一种海洋星虫多糖及其制备方法和在抗疲劳功能中的应用技术

本发明专利技术公开了一种海洋星虫多糖及其制备工艺，以及该多糖在抗疲劳功能中的应用。该多糖的单糖组成是由阿拉伯糖(7.91％)和葡萄糖(79.32％)2种单糖组成，且该多糖中多糖含量为80％以上。该多糖的制备工艺，取清洗干净的海洋星虫原料适量，依次加入碱溶液，加热提取，调pH值，离心，脱蛋白，浓缩，醇沉，冷冻干燥，得星虫多糖，该多糖具有明显抗疲劳功能。该海洋星虫多糖的提取方法简单易行，成本低，能耗少，不污染环境，且明显提高多糖含量，有效克服了动物多糖难于富集、难于提取以及糖含量低这一难题，使海洋星虫多糖能在较大程度上实现商品化，在工业上有很好的推广应用前景。

A kind of Sipunculidae polysaccharide and its preparation method and application in anti fatigue function

The invention discloses a Sipunculidae polysaccharide and its preparation process and application of the polysaccharide on anti fatigue function in. The monosaccharide composition of the polysaccharide is composed of 2 monosaccharides of Arabia sugar (7.91%) and glucose (79.32%), and the content of polysaccharide in the polysaccharide is more than 80%. The preparation process of the polysaccharide, take clean Sipunculidae ingredients, followed by adding alkali solution, heating extraction, regulating pH value, centrifugation, removal of protein, concentration, alcohol precipitation, freeze drying, sipunculid was polysaccharide, the polysaccharide has obvious anti fatigue function. The extraction method of Sipunculidae polysaccharide is simple, low cost, low energy consumption, no environmental pollution, and improve the content of polysaccharide, polysaccharide is difficult to effectively overcome the animal enrichment, it is difficult to extract and low sugar content of this problem, the Sipunculidae polysaccharide can greatly realize the commercialization, there is a good application prospect in industry.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属医药
，涉及一种海洋生物多糖及其制备方法和应用，具体涉及一种海洋星虫多糖及其制备方法和在抗疲劳功能中的应用。
技术介绍
疲劳是一种常见的心理-生理现象，疲劳的发生常常导致工作能力和工作效率的降低。尤其在军事作业中，广大官兵疲劳现象普遍存在，抗疲劳研究对于提高我军的战斗力具有重要的意义。多糖作为一类重要的活性物质具有多种功效，如何有效地对多糖进行分离并进行功能测试，已成为国内外研究的一个热点和难点。海洋星虫具有丰富的营养物质，我国多种本草中记载了其食用和药用价值。海洋星虫不仅是味道鲜美的海味珍品，亦是一种低脂肪、高蛋白和富含锌、铁、钙、磷、碘多种矿物质的高级保健食品，除作食用外，民间还把它作为治疗虚火上炎及滋阴补肾之食疗药物。 一般用于目赤、面部潮红。夏日盛暑因烈日暴晒，身体发热，便秘的患者，用之可缓解症状。 此外，在闽、台、粤、琼等沿海地区，渔民家常用海洋虫草煮稀饭喂养幼儿，具有健脾滋补等食疗作用。海洋星虫的保健功能，在我国古代医药专著中多有记载，自古以来被视为“海药”， 唐末五代时的著名本草学家李荀广游岭南，知晓南国乡土风物，熟悉南国药用动植物，所著 《海药本草》记载了大量外来药，其中就记载了“海蚕沙”，云其“生南海山石间，其蚕形，大如姆指，沙甚白，如玉粉状，每有节”。海蚕沙“味咸，大温，无毒。主虚劳冷气，褚风不遂。久服令人光泽，补虚羸，轻身，延年不老”。著名本草学家李时珍，在其所著《本草纲目》之中同样也记载有“海蚕”的药用功效。中医认为海洋星虫性味甘、咸、寒，有清肺补虚、滋阴降火功效，临床实践证实骨蒸潮热、阴虚盗汗、肺虚咳喘、胸闷痰多等疾病，食用海洋星虫有疗效。 对肺痨咳嗽、神经衰弱、小儿脾虚等疾患，若用海洋星虫与姜片煲炖亦有很好的治疗效果。 以淮杞园肉煲海洋星虫汤，不仅营养丰富，味道鲜美，而且具有滋阴养颜之效。民间效方有 ①海沙虫煎取海沙虫30g，水煎煮熟，1剂，每日水煎服2次，具有滋阴降火、清肺化痰功效， 主治肺结核病、咳嗽吐痰、潮热盗汗；②加味海沙虫汤取海沙虫10g，百部15g，生甘草5g ； 水煎，1剂，每日水煎服2次，具有滋阴润肺、止咳祛痰功效，主治阴虚型肺结核病。