恩替卡韦钠及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及恩替卡韦的钠盐化合物以及其制备方法和其在医药上的应用。本发明专利技术恩替卡韦钠采用将恩替卡韦溶于氢氧化钠水溶液中反应后用低碳链的单元醇或酮沉淀后干燥提纯即可。恩替卡韦钠具有良好的水溶性，作为原料药有利于药剂制备和药品生物利用度的提高。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于医药
，涉及恩替卡韦的钠盐化合物以及其制备方法和其在医药上的应用。
技术介绍
恩替卡韦(Entecavir)是一种2’-戊环脱氧鸟嘌呤核苷类似物，恩替卡韦是一种手性化合物，其中[1s-(1α，3α，4β)]构象体具有极强的抗乙型肝炎病毒能力，目前国外已有其原料药及其制剂上市。恩替卡韦的分子结构式如下 分子式C12H15N5O3。由于恩替卡韦的水溶解度很小，不利于口服制剂的制备和药品生物利用度的提高。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种具有良好水溶解性的恩替卡韦的衍生物，具体来说是恩替卡韦的钠盐化合物——恩替卡韦钠，这种恩替卡韦钠相比恩替卡韦而言，应具有更好的水溶性。本专利技术的另一个目的是提供一种制备恩替卡韦钠的方法，该方法具有简便、成本低廉、质量稳定等特点。本专利技术还有一个目的是将本专利技术的恩替卡韦钠作为原料药，用来制备药剂学上的口服制剂、注射剂，以供临床上应用。本专利技术提供的恩替卡韦的钠盐化合物，具有以下分子结构式 分子式C12H14N5O3Na。应当理解，本专利技术恩替卡韦钠在制备过程中，为保持特有晶体形状，会含有一定量的水分子，因此本专利技术恩替卡韦钠还包括其结晶水合物，其分子结构式如下 分子式C12H14N5O3Na.xH2O，其中x为每分子恩替卡韦钠所含结晶水的个数，x可以是整数，也可以是小数，x的取值范围为0.5～5。一种制备恩替卡韦钠的方法，包括下列步骤(1)反应将恩替卡韦溶于氢氧化钠水溶液中，调节溶液的pH值为10～14，在搅拌下加入含五个碳以下的单元醇或酮，静置，抽滤后得到沉淀物。(2)干燥下面的两种方法，都可以对上述沉淀物进行干燥而得到其纯净物，方法一.将沉淀物用含五个碳以下的单元醇或酮洗涤后，将其溶解于水中制成水溶液，用冷冻干燥法进行冻干，得到类白色固体，即得恩替卡韦钠。方法二.将沉淀物用含五个碳以下的单元醇或酮洗涤后，于35℃～80℃减压干燥至恒重，得到类白色固体，即得恩替卡韦钠。根据本专利技术的技术方案，以上所述含五个碳以下的单元醇或酮为甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、丙酮等其中的一种，也可以是其中两种的混合物。本专利技术所提供的恩替卡韦钠相比恩替卡韦而言，具有更好的水溶解性能，是一种理想的原料药，以本专利技术恩替卡韦钠为活性成份，以及含有一种或多种药学上可接受的载体，按本领域已知方法制备，可用于制备药剂学上使用的片剂、胶囊剂、溶液剂、注射剂等，以满足临床使用上的各种需要。可用于抗乙型肝炎病毒(HBV-DNA)的治疗。本专利技术恩替卡韦钠的水溶解性能试验如下。室温下取恩替卡韦钠3.5克，置25ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即可得到无色澄明的溶液，由此可见，本专利技术恩替卡韦钠在水中的溶解度良好，其溶解度大于14％；同样方取法恩替卡韦1.0克，置25ml容量瓶中，加水稀释至刻度，充分摇晃，仍有部份恩替卡韦未溶解，由此可见，恩替卡韦钠远大于恩替卡韦在水中的溶解度。本专利技术恩替卡韦钠的体外抗乙肝病毒HBV-DNA的性能试验如下。应用能够体外复制表达HBV转染的2.2.15细胞株，从体外角度，对本专利技术恩替卡韦钠的抗HBV活性进行试验。2.2.15细胞株为转染了HBV全基因组，能分泌HBV-DNA颗粒的人肝母瘤细胞系，采用检测细胞培养液上清液中分泌型HBV-DNA滴度的改变是反映HBV-DNA复制的重要指标。1.细胞培养每组2.2.15细胞用DMEM培养液培养，培养液加10％胎牛血清，0.03％谷氨酰氨，100U/ml青霉素，100u/ml链霉素，200μg/ml G418，置37℃，5.00％CO2孵箱中传代培养，每4天传代一次，取对数生长期细胞用于实验。2.