灭活疫苗使用方便，可克服母源抗体干扰以及油乳剂灭活疫苗不能产生粘膜免疫应答的缺陷，并能提供对新城疫病毒强毒攻击的保护。（*该技术在2024年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种新城疫疫苗以及构建的方法。现有技术新城疫是危害养禽业的主要传染病之一，被国际兽疫局(OIE)列为A类烈性传染病。目前，我国对于新城疫的防制主要采用各种不同毒力的弱毒疫苗和油乳剂灭活疫苗等传统疫苗进行免疫预防。但是有些弱毒疫苗保留了部分毒性，对雏鸡仍有一定的致死率，而且弱毒苗还能引起鸡呼吸道的温和病变，增强了对其它病原的易感性。灭活疫苗虽然能产生高水平的循环抗体，但是不能刺激机体产生细胞免疫和粘膜免疫，且需要注射免疫，费时费力。另外，常规疫苗生产成本较高，免疫接种还会受到母源抗体的干扰。因此，寻求一种廉价、更为安全有效且使用方便的疫苗，对于新城疫的综合防制具有重要的现实意义。
技术实现思路
本专利技术目的在于专利技术一种可经粘膜途径接种的新城疫新型粘膜疫苗。新城疫病毒DNA疫苗的DNA长度为4647bp，其DNA排序为gactcttcgc gatgtacggg ccagatatac gcgttgacat tgattattga ctagttatta 60atagtaatca attacggggt cattagttca tagcccatat atggagttcc gcgtta本文档来自技高网...

【技术保护点】
新城疫新型粘膜疫苗，其特征在于其ＤＮＡ疫苗的ＤＮＡ长度为４６４７ｂｐ，其ＤＮＡ排序为：ｇａｃｔｃｔｔｃｇｃｇａｔｇｔａｃｇｇｇｃｃａｇａｔａｔａｃｇｃｇｔｔｇａｃａｔｔｇａｔｔａｔｔｇａｃｔａｇｔｔａｔｔａ６ ０ａｔａｇｔａａｔｃａａｔｔａｃｇｇｇｇｔｃａｔｔａｇｔｔｃａｔａｇｃｃｃａｔａｔａｔｇｇａｇｔｔｃｃｇｃｇｔｔａｃａｔａ１２０ａｃｔｔａｃｇｇｔａａａｔｇｇｃｃｃｇｃｃｔｇｇｃｔｇａｃｃ ｇｃｃｃａａｃｇａｃｃｃｃｃｇｃｃｃ...

