细胞分化的诱导方法技术

本发明专利技术涉及细胞分化的诱导方法，该方法注射具有下列通式（Ｉ）的肽衍生物，用作分化诱导因子。所述肽衍生物用于治疗肿瘤学疾病，特别是用于使黑瘤生长稳定，增加黑瘤免疫疗法的效率，减少化疗的血液学毒性。还公开了所述肽衍生物的应用。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】本专利技术涉及使用肽衍生物作为细胞分化诱导剂诱导细胞分化的方法，特别是它们在抗肿瘤非细胞毒性疗法中的应用。 已知在大多数肿瘤细胞中分化能力的缺乏会导致无法控制的肿瘤生长。 寻找特异性与非特异性的细胞分化诱导剂因此是新颖的抗肿瘤非细胞毒性疗法之一。 “细胞分化的诱导”一般是不同物质恢复(或驱动)下列因各种原因而丧失或降低的功能的能力经过正常的细胞周期、其中生物活性重要物质的合成等。 作用机理不与一种特定细胞功能有关并且能够由若干参数导致其分化的物质或化合物可以归属于非特异性分化诱导剂。 通过给以类视黄醇或α-2-干扰素诱导肿瘤细胞分化的方法是已知的(Cancer Res.，40，2245-3350，1980)。 细胞分化诱导剂聚反式视黄酸(PTRA)被用作延长急性前髓细胞性白血病的诱导或缓解后疗法之后的缓解的成分。受视黄酸衍生物影响的细胞分化引起肿瘤细胞生长的稳定化(Abelev G.I.Differentiationand tumor phenotype in cells of leukoses and lymphomas，TheClinical Oncohematology(ed.M.A.Volkova)，Moscow，theMeditsina publishers，2001，Chapter 11，pages 116-123)。 α-干扰素制备物在治疗黑瘤中作为免疫治疗剂的应用也与肿瘤细胞分化的诱导有关，其中粘连能力得到增强，抗原属性发生改变。干扰素疗法导致肿瘤生长进展减少，以及防止转移的形成和比率(AtzpodienJ.，Kirchner H.Cancer，Cytokines and cytotoxic cellsinterleukin-2 in the immunotherapy of human neoplasms. Klin.Wochenschr，1990，v.68，pp.1-7)。 由于细胞毒性化学疗法而导致造血细胞分化损伤的制备物最近已被引入到临床实践中。这些制备物是从骨髓制备的不同细胞因子，例如血液激素类粒细胞集落刺激因子、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和其他。它们在治疗不同人肿瘤中的应用导致骨髓细胞的成熟加速，防止化疗制备物的血液学细胞毒性(Crawford j.，Ozer H.，Stoller R.etal.Phase II of clinical investigation of GM-CSF by the patientsof SCLC with the dose-intensive the chemotherapy.The New EnglandJournal of Medicine.1991，v.325，No.3，pp.164-170)。 因而，肿瘤细胞分化的诱导是化疗制备物的赘生物生长稳定化、增加免疫疗法效果和纠正血液学毒性的主导机理之一。 本专利技术人已经发现，通式(I)肽衍生物 是细胞分化的有力诱导剂，可用作癌症疾病非细胞毒性疗法的成分，特别是黑瘤和造血组织增殖，以及血液纠正剂。 式(I)化合物 在国际申请PCT/RU98/00215中被公开为具备抗氧化、抗气喘、抗低氧、抗炎、抗病毒、抗菌、脂质调节、抗转移以及其他治疗效果。