一种键合-亲合复合型多糖类手性固定相的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种键合－亲合复合型多糖类手性固定相的制备方法。该发明专利技术适用于液相色谱法对手性对映体的分离和制备，扩大了流动相使用范围并克服了键合型固定相手性拆分能力低等缺点。其特征在于主要步骤为：１）将多糖衍生物Ⅰ经化学键合到手性固定相基质上，获得键合型固定相；２）将多糖衍生物Ⅱ经亲合涂敷到键合型固定相上，获得键合－亲合复合型多糖手性固定相。

Preparation method of bonding affinity complex type polysaccharide chiral stationary phase

The invention relates to a preparation method of bonding affinity complex polysaccharide chiral stationary phase. The invention is suitable for the separation and preparation of chiral enantiomers in liquid chromatography, enlarges the application range of the mobile phase, and overcomes the defects of the low resolution of the bonded stationary phase. It is characterized in that the main steps are as follows: 1) the polysaccharide derivative I chemically bonded to the chiral stationary phase matrix, obtain bonded stationary phase; 2) the polysaccharide derivatives II by affinity coating bonded stationary phase, obtained bond - affinity compound polysaccharide chiral stationary phase.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种手性固定相的制备方法，具体说是一种键合-亲合复合型多糖类手性固 定相合成方法。
技术介绍
近20年来，手性结构化合物一直是药理学和分析化学的研究热点之一，对映异构体的 手性拆分是获得光学纯物质的有效手段，手性色谱特别是手性高效液相色谱是近年来迅速 发展起来的手性拆分方法。手性色谱的核心是手性固定相(CSPs)，因此设计开发识别能力强， 负载能力大，应用范围广的CSPs —直是手性色谱的研究前沿。在目前大量的手性固定相中， 多糖类手性固定相已被证明有着广泛的用途。用纤维素、淀粉等多糖衍生物制备的手性固 定相具有较好的拆分能力，是高效液相色谱手性拆分中使用最广泛的手性固定相之一。商品化的多糖衍生物固定相是采用物理涂敷法将多糖衍生物固定在色谱基质上的，但 物理涂敷其结合力不牢，流动相选择范围小，造成手性物质在流动相中的溶解度低等缺点， 限制了其应用。此外也有将多糖衍生物经化学键合法固定在色谱基质上，此方法虽提高了 固定相的耐溶剂性能，但因降低了多糖衍生物的有序排列，拆分能力均低于涂敷型手性固 定相(Tomoyuki Ikai，Chiyo Yamamoto, Masami Kamigaito, Yoshio Okamoto., 2007， 1157: 151-158. Bezhan Chankvetadze, Tomoyuki Ikai, Chiyo Yamamoto, Yoshio Okamoto.. Journal of Chromatography A， 2004， 1042 : 55—60. Natsuki Kasuyal, Yuko Kusakal, Naoto Habu and Atsushi Ohnishi.Cellulose 9: 263—269, 2002. X M Chen，Y Q Liu,F Qinetal. J.Chromatogr. A, 2003， 1010: 185~19)。因此，急需开发研究一种流动相选择适应性广且拆分能力高的手性固定相。
技术实现思路
