本发明专利技术公开了秦皮药材或其提取物中秦皮苷、秦皮甲素、秦皮素、秦皮乙素等4种有效成分的高效毛细管电泳(HPCE)快速定量方法。通过本发明专利技术的方法，4种秦皮香豆素在10min内得到良好分离和测定，同时各成分均具有良好的线性关系和回收率。本方法测定结果与HPLC法相比相关性良好，而分析时间则大大缩短，对环境污染显著降低，分析运行成本明显减少，为考察秦皮药材的有效成分分布和不同采收时期含量的变化规律提供了快速高效的分析手段，也可供秦皮提取物内在质量考察及新药开发研究参考。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种中药中活性成分的检测方法，具体来说，涉及秦皮药材或其提取 物中秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮苷和秦皮素的HPCE检测方法。
技术介绍
秦皮因地变异，品种来源有所不同，但均属于木犀科(Oleaceae)涔属(Fraxinus) 植物，其形态特征和气味与本草所载类似。《中华人民共和国药典》2010年版一部规定秦 1 ^ IsJMiiiItl^Iffi S^hW Fraxinusrhynchophylla Hance> S^hW Fraxinus chinensis Roxb.、尖叶白赌树 Fraxinus szabaona Lingelsh.或宿柱白赌树 Fraxinus stylosa Lingelsh.的干燥枝皮或干皮。其中苦枥白蜡树分布于吉林、辽宁、河北、河南等地。白蜡 树分布于华北、西北、华东、中南、西南及辽宁。尖叶白蜡树分布于河北、陕西、山西、甘肃、湖 南。宿柱白蜡树分布于陕西。商品药材主要包括东北秦皮或辽宁秦皮(苦枥白蜡树)、四川 秦皮(白蜡树)、陕西白点秦皮(宿柱白蜡树)、河南秦皮等。秦皮具有清热解毒、清肝明目的功效，用于热痢、泄泻、赤白带下、目赤肿痛、目生 翳膜等症。现代药理研究表明，秦皮具有抗病原微生物、抗炎、利尿、抗凝和抗过敏、止咳祛 痰平喘、中枢抑制、抗肿瘤等多种作用，临床可用治菌痢、慢性气管炎、结膜炎等。秦皮主要含秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮苷、秦皮素等香豆素化合物，其主要化学成 分的理化性质与结构如下秦皮甲素(esculin)异名七叶苷(aesculin)、七叶树甙、马栗树皮苷、6、7_ 二羟香豆素_6_葡萄糖苷、 七叶灵、esculoside、bicolorin、enullachroma、crataegin、polychrome、escosyl。分子式 C15H16O9,分子量340.观，针状结晶(热水)，mp. 204°C -206 °C，难溶于冷水，溶于沸水。溶于 热乙醇、甲醇、吡啶、醋酸乙酯和醋酸。秦皮乙素(esculetin)异名七叶素(aesculetin)、七叶苷元、七叶树内酯、马栗树皮素、七叶亭、6、7_ 二 羟香豆素、cichorigeniruesculetol。分子式C9H6O4,分子量178. 14。棱状结晶(冰醋酸) 或叶状结晶(真空升华得)，mp. 2680C -270°C，溶于稀碱显蓝色荧光、尚易溶于热乙醇及冰 醋酸，几乎不溶于乙醚及沸水。秦皮苷(fraxin)异名白蜡树苷、秦皮素-8-葡萄糖苷(fraxetin-8-glucoside)、paviin、 fraxo-side。分子式C16H18Oltl,分子量370. 30。水合物为黄色针状结晶(乙醇水溶液)，无 水物mp.205°C (迅速加热)。微溶于冷水，易溶于热水及热乙醇，不溶于乙醚。秦皮素(fraxetin)异名秦皮亭、白蜡树内酯、fraXetol、7，8-二羟基-6-甲氧基香豆素(7， 8-dihydroxy-6-methoxy-coumarin)。分子式 CltlH8O5，分子量 208. 16。片状结晶(乙醇水溶权利要求1.一种使用HPCE检测秦皮药材或其提取物中秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮苷和秦皮素的 方法，其特征在于以磷酸二氢盐-硼砂为缓冲贮备液，其PH值介于7. 8-9. 2之间，以乙腈为 有机改性剂，检测波长介于200-400nm之间，工作电压介于5_30kV之间。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于内标物为黄豆苷元。3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于所述秦皮药材或其提取物的供试 品溶液是醇提物。4.根据权利要求1至3中任意一项所述的检测方法，其特征在于制备缓冲贮备液时使 用的磷酸二氢盐的浓度为80-120mmol/L，优选为lOOmmol/L ；硼砂溶液浓度为30-70mmol/ L，优选为50mmol/L;两种溶液的体积配比为2 1-1 4，优选体积配比为1. 02 1.98。5.根据权利要求4所述的检测方法，运行时缓冲贮备液水有机改性剂的体积配比 为 1. 5 1 0. 2-4 1 1。6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于缓冲贮备液的PH值为8.6。7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于检测波长为210nm。8.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于工作电压为20kV。9.根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于运行时缓冲贮备液水有机改性剂 的体积配比为3 1 0.8。10.HPCE在同时检测秦皮药材或其提取物中秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮苷和秦皮素的用途。全文摘要本专利技术公开了秦皮药材或其提取物中秦皮苷、秦皮甲素、秦皮素、秦皮乙素等4种有效成分的高效毛细管电泳(HPCE)快速定量方法。通过本专利技术的方法，4种秦皮香豆素在10min内得到良好分离和测定，同时各成分均具有良好的线性关系和回收率。本方法测定结果与HPLC法相比相关性良好，而分析时间则大大缩短，对环境污染显著降低，分析运行成本明显减少，为考察秦皮药材的有效成分分布和不同采收时期含量的变化规律提供了快速高效的分析手段，也可供秦皮提取物内在质量考察及新药开发研究参考。文档编号A61K36/63GK102091132SQ20111002572公开日2011年6月15日 申请日期2011年1月25日 优先权日2011年1月25日专利技术者张琦 申请人:西南民族大学本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种使用ＨＰＣＥ检测秦皮药材或其提取物中秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮苷和秦皮素的方法，其特征在于以磷酸二氢盐－硼砂为缓冲贮备液，其ｐＨ值介于７．８－９．２之间，以乙腈为有机改性剂，检测波长介于２００－４００ｎｍ之间，工作电压介于５－３０ｋＶ之间。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：张琦，
申请(专利权)人：西南民族大学，
类型：发明
国别省市：90
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