检测原理及方法采用检测细胞培养液上清液中分泌型HBV-DNA滴度的改变是反映HBV-DNA复制的重要指标；采用荧光定量PCR法测定，方法参照说明书。3.实验分组及测定实验分三组，分别为恩替卡韦钠组、恩替卡韦组、空白对照组，其中恩替卡韦钠组采用含恩替卡韦钠浓度为4.0nmol/L培养液培养；恩替卡韦组采用含恩替卡韦浓度为4.0nmol/L培养液培养；空白组采用常规培养液培养。(注根据已有文献报道，恩替卡韦体外抑制转染的HepG2.2.15细胞内HBV-DNA复制的半数有效浓度EC50为3.75nmol/L)。取各组同一时间点的细胞培养上清液，测定其HBV-DNA滴度含量数(拷贝/ml)，测定数值如下表 由上表数据可看出，恩替卡韦钠组和恩替卡韦组相对于空白组，其对体外培养细胞的HBV-DNA病毒有极好的抑制作用，恩替卡韦钠和恩替卡韦两者抗HBV-DNA的活性相近，其中恩替卡韦钠略优于恩替卡韦。具体实施例方式通过下面的实施例来对本专利技术恩替卡韦钠做进一步具体说明，但并不表示实施例对本专利技术的限制。实施例一.恩替卡韦钠及其制备方法之一取恩替卡韦5克，加入氢氧化钠水溶液溶解，调节溶液的pH值为11，在搅拌下加入乙醇约65ml，继续搅拌10分钟后，静置2小时，抽滤，将过滤沉淀物用乙醇洗涤2～3次后，加水溶解，制成5％的恩替卡韦钠水溶液，采用冷冻干燥的方法对其冻干，得到类白色固体粉末，即为恩替卡韦钠，分子式C12H14N5O3Na，元素分析结果(％)C 48.20，H 4.69，N 23.47，Na 7.66，理伦值(％)C 48.14，H 4.72，N 23.41，Na7.69，元素分析值与理论值一致。核磁共振分析1H-NMRδ(ppm)(400MHZ，DMSO)1.79-2.04(2H，多重峰)，2.0(1H，单峰)，2.33(1H，多重峰)，3.24(1H，多重峰)，3.40-3.65(2H，多重峰)，4.37(1H，多重峰)，4.87(1H，双峰)，4.95(1H，双峰)，8.68(1H，双峰)。实施例二.恩替卡韦钠及其制备方法之二取恩替卡韦5克，加入氢氧化钠水溶液溶解，调节溶液的pH值为10，在搅拌下加入甲醇约60ml，继续搅拌25分钟后，静置2小时，抽滤，将过滤沉淀物用甲醇洗涤2～3次后，加水溶解，制成8％的恩替卡韦钠水溶液，采用冷冻干燥的方法对其冻干，得到类白色固体粉末，即为恩替卡韦钠，分子式C12H14N5O3Na，元素分析结果(％)C 48.22，H 4.73，N 23.35，Na 7.74，理伦值(％)C 48.14，H 4.72，N 23.41，Na7.69，元素分析值与理论值一致。核磁共振分析1H-NMR谱与实施例一相同。实施例三.恩替卡韦钠及其制备方法之三取恩替卡韦5克，加入氢氧化钠水溶液溶解，调节溶液的pH值为12，在搅拌下加入丙酮约55ml，继续搅拌10分钟后，静置2小时，抽滤，将过滤沉淀物用丙酮洗涤2～3次后，加水溶解，制成8％的恩替卡韦钠水溶液，采用冷冻干燥的方法对其冻干，得到类白色固体粉末，即为恩替卡韦钠，分子式C12H14N5O3Na，元素分析结果(％)C 48.19，H 4.70，N 23.48，Na 7.63，理伦值(％)C 48.14，H 4.72，N 23.41，Na7.69，元素分析值与理论值一致。核磁共振分析1H-NMR谱与实施例一相同。实施例四.恩替卡韦钠及其制备方法之四取恩替卡韦5克，加入氢氧化钠水溶液溶解，调节溶液的pH值为11，在搅拌下加入丙酮和乙醇混合溶液(V∶V＝1∶1)约70ml，继续搅拌10分钟后本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种恩替卡韦的钠盐化合物，其特征在于具有以下分子结构式＊＊＊。

【技术特征摘要】
1.一种恩替卡韦的钠盐化合物，其特征在于具有以下分子结构式2.根据权利要求1所述的恩替卡韦钠还包括其结晶水合物，其分子结构式如下 其中x为每分子恩替卡韦钠所含结晶水的个数，x可以是整数，也可以是小数，x的取值范围为0.5～5。3.权利要求1或2所述的恩替卡韦钠的制备方法，该方法包括下列步骤(1)反应将恩替卡韦溶于氢氧化钠水溶液中，调节溶液的pH值为10～14，在搅拌下加入含五个碳以下的单元醇或酮，静置，抽滤后得到沉淀物；(2)干燥方法一.将...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨喜鸿，
申请(专利权)人：杨喜鸿，
类型：发明
国别省市：95[中国|青岛]