使用细胞脱唾液酸决定簇和糖缀合物将细胞靶向组织和器官的方法和组合物技术

本发明专利技术针对的是将细胞投递至哺乳动物体内靶组织的方法，其中使用糖缀合物将细胞运输至哺乳动物体内的期望器官。依照本发明专利技术的方法尤其可应用于施用淋巴样细胞，诸如经白介素－２（ＩＬ－２）激活的天然杀伤（ＮＫ）细胞、经淋巴因子激活的杀伤（ＬＡＫ）细胞和／或肿瘤浸润淋巴细胞（ＴＩＬ）和／或细胞毒性淋巴细胞（ＣＴＬ），或干细胞，诸如由骨髓或脐带组织衍生的那些干细胞。该方法还可用于将目的基因靶向哺乳动物体内组织，其中包括向哺乳动物体内导入包含目的基团的细胞并施用糖缀合物。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】本专利技术属于临床医学和疗法的领域。本专利技术涉及使用细胞表面和/或游离糖缀合物上的唾液酸或脱唾液酸决定簇，特别是新近脱唾液酸决定簇(neoasialodeterminant)，将细胞靶向目的器官的方法和组合物。
技术介绍
Morell等人确定了当血浆铜蓝蛋白的唾液酸基团被神经氨酸酶切除后，这种血浆蛋白质将由血清中迅速消失。他们揭示了这种现象归结于肝细胞中存在的脱唾液酸糖蛋白(ASGP)受体的摄取(J.Biol.Chem.，243155，1968)。其后，有报道说ASGP受体只存在于肝细胞中(Adv.Enzymol.，4199，1974)。根据在将脱唾液酸血浆铜蓝蛋白或脱唾液酸血清类粘蛋白(用氚实验性标记)注射到活体中后只在肝细胞中选择性检测到该同位素的事实鉴定了肝细胞的这种特异摄取。Scheinberg，I.H.等人，“Hepatic removal of circulating proteins”即“循环中蛋白质的肝清除”，在Davidson，C.S.编的《Problems in LiverDiserses》即《肝病中的问题》中，第279-285页，纽约，Stratton公司，1979。另外，还披露了这种受体特异识别并吸收具有D-半乳糖或N-乙酰半乳糖胺作为末端糖基的糖蛋白(Ann.Rev.Biochem.，51531，1982)。肝细胞的细胞膜包含与以半乳糖结尾的脱唾液酸糖蛋白联合的细胞结构。这种细胞结构最初命名为肝结合蛋白(HBP)，但是现在称为脱唾液酸糖蛋白(asialoglycoprotein，ASGP)受体。此外，观察到在多种脱唾液酸糖蛋白中，脱唾液酸α(1)-酸糖蛋白即脱唾液酸血清类粘蛋白在注射后由血清消失的速度最快。因此，说明了肝细胞对脱唾液酸-α(1)-酸糖蛋白的摄取既特异又高效(J.Biol.Chem.，2454397，1970)。ASGP受体是由分子量大约40,00的单一多肽构成的，能够识别在糖链非还原性末端位置具有半乳糖残基的糖蛋白(即脱唾液酸糖蛋白)。尽管ASGP受体的生理学功能仍不确定，然而认为ASGP受体参与糖蛋白的代谢。事实上，在肝病诸如慢性肝炎、肝硬化和肝癌的况中观察到ASGP血液水平的升高。此外，在通过施用化学药品诱发肝病的实验模型中观察到ASGP受体数量的减少。考虑到这些现象，有可能通过评估ASGP的数量和质量来诊断肝病，其中使用ASGP样物质即ASGP受体导向化合物来进行测定。事实上，出于治疗和诊断目的，已经将脱唾液酸糖缀合物共价连接了其它试剂作为使将由肝摄取的化学药品(免疫遏制药物)和生物学试剂(抗体)具有靶向的手段(参阅如美国专利号5,346,696、5,679,323、和5,089,604)。过继细胞免疫疗法一般指采用生物学试剂来实现由免疫介导的反应的治疗方法。目前，大多数过继免疫疗法是自身淋巴细胞疗法(ALT)，使用患者自己的免疫细胞，经过处理以增强由免疫细胞介导的反应或识别体内特异抗原或外来物质，包括癌细胞。