环状天冬氨酰-组胺和乙酰-天冬氨酰-组胺结构的化合物公开在下列著作中Kvamme，E.；Reichelt，K.L.；Edminson，P.D.；et al.N-substitutedpeptides in brain.Fed.Eur.Biochem.Society Meet.，[Proc.]，1975，41，127-136。 本专利技术涉及诱导细胞分化的方法，包含有效量通式(I)化合物 或其药学上可接受的盐作为活性成分的给药， 其中R1是被官能团取代的C1-C3烃原子团，取代基选自氨基、C1-C5酰氨基或羧基，羧基可选地被醚化，氨基可选地被酰基取代基取代；或者同时被氨基和羧基取代的C1-C3烃原子团，氨基可选地被酰基取代基取代，羧基可选地包括在C5-C6元环状酰亚胺中，该酰亚胺包括N-末端氨基或-CONH-基团的-NH-基团；或者被5-6元不饱和杂环基团取代的C1-C3烃原子团，烃原子团可以同时包含可选被酰基取代基取代的氨基；或者 R1是饱和的杂环基团； R2是氢原子或官能团，选自可以被醚化的羧基； R3是5-6元饱和或不饱和环状或杂环基团，或者氨基或羧基，羧基可选地被醚化； n＝0-4，m＝1-4，k＝0-1。 在优选的实施方式中，本专利技术涉及细胞分化的诱导方法，包含有效量4-[N-(2-咪唑-4-基)乙基)氨甲酰基]丁酸(Dicarbamine)作为活性成分的给药。 优选用在本专利技术中的通式(I)化合物是下示通式(I)化合物 更优选用在本专利技术中的通式(I)化合物是这样的通式(I)化合物，其中R1＝NH2CH2-、HOOC-CH2-、CH3CONH-CH2-、CH3OCO-CH2-、 n＝0-4；k＝0-1 R2＝H，COOH，COOCH3； 最优选用在本专利技术中的化合物是4-[N-(2-咪唑-4-基)乙基)氨甲酰基]丁酸(Dicarbamine)。 在优选的专利技术实施方式中，将通式(I)肽衍生物在0.5-5.0mg/kg体重单一剂量下长期给药。 在另一种优选的专利技术实施方式中，将通式(I)肽衍生物与化疗联合给药。 优选的专利技术实施方式还是细胞分化的诱导方法，其中为了使恶性肿瘤生长稳定，特别是黑瘤或造血组织增殖，当化疗的能力已经耗尽时，将通式(I)肽衍生物在0.5-5.0mg/kg体重单一剂量下给药至少15天。 将通式(I)肽衍生物与免疫治疗剂干扰素联合给药导致其关于恶性肿瘤细胞的功效增强，特别是黑瘤。 另一种优选的本专利技术实施方式是细胞分化的诱导方法，其中为了增强黑瘤免疫疗法的功效，将通式(I)肽衍生物在0.5-5.0mg/kg体重剂量下给药不少于15天，并且一起给以干扰素。 优选的本专利技术实施方式还是诱导细胞分化的方法，其中为了降低血液学毒性，在化疗过程开始之前、化疗期间和化疗过程与下一细胞毒性疗法过程之间，将通式(I)肽衍生物在0.5-5.0mg/kg体重单一剂量下每日给药。 下面提供实施例，阐述优选的本专利技术实施方式。 实施例1通式(I)肽衍生物对黑瘤M-6细胞分化的活性 研究是针对体重20-22克的10-12周龄无胸腺(裸)雌性Balb/C小鼠进行的(由隶属于N.N.Blokhin of the Russian Academy ofMedical Sciences(RAMS)的Russian Cancer Research Center(RCRC)繁殖)。预先从原始临床材料获得人黑瘤株，从RAMS RCRC的肿瘤株库取得，移植给无胸腺“裸”鼠。将肿瘤用含有活性台盼蓝染剂的Versen溶液分解，皮下接种给小鼠，每只小鼠1.6百万个细胞。 每日利用金属探针将Dicarbamine对小鼠胃内给药，剂量为1.0mg/kg，开始于肿瘤接种前4天，之后达10-11天(给药过程多达1本文档来自技高网...

