A pathogenic disease of sugarcane white leaf nested PCR detection method for sugarcane leaf tissue disease, by the method of CTAB extraction of total genomic DNA of sugarcane leaf tissue disease, application of nested PCR of genomic DNA in the first round PCR and second round of the two PCR amplification were detected by agarose gel electrophoresis of nested PCR amplification products by agarose gel 1% the first round of the PCR amplification products of DNA target fragment is about 700bp, second rounds of PCR amplification of DNA target fragment size of product is about 210bp; the two was said, the first round of PCR was amplified by primer MLOX/MLOY, primer PCR amplified by the second round of P1/P2; the method is simple and fast, simple, efficient and so on.
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及植物保护领域，尤其是一种快速、简便、高效的甘蔗白叶病病原的检测方法。
技术介绍
甘蔗白叶病由类菌原体侵染所引致，属全株性病害，也是一种重要的检疫性病害。 主要分布在中国台湾，泰国、澳大利亚和新西兰。症状主要表现为在叶片上有单条或数条白色或乳黄色或浅绿色条纹，严重时整个全叶丧失叶绿素变成白色，呈漂白状，植株矮化， 节间短缩，分蘖增多。类菌原体可通过带病种苗进行传播，在田间叶蝉(Matsumuratetlix hiroglyhious)等昆虫介体可通过取食病株韧皮部进行反复侵染传播。该病害是甘蔗产业毁灭性病害之一，可导致甘蔗的巨大减产，给甘蔗和制糖产业带来巨大损失。近年来，与大湄公河次区域(GMS)国家合作的逐渐增强，并且与这些国家开展甘蔗品种/材料交换日益频繁。由于甘蔗白叶病在GMS国家普遍发生，为了有效防控该病害随引进的甘蔗品种/材料侵入境内，对国际合作中进出口的甘蔗品种/材料进行病害检疫检测非常必要，因此建立一种快速有效的检测甘蔗白叶病的方法迫在眉睫。
技术实现思路
本专利技术提出一种甘蔗白叶病病原巢式PCR检测方法，能够快速、简便、高效地检测甘蔗白...
【技术保护点】
１． 一种甘蔗白叶病病原巢式ＰＣＲ检测方法，其特征是按下列步骤进行：取甘蔗病叶组织，通过ＣＴＡＢ法提取甘蔗病叶组织的总基因组ＤＮＡ，应用巢式ＰＣＲ技术对总基因组ＤＮＡ依次进行第一轮ＰＣＲ和第二轮ＰＣＲ两次扩增，用１．０％的琼脂糖凝胶对巢式ＰＣＲ扩增产物进行电泳检测，第一轮ＰＣＲ扩增产物的ＤＮＡ目标片段大小约为７００ｂｐ，第二轮ＰＣＲ 扩增产物的ＤＮＡ目标片段大小约为２１０ｂｐ。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：卢文洁，黄应昆，李文凤，赵培方，王晓燕，
申请(专利权)人：云南省农业科学院甘蔗研究所，
类型：发明
国别省市：53
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