治疗是如下进行的获取患者的淋巴细胞，并在体外将这些细胞暴露于生物制剂和药物以激活细胞的免疫功能。一旦自体细胞得到激活，就将这些离体激活的细胞重新注入患者体内以增强免疫系统，从而治疗各种形式的癌症、传染病、自身免疫病或免疫缺陷病。过继免疫疗法可以利用例如经白介素-2(IL-2)激活的天然杀伤(NK)细胞、经淋巴因子激活的杀伤(LAK)细胞和/或肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)和/或细胞毒性淋巴细胞(CTL)。LAK疗法涉及在高浓度IL-2下培养自体外周血淋巴细胞，从而在体外生成LAK细胞。然后在可能还涉及注入IL-2的治疗中将LAK细胞重新注入癌症患者体内。Rosenberg等人，“Cancer immunotherapy using interleukin-2and interleukin-2 activated lymphocytes”即“使用白介素-2和经白介素-2激活的淋巴细胞的癌症免疫疗法”，Annual Review ofImmunology，4681-709，1986。TIL疗法涉及由单核细胞生成LAK细胞，这些单核细胞最初衍生自由手术切除样本获得的、实体瘤中及其周围存在的炎性浸润细胞。Rosenberg等人，“A new approach to theadoptive immunotherapy of cancer with tumor-infiltratinglymphocytes”即“使用肿瘤浸润淋巴细胞、针对癌症的过继免疫疗法的新方法”，Science，2331318-1321，1986。最近几年已经开发了过继免疫疗法的许多进一步变化形式。参阅如2002年6月18日授予Wood的美国专利号6,406,699，其中公开并要求保护癌抗原免疫疗法的组合物和方法及其参考文献中公开和引用的方法。除了癌症免疫疗法，过继免疫疗法可应用于与几种疾病和状况有关的T细胞缺乏或机能失调，包括病毒的循环感染，诸如疱疹病毒(HSV、VZV、CMV)、乙肝病毒、和乳头瘤病毒。参阅如Spiegel，R.J.，“The alpha interferonsClinical overview”即“α-干扰素临床综述”，Seminars in Oncology，141，1987。还在HIV感染患者的治疗中评估ALT。O.Martinez-Maza，“HIV-Induced ImmuneDysfunction and AIDS-Associated Neoplasms”即“由HIV诱发的免疫机能失调和与AIDS有关的肿瘤”，在《Biological Approaches toCancer TreatmentBiomodulation》即《癌症治疗的生物学方法生物调控》中，M.Mitchell编，McGraw-Hill公司，第9章，第181-204页，1993。干细胞是具有更新自身并产生分化细胞类型的独特能力的特殊细胞种类。尽管身体的大多数细胞，诸如心脏细胞或皮肤细胞，已被定型成执行特定功能，然而干细胞未被定型，并保持未被定型直至它接收信号而发育成分化细胞。在1998年，首次分离并培养了来自人类早期胚胎的干细胞。认识到这些干细胞确实能够成为身体中几乎所有的分化细胞。在最近几年，成人中存在的干细胞也显示具有生成替代细胞的能力，可用于许多组织和器官，诸如心脏、肝、胰、和神经系统。由此，这类成人干细胞有希望能够修复或取代遭到许多破坏性疾病和残废损害或破坏的细胞或组织。通过将干细胞靶向身体特定器官，它对于进行这些治疗非常有用。在现有技术中，通常通过注射到组织中或注入局部循环内而将淋巴细胞和干细胞呈递给期望器官。然而，通过将正常骨髓干细胞和淋巴细胞注射到小鼠中已证明这些细胞定位于肝。Samlowski等人，Immunol.