【技术保护点】
诱导包括人类在内的哺乳动物细胞分化的方法，该方法包含有效量下列通式肽衍生物　　　　Ｒ↓［１］－（ＣＨ↓［２］）↓［ｎ］－ＣＯＮ（Ｈ）↓［ｋ］－＊－（ＣＨ↓［２］）↓［ｍ］－Ｒ↓［３］　　（Ⅰ），　　　　或其药学上可接受的盐的给药，　　　　其中Ｒ↓［１］是被官能团取代的Ｃ↓［１］－Ｃ↓［３］烃原子团，取代基选自氨基、Ｃ↓［１］－Ｃ↓［５］酰氨基或羧基，羧基可选地被醚化，氨基可选地被酰基取代基取代；或者同时被氨基和羧基取代的Ｃ↓［１］－Ｃ↓［３］烃原子团，氨基可选地被酰基取代基取代，羧基可选地包括在Ｃ↓［５］－Ｃ↓［６］元环状酰亚胺中，该酰亚胺包括Ｎ－末端氨基或－ＣＯＮＨ－基团的－ＮＨ－基团；或者被５－６元不饱和杂环基团取代的Ｃ↓［１］－Ｃ↓［３］烃原子团，烃原子团可以同时包含可选被酰基取代基取代的氨基；或者　　　　Ｒ↓［１］是饱和的杂环基团；　　　　Ｒ↓［２］是氢原子或官能团，选自可以被醚化的羧基；　　　　Ｒ↓［３］是５－６元饱和或不饱和环状或杂环基团，或者氨基或羧基，羧基可选地被醚化；　　　　ｎ＝０－４，ｍ＝１－４，ｋ＝０－１。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】RU 2002-2-28 20021053921、诱导包括人类在内的哺乳动物细胞分化的方法，该方法包含有效量下列通式肽衍生物或其药学上可接受的盐的给药，其中R1是被官能团取代的C1-C3烃原子团，取代基选自氨基、C1-C5酰氨基或羧基，羧基可选地被醚化，氨基可选地被酰基取代基取代；或者同时被氨基和羧基取代的C1-C3烃原子团，氨基可选地被酰基取代基取代，羧基可选地包括在C5-C6元环状酰亚胺中，该酰亚胺包括N-末端氨基或-CONH-基团的-NH-基团；或者被5-6元不饱和杂环基团取代的C1-C3烃原子团，烃原子团可以同时包含可选被酰基取代基取代的氨基；或者R1是饱和的杂环基团；R2是氢原子或官能团，选自可以被醚化的羧基；R3是5-6元饱和或不饱和环状或杂环基团，或者氨基或羧基，羧基可选地被醚化；n＝0-4，m＝1-4，k＝0-1。2、根据权利要求1的方法，其中如权利要求1所要求保护的通式(I)肽衍生物是按照0.5-5.0mg/kg的剂量每日口服给药的。3、根据权利要求1和2任意一项的方法，其中如权利要求1所要求保护的通式(I)肽衍生物是与化疗过程联合给药的。4、根据权利要求1-3任意一项的方法，其中为了使恶性肿瘤的生长稳定，将如权利要求1所要求保护的通式(I)肽衍生物给药至少15天。5、根据权利要求1-4任意一项的方法，其中为了增强恶性肿瘤免疫疗法的功效，将如权利要求1所要求保护的通式(I)肽衍生物与干扰素一起给药。6、根据权利要求4和5任意一项的方法，其中该恶性肿瘤是黑瘤或造血组织增殖。7、根据权利要求1-3任意一项的方法，其中为了降低血液学毒性，将如权利要求1所要求保护的通式(I)肽衍生物在开始化疗过程之前5天给药直至其终止。8、根据权利要求1-7任意一项的方法，其中R1＝NH2CH2-、...

【专利技术属性】
技术研发人员：弗拉迪米尔叶夫根尼耶维奇涅博利辛，维拉安德列芙娜戈尔布诺娃，伊万德米特耶维奇特里斯查林，纳坦坦弗列维奇赖赫林，奥古斯特米哈伊洛维奇加林，马克鲍里索维奇贝奇科夫，伊莲娜米哈伊洛芙娜特里斯查林娜，加利娜亚历山德罗芙娜热尔图金娜，
申请(专利权)人：弗拉迪米尔叶夫根尼耶维奇涅博利辛，
类型：发明
国别省市：RU[俄罗斯]