本发明专利技术公开了一种重组免疫毒素CCL25-PE38基因及制备方法和应用,其步骤是:A、钓取CCL25的cDNA,通过引物全基因合成CCL25的cDNA;B、钓取PE38的cDNA,运用PCR从pRB391质粒为模板,克隆PE38的cDNA;C、构建Igκ-CCL25-PE38,获得的PCR产物为模板,合成Igκ-CCL25-linker;D、构建pcDNA3.1-CCL25-PE38真核分泌表达载体,分别用核酸内切酶HindⅢ和EcoRⅠ消化PCR扩增产物Igκ-CCL25-PE38和pcDNA3.1载体,构成真核分泌性表达质粒;制备免疫毒素,pcDNA3.1-CCL25-PE38质粒转染293T细胞,采用无血清培养基OPTI-MEM进行培养,纯化,测定蛋白浓度,结果显示:重组免疫毒素CCL25-PE38,重组免疫毒素的质粒在制备治疗或预防急性T淋巴细胞白血病药物中的应用。制备简单,容易纯化。重组免疫毒素CCL25-PE38具有特异性杀伤肿瘤细胞,抑制肿瘤生长效果明显,毒副作用小,有很好的应用前景。
【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
1.一种分离的重组免疫毒素的质粒,其特征在于:重组免疫毒素序列为SEQ ID NO.3所示核苷酸序列。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:张秋萍,胡义,张莉,
申请(专利权)人:武汉大学,
类型:发明
国别省市:83
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