【技术特征摘要】
1.新城疫新型粘膜疫苗，其特征在于其DNA疫苗的DNA长度为4647bp，其DNA排序为gactcttcgc gatgtacggg ccagatatac gcgttgacat tgattattga ctagttatta 60atagtaatca attacggggt cattagttca tagcccatat atggagttcc gcgttacata 120acttacggta aatggcccgc ctggctgacc gcccaacgac ccccgcccat tgacgtcaat 180aatgacgtat gttcccatag taacgccaat agggactttc cattgacgtc aatgggtgga 240ctatttacgg taaactgccc acttggcagt acatcaagtg tatcatatgc caagtacgcc 300ccctattgac gtcaatgacg gtaaatggcc cgcctggcat tatgcccagt acatgacctt 360atgggacttt cctacttggc agtacatcta cgtattagtc atcgctatta ccatggtgat 420gcggttttgg cagtacatca atgggcgtgg atagcggttt gactcacggg gatttccaag 480tctccacccc attgacgtca atgggagttt gttttggcac caaaatcaac gggactttcc 540aaaatgtcgt aacaactccg ccccattgac gcaaatgggc ggtaggcgtg tacggtggga 600ggtctatata agcagagctc tctggctaac tagagaaccc actgcttact ggcttatcga 660aattaatacg actcactata gggagaccca agctggctag cgtttaaact taagcttcaa 720tatgggctcc agaccttcta ccaggatccc agcacctctg atgctgatca cccggattat 780gctgatgttg ggctgtatcc gtccgacaag ctctcttgac ggcaggcctc ttgcagctgc 840aggaattgta gtaacaggag ataaggcagt caatgtatac acctcgtctc agacagggtc 900aatcatagtc aagttgctcc cgaatatgcc cagggataag gaagcgtgtg cgaaagcccc 960attagaggca tataacagaa cactgactac tttgctcact cctcttggcg actccatccg 1020caagatccaa gggtctgtgt ccacgtctgg aggaaggaga caaaaacgct ttataggtgc 1080tattattggc agtgtagctc ttggggttgc aacagcggca cagataacag cagctgcggc 1140cctaatacaa gccaaccaga atgctgccaa catcctccgg cttaaggaga gcattgctgc 1200aaccaatgaa gctgtgcatg aagtcaccga cggattatca caactatcag tggcagttgg 1260gaagatgcag cagtttgtca atgaccagtt taataataca gcgcgagaat tggactgtat 1320aaaaatcaca caacaggttg gtgtagaact caacctatac ctaactgaat tgactacagt 1380attcgggcca cagatcacct cccctgcatt gactcagctg accatccagg cactttataa 1440tttagctggt ggcaatatgg attacttatt aactaagtta ggtataggga acaatcaact 1500cagctcatta attggtagcg gcctgatcac tggttaccct attctgtacg actcacagac 1560tcaactcttg ggcatacaag tgaatttgcc ctcagtcggg aacttaaata atatgcgtgc 1620cacctatttg gagaccttat ctgtaagtac aaccaaagga tatgcctcag cacttgtccc 1680gaaagtagtg acacaagtcg gttctgtgat agaagagctt gacacctcat actgtataga 1740gtccgatctg gatttatatt gtactagaat agtgacattc cccatgtccc caggtattta 1800ttcctgtttg agcggcaaca catcagcttg catgtattca aagactgaag gcgcactcac 1860cacgccgtat atggccctta aaggctcagt tattgccaat tgtaagataa caacatgtag 1920atgtacagac cctcctggta tcatatcgca aaattatgga gaagctgtat ccctgataga 1980tagacattcg tgcaatgtct tatcattaga tgggataact ctgaggctca gtggggaatt 2040tgatgcaact tatcaaaaga acatctcaat actagattct caagtcatcg tgacaggcaa 2100tcttgatata tcaactgaac ttggaaacgt caacaattca atcagcaatg ccttggataa 2160gttggcggaa agcaacagca agctagaaaa agtcaatgtc agactaacca gcacatctgc 2220tctcattacc tatattgttc taactgtcat ttctctagtt ttcggtgcac ttagtctggg 2280tttagcgtgt tacctgatga tcaaacagaa ggcacaacaa aagaccttgc tatggcttgg 2340gaataatacc ctcgatcaga tgagagccac tacaagagca tgaatgcaga taagaggtgg 2400gaattctgca gatatccagc acagtggcgg ccgctcgagt ctagagggcc cgtttaaacc 2460cgctgatcag cctcgactgt gccttctagt tgccagccat ctgttgtttg cccctccccc 2520gtgccttcct tgaccctgga aggtgccact cccactgtcc tttcctaata aaatgaggaa 2580attgcatcgc attgtctgag taggtgtcat tctattctgg ggggtggggt ggggcaggac 2640agcaaggggg aggattggga agacaatagc aggcatgctg gggatgcggt gggctctatg 2700gcttctactg ggcggtttta tggacagcaa gcgaaccgga attgccagct ggggcgccct 2760ctggtaaggt tgggaagccc tgcaaagtaa actggatggc tttctcgccg ccaaggatct 2820gatggcgcag gggatcaagc tctgatcaag agacaggatg aggatcgttt cgcatgattg 2880aacaagatgg attgcacgca ggttctccgg ccgcttgggt ggagaggcta ttcggctatg 2940actgggcaca acagacaatc ggctgctctg atgccgccgt gttccggctg tcagcgcagg 3000ggcgcccggt tctttttgtc aagaccgacc tgtccggtgc cctgaatgaa ctgcaagacg 3060aggcagcgcg gctatcgtgg ctggccacga cgggcgttcc ttgcgcagct gtgctcgacg 3120ttgtcactga agcgggaagg gactggctgc tattgggcga agtgccgggg caggatctcc 3160tgtcatctca ccttgctcct gccgagaaag tatccatcat ggctgatgca atgcggcggc 3240tgcatacgct tgatccg...

【专利技术属性】
技术研发人员：焦新安，潘志明，黄金林，张晓明，张小荣，殷月兰，孙林，刘秀梵，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：32[中国|江苏]