现代医药研究表明海洋星虫含有多种活性物质，能够调节机体多种机能，含有丰富的蛋白质、微量元素等。锌的含量达到2. 3Χ102μ g/g，牛磺酸含量是普通生物的70倍 (达3% )，蛋白质含量为55%以上，精氨酸含量高达6. 8% ；具有显著的延缓衰老、抗氧化等功效，对心血管系统具有明显的保护作用。窦宝昌等人发现海洋星虫的水解提取液具有收缩血管、加快心率、增强心博出量和冠脉血流量的作用，对失血性低血压有显著升压作用，亦有良好的镇静止痛效果。也有学者对海洋星虫的成分进行分析，发现它们含有6-7种人体必需氨基酸，尤其以LyS，LeU，Val 含量较高；微量元素中尤其含锌量很高，可达2. 3 X 102 μ g/g。我们在前期实验中，除了对海洋星虫中的牛磺酸、氨基酸、微量元素、蛋白质等进行研究之外，特别对海洋星虫中的多3糖进行了深入研究。本专利技术涉及一种海洋星虫多糖的制备方法，通过该方法所制备多糖，含量明显增高，其制备方法可靠易行，不污染环境，成本低，适用于大规模生产。经药效学实验研究，该多糖具有明显的抗疲劳功效果。
技术实现思路
为了有效克服动物多糖难于富集、难于提取以及糖含量低这一难题，本专利技术所解决的关键技术问题是根据海洋星虫所含多糖的特性，采用提取分离技术，开发一种高纯度的、适用于工业化大生产的海洋星虫多糖提取方法，并公开其在抗疲劳功能中的应用。本专利技术是这样实现的本专利技术海洋星虫多糖提取工艺，是通过碱提、脱蛋白、醇沉等步骤获取该活性组分。具体提取工艺是取清洗干净的海洋星虫原料适量，依次加入2-8倍2-10%碱溶液， 30-80°C提取2-8h，调pH值为4. 0-10. 0，离心，9000rpm，时间30min,弃去沉淀，得上清液。 采用三氯乙酸脱蛋白，至PH值为3. 0-8. 0，静止50min左右后倒入分液漏斗中，静止后分离上层水溶液，浓缩到原体积的1/4左右，用95%的乙醇与分离液充分混合，搅拌，使其浓度达到20-80 %，4°C静置过夜，离心，冷冻干燥，得海洋星虫多糖。本专利技术海洋星虫多糖提取最优工艺是取清洗干净的海洋星虫原料适量，加入6 倍6% NaoH，50°C提取4h，调pH值为7. 0，离心，9000rpm，时间30min，弃去沉淀，得上清液。 采用三氯乙酸脱蛋白，至PH值为4. 0，静止50min左右后倒入分液漏斗中，静止后分离上层水溶液，浓缩到原体积的1/4左右为止取出，用95%的乙醇与分离液充分混合，搅拌，使其浓度达到75%左右，4°C静止过夜，离心，冷冻干燥，得海洋星虫多糖。用本专利技术的方法获得的海洋星虫多糖为灰白色粉末，溶于水，不溶于乙醇、丙酮、氯仿等有机溶剂，多糖含量为80%以上。该海洋星虫多糖的单糖组成是由阿拉伯糖 (7.91% )和葡萄糖(79. 32% ) 2种单糖组成；该海洋星虫多糖中糖含量为80%以上；该海洋星虫多糖遇Molish试剂、斐林(Fehling)试剂、蒽酮-硫酸试剂、苯酚-硫酸试剂均显示特定的颜色反应；红外光谱显示特征性吸收。用本专利技术的方法获得的海洋星虫多糖经过抗疲劳实验研究，具有明显抗疲劳功能。本专利技术的优点1、本提取方法主要根据动物多糖的特点，通过对pH值、加热温度、加碱量、碱浓度、醇浓度等因素的精确选择及对加入试剂先后次序的选择，从而达到对多糖的有效富集和有效分离。在提取过程中没有使用有机溶剂和其它特殊设备，提取方法简单易行，成本低，能耗少，不污染环境，有效克服了动物多糖难于富集、难于分离这一难题，使海洋星虫多糖能在较大程度上实现商品化，在工业上有很好的推广应用前景。2、通过提取工艺比较，本提取方法所得多糖，明显提高了多糖含量，使多糖含量超过80%，有效克服掉动物多糖含量低的特点。3、通过对抗疲劳实验研究，该多糖糖含量高，且具有明显的抗疲劳功效。附图说明图1混合单糖标准品色谱图图2样品色谱图图3=Molish试剂反应鉴别图图4斐林(Fehling)试剂反应鉴别图图5蒽酮-硫酸试剂反应鉴别图图6苯酚-硫酸试剂反应鉴别图图7红外光谱鉴别图具体实施例方式实施例1海洋星虫多糖中单糖组分的测定1、样品与试剂海洋星虫多糖样品为自制。单糖标准品为鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖、肌醇、果糖，均为分析纯生化试剂，均购自上海源聚科技有限公司。三氟乙酸、醋酐、甲醇、无水硫酸钠、氯仿均为国产分析纯试剂。2、仪器与条件采用气相色谱法进行测定。检测仪器HP 6890(Plus)型气相色谱仪。检测器FID，色谱柱=HP-INNOffAX, (30m*0. 25mm*0. 25 μ m)。汽化室温度:240°C，检测器温度 260°C。用氮气作为载气，纯度99. 999%。色谱柱初温140°C，然后，以10°C/min的升温速率升至M0°C，保持lOmin。分流比20/1，进样量1 μ 1，面积归一化法定量。3、样品处理称取海洋星虫多糖15mg，用3mol/L三氟乙酸于烘箱120°C水解乩，取出浓缩至干，加甲醇并吹干，待用。4、糖肟乙酸酯衍生物的制备取海洋星虫多糖水解液的干燥本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种具有抗疲劳功能的海洋星虫多糖，其特征在于该多糖是以海洋星虫为原料，清洗干净、粉碎、匀浆，依此加入碱溶液，加热提取，然后调ｐＨ值，离心，弃去沉淀，得上清液。经脱蛋白，调ｐＨ值，静置，分离上层水溶液，浓缩，醇沉，静置过夜，离心，冷冻干燥，即得。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘玉明，沈先荣，钱甜甜，蒋定文，何颖，李珂娴，陈伟，王岩，侯登勇，王庆蓉，莫琳芳，
申请(专利权)人：中国人民解放军海军医学研究所，
类型：发明
国别省市：31