，88309-322，1984；Samlowski等人，Proc.Natl.Acad.Sci.，822508-2512，1985。还知道注入哺乳动物的大部分细胞粘附于肺内皮，与细胞类型或生理学归巢特性无关。观察到干细胞在施用后在肺中积累。Morrison等人，Nature Medicine，21281-1282，1996；Martino等人，Eur.J.Immu本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于将干细胞或淋巴样细胞投递至哺乳动物体内靶组织的方法，包括下列步骤：（ａ）对哺乳动物施用糖缀合物；并（ｂ）对哺乳动物施用所述细胞。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】US 2002-3-15 60/364,4981.用于将干细胞或淋巴样细胞投递至哺乳动物体内靶组织的方法，包括下列步骤(a)对哺乳动物施用糖缀合物；并(b)对哺乳动物施用所述细胞。2.权利要求1的方法，其中细胞是造血干细胞。3.权利要求2的方法，其中干细胞是由骨髓、胎盘、肌肉、脂肪或脐带获得的。4.权利要求1的方法，其中淋巴样细胞选自下组天然杀伤(NK)细胞、经淋巴因子激活的杀伤(LAK)细胞、肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)、细胞毒性淋巴细胞(CTL)、及其混合物。5.权利要求1的方法，其中糖缀合物由通式P-(S)x-Gal表述，其中P是人血清糖蛋白的肽残基，而S是人血清糖蛋白的糖残基；x是1-100的整数，而Gal是半乳糖残基。6.权利要求1的方法，其中糖缀合物选自下组血清类粘蛋白和脱唾液酸血清类粘蛋白。7.权利要求1的方法，其中靶组织是选自下组的器官组织心脏、肝、肺、和肾。8.权利要求1的方法，其中在细胞之前将糖缀合物施用于哺乳动物。9.权利要求1的方法，其中将糖缀合物和细胞静脉内施用于哺乳动物。10.用于将造血干细胞靶向哺乳动物的心脏的方法，包括下列步骤(a)对哺乳动物施用脱唾液酸血清类粘蛋白；并(b)对哺乳动物施用细胞。11.权利要求10的方法，其中在施用脱唾液酸血清类粘蛋白的步骤之后施用细胞。12.权利要求10的方法，其中通过接近心脏的血管施用脱唾液酸血清类粘蛋白。13.权利要求12的方法，其中通过颈静脉施用脱唾液酸血清类粘蛋白。14.权利要求10的方法，其中哺乳动物的心脏在施用脱唾液酸血清类粘蛋白之前受到缺血性损伤的困扰。15.用于将间充质干细胞靶向哺乳动物的心脏的方法，包括下列步骤(a)对哺乳动物施用血清类粘蛋白；并(b)对哺乳动物施用所述细胞。16.权利要求15的方法，其中通过接近心脏的血管施用血清类粘蛋白。17.权利要求16的方法，其中通过颈静脉施用血清类粘蛋白。18.权利要求15的方法，其中哺乳动物的心脏在施用血清类粘蛋白之前受到缺血性损伤的困扰。19.权利要求15的方法，其中在施用血清类粘蛋白的步骤之后施用所述细胞。20.用于将造血干细胞靶向哺乳动物的肝的方法，包括下列步骤(a)对哺乳动物施用血清类粘蛋白；并(b)对哺乳动物施用所述细胞。21.权利要求20的方法，其中在施用血清类粘蛋白的步骤之后施用所述细胞。22.用于将间充质干细胞靶向哺乳动物的肝的方法，包括下列步骤(a)对哺乳动物施用脱唾液酸血清类粘蛋白；并(b)对哺乳动物施用所述细胞。23.权利要求22的方法，其中在施用血清类粘蛋白的步骤之后施用所述细胞。24.用于将目的基因靶向哺乳动物体内组织的方法，其中所述目的基因包含转基因，所述方...

【专利技术属性】
技术研发人员：CA菲利普斯，
申请(专利权)人：退伍军人事务研发服务部，
类型：发明
国别省市：US[美国]