本专利技术的目的是制备一种流动相选择范围广且拆分能力高的手性固定相。为了达到上 述目的，本专利技术采用先键合后涂敷法制备一种键合-亲合复合型的手性固定相。采用的技术 方案特征为首先制备多糖衍生物(I)和(11)，然后将多糖衍生物(I)化学键合到手性固定相基质上，获得键合型固定相，再将多糖衍生物(n)亲合涂敷到键合型固定相上， 获得键合-亲合复合型多糖手性固定相。该法通过第一步的化学键合可克服涂敷型固定相多 糖衍生物固载不牢固、易流失等缺点,第二步通过亲合涂敷又克服了键合型固定相多糖衍生物构型易改变等缺点；具体的反应步骤如下(i)制备多糖衍生物(i)和多糖衍生物(n)将多糖分散于经无水处理的吡啶中，加入多糖衍生化试剂，反应完毕冷却之后加入沉 淀剂使产物沉淀,经过滤、洗涤后产物于真空干燥至恒重，即得到多糖衍生物。所述的多糖为纤维素或淀粉或环糊精或壳聚糖或木聚糖或葡聚糖或羧甲基纤维素； 多糖衍生化试剂为苯基异氰酸酯或3， 5-二甲基苯基异氰酸酯或3， 5 — 二氯基苯基异氰酸或对甲基一苯基异氰酸酯或3，5-二硝基苯甲酰氯或苯甲酰氯或3， 5-二硝基苯甲酰氯或 对甲氧基苯甲酰氯；使产物沉淀所用试剂为甲醇或乙醇；多糖衍生物(I)其羟基取代度为 5%—50%; 多糖衍生物(II)其羟基取代度为30-100%。(2) 将多糖衍生物(I)分散于溶剂I中，键合到经溶剂II溶胀的手性固定相基质上， 获得键合型固定相(A)所述的溶剂I为四氢呋喃或丙酮或吡啶；手性固定相基质为聚丙烯酸或聚甲基丙烯酸或聚丙烯酸酯的水解产物或聚甲基丙烯酸酯的水解产物或聚丙烯酰胺或羧甲基纤维素或羧基化聚苯乙烯；手性固定相基质经与氯化亚砜反应酰氯化后使用；溶剂II为二氯甲 烷或四氢呋喃或吡啶或N， N—二甲基甲酰胺。(3) 将多糖衍生物(II)涂敷到键合型固定相(A)上，获得键合-亲合复合型多糖手 性固定相(B)。本专利技术的显著优点是将多糖衍生物(I)键合到手性固定相基质上，获得键合型固定 相，再通过亲和涂敷法，将多糖衍生物(II)涂敷在键合型多糖类手性固定相表面，获得 键合-亲合复合型多糖手性固定相以适用于液相色谱法对手性对映体进行分离和制备。通过 化学键合的方法将多糖类衍生物固定在手性固定相基质上，可使用四氢呋喃、二氯甲烷、 三氯甲烷等作为流动相添加剂，扩大了流动相使用范围，避免手性选择剂流失的问题。且 通过键合后的亲合涂敷法，克服了键合型固定相手性拆分能力低的缺点。具体实施方案实施例l取lg环糊精加入盛有30mL吡啶的反应器中，然后加入相当于环糊精1.5倍量的3， 5-二氯基苯基异氰酸酯，8(TC反应24小时。冷却后加入大量甲醇使产物沉淀，经过滤、洗涤 后产物于真空千燥至恒重，即得到多糖衍生物(I)其羟基取代度为50%;在其他条件不变 的条件下，改变3， 5-二氯基苯基异氰酸酯的用量为环糊精的1.87倍，即得到多糖衍生物 (II)其羟基取代度为60%。取lg聚丙烯酸于圆底烧瓶中，加入10mL吡啶，溶胀1小时，加入1. 5mL氯化亚砜， 5(TC下反应8小时，将未反应的氯化亚砜去除之后，再依次加入lg多糖衍生物(I)和10mL 丙酮，搅拌使其分散均匀，80'C反应12小时。冷却后，产物经洗涤、干燥，即取得增重 率为12%的键合型固定相(A)。取键合型固定相(A) 3g用15mL丙酮溶胀12小时，另取多糖衍生物(II) 0. 529g溶 于30mL丙酮溶液静置过夜,取此溶液10mL加入己溶胀的固定相中，真空旋转蒸发除去溶剂， 重复此操作3次，即得到键合-亲合复合型多糖手性固定相(B)。实施例2取lg淀粉加入盛有20mL吡啶的反应器中，然后加入相当于淀粉1.3倍量的3， 5-二甲 基苯基异氰酸酯，IO(TC反应24小时。冷却后加入大量乙醇使产物沉淀，经过滤、洗涤后 产物于真空干燥至恒重，即得到多糖衍生物(I)其羟基取代度为45%;在其他条件不变的 条件下，改变3, 5-二甲基苯基异氰酸酯用量为淀粉的3.0倍，即得到多糖衍生物(n)其 羟基取代度为80%。取lg羧甲基纤维素于圆底烧瓶中，加入lOmL四氢呋喃，溶胀8小时，加入4mL氯化 亚砜，50。C下反应8小时，将未反应的氯化亚砜去除之后，再依次加入lg多糖衍生物(I)和10mL四氢呋喃，搅拌使其分散均匀，5(TC反应12小时。冷却后，产物经洗涤、干燥， 即取得增重率为8%的键合型固定相(A)。取键合型固定相(A) 3g用15mL丙酮溶胀12小时，另称取多糖衍生物(II) 0. 529g 分散于30mL丙酮溶液静置过夜，取此溶液10mL加入己溶胀的固定相中，真空旋转蒸发除去 溶剂，重复此操作3次，即得到键合-亲合复合型多糖手性固定相(B)。实施例3取lg纤维素加入盛有15raL吡啶的反应器中，然后加入相当于纤维素0. 9倍量的苯基 异氰酸酯，80'C反应24小时。冷却后加入大量甲醇使产物沉淀，经过滤、洗涤后产物于真 空干燥至恒重，即得到多糖衍生物(I)其羟基取代度为39%;在其他条件不变的条件下， 改变苯基异氰酸酯用量为纤维素的5倍，即得到多糖衍生物(II)其羟基取代度为95%。取lg羧基化聚苯乙烯于圆底烧瓶本文档来自技高网...

【技术保护点】
本专利技术涉及一种键合－亲合复合型多糖类手性固定相的制备方法，此方法同时包括以下两步：（１）将多糖衍生物（Ⅰ）分散于溶剂Ⅰ中，经化学键合到经溶剂Ⅱ溶胀的手性固定相基质上，获得键合型固定相（Ａ）；（２）将多糖衍生物（Ⅱ）经亲合涂敷 到键合型固定相（Ａ）上，获得键合－亲合复合型多糖手性固定相（Ｂ）。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘晓宁，魏荣卿，张晓晓，
申请(专利权)人：南京工业大学，
类型：发明
国别省市：84[中国|南京]