一种从红三叶加工废水中同时提取叶绿素和蛋白质的方法技术

本发明专利技术涉及一种从红三叶加工废水中同时提取叶绿素和蛋白质的方法，包括以下步骤：加工废水的预处理、有机溶剂沉降、有机溶剂浸提、浓缩/干燥等步骤。该方法具有操作简单、成本低、高效环保、污染少、适合于工业化大生产且不破坏叶绿素等特点。?

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种从废水中提取有机物的方法，尤其是一种从红三叶加工废水中同 时提取叶绿素和蛋白质的方法。
技术介绍
红三叶(Trifolium Pratense. L)为豆科三叶草属的多年生草本植物，是豆科植 物中一种重要的饲料用草，全球都有广泛分布。红三叶草中含有大量的异黄酮类物质，质量 分数占干重的0. 59Γ3. 5%，比其他豆科植物中异黄酮的含量高10倍 30倍。红三叶异黄酮 具有抗雌激素作用，能有效改善妇女更年期综合症、预防和治疗动脉硬化等疾病，还可将其 全草制成软膏，治疗局部溃疡。由于红三叶具有多种医疗、保健功效，使其成为一种极具潜 力的天然药物和保健食品。因此，充分利用红三叶草开发天然药物和保健品，具有重要的经 济价值和生态效益。红三叶加工废水是指为提取红三叶中的异黄酮而加工红三叶草干草粉的过程中， 新鲜的红三叶草经粉碎、搓揉、挤压、冲洗、烘干、打捆加工而产生的废水。目前，红三叶草加 工废水被直接排放。由于废水中含有大量的可溶性糖、蛋白质和叶绿素等有机物，自然发酵 后会释放出硫化氢、氨气等恶臭气体，造成极大的资源浪费和环境污染。因此，开发资源化 处理红三叶加工废水的技术，既可实现废弃资源的合理利用，又可达到消除污染、保护环境 的目的，有利于构建资源节约型、环境友好型社会。目前，制备红三叶草干草粉的方法已经有相关报道，如红三叶鲜青草预加工方法 (专利CN101417002A)；从红三叶草中提取异黄酮及应用也已经有相关报道，如从红三叶中 提取异黄酮的方法(专利CN100577656C)、用红三叶草异黄酮制备染料木黄酮和黄豆苷元的 方法(专利CN101353340A)、一种红车轴草提取物及其制备方法(专利CN101396422A)、红车 轴草提取物及其制剂(专利CN1439367A)、一种从红车轴草制备红车轴草异黄酮的制备工艺 (专利CN1693306A)、从红车轴草中提取异黄酮类物质的工艺(专利CN101386613A)、一种从 红车轴草中提取分离异黄酮的生产工艺(专利CN101559094A)、Herbal Snuff Composition (US Patent 4696315)。而对将红三叶的加工废水进行资源化处理的技术研究，特别是从红 三叶加工废水中同时提取叶绿素和蛋白质的技术研究未见报道。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种从红三叶加工废水中同时提取叶绿素和蛋 白质的方法；该方法是以按照专利CN101417002A制备红三叶草干草粉过程中产生的有机 废水为处理对象，经预处理、有机溶剂沉降、有机溶剂浸提、浓缩/干燥等步骤，得到叶绿素 和蛋白质的方法；该方法具有操作简单、成本低、高效环保、污染少、适合于工业化大生产且 不破坏叶绿素等特点。为解决上述技术问题，本专利技术一种从红三叶加工废水中同时提取叶绿素和蛋白质 的方法，包括以下步骤1)预处理将红三叶加工废水经筛网过滤，滤液备用；2)有机溶剂沉降向滤液中加入有机溶剂，搅拌，离心，得到上清液A和沉渣B；3)有机溶剂浸提向步骤2)得到的沉渣中加入有机溶剂，搅拌，离心，得到上清液和沉渣；4)浓缩/干燥将步骤3)得到的上清液进行真空减压浓缩，得到浓缩液，经干燥，得到 叶绿素；将步骤3)得到的沉渣进行干燥，得到蛋白质。进一步地，所述步骤1)中，所述筛网的材质为织造布、无纺布、金属；所述筛网的 目数彡100目。进一步地，所述步骤2)中，所述有机溶剂为甲醇、乙醇或丙酮；所述有机溶剂的用 量为步骤1)得到的滤液体积的109Γ50%。所述搅拌是在搅拌速度为100 rpnT300rpm下搅拌5 min 30min。所述离心是在转速为3000 rpm 5000rpm下离心5 min 20min。所述步骤2)得到的上清液A可以经真空减压浓缩，回收有机溶剂；真空减压浓缩 时的压力为0. 05 MPa 0. 08 MPa，温度为40°C 50°C。进一步地，所述步骤3)中，所述有机溶剂为甲醇、乙醇或丙酮；所述有机溶剂的体 积分数为70% 100%。所述搅拌是在搅拌速度为100 rpm ^300 rpm下搅拌1 h H所述离心是在转速为3000 rpm 5000rpm下离心5 min 20min。进一步地，所述步骤3)可重复进行多次，直至叶绿素提取完全。进一步地，所述步骤4)中，真空减压浓缩是在压力为0.05 MPa 0. 08 MPa，温度为 400C 50°C下进行。本专利技术主要有以下显著优点1、本专利技术采用有机溶剂沉淀、浸提和浓缩等技术，能同时将叶绿素和蛋白质提取出来， 并避免了采用热处理、酸碱处理等常规工艺处理时对叶绿素的破坏，在分离提取过程中叶 绿素得到了充分地浸提和保护；2、本专利技术采用真空减压浓缩回收有机溶剂，成本低且使资源得到充分利用；3、本专利技术操作简便、提取效率高，适合于工业化大生产，操作过程中使用的乙醇、甲醇、 丙酮等溶剂可实现回收再利用，污染少；4、本专利技术过程中产生的二次废水可作为饲养、灌溉用水等，实现了废弃资源的全处理 和循环利用，可完全解决废水排放所造成的污染问题。附图说明下面结合附图对本专利技术的具体实施方式做进一步详细说明。图1为本专利技术的工艺流程图。具体实施方式 实施方式1，包括以下步骤1)取红三叶加工废水，经20目筛网过滤，去除固体颗粒杂质，滤液备用；2)在滤液中加入滤液体积20%的无水甲醇，放入搅拌机中，在150rpm下搅拌15 min, 静置40min，放入离心机中，在3000 rpm下离心10 min,得到上清液A和沉渣B ；将上清液 A在温度40°C、压力0.05 Mpa下进行真空减压浓缩，回收甲醇循环使用，浓缩废液用作农田 灌溉用水或厌氧消化原料；3)向沉渣B中加入体积分数为80%的甲醇，放入搅拌机中，在40°C、150rpm下避光搅拌 2 h，之后放入离心机中，在3000 rpm下离心15 min，得到上清液C和沉渣D ；将上清液C放 入容器中待用；4)对沉渣D重复步骤3)，得到上清液E和沉渣F；5)将上清液E倒入上清液C的容器中，在温度40°C、压力0.05 Mpa下进行真空减压浓 缩，回收甲醇循环使用同时得到浓缩液，之后将得到的浓缩液干燥，得到高纯度的叶绿素， 质量分数大于60% ；将沉渣F干燥，得到高纯度的蛋白质，质量分数大于50%。实施方式2，包括以下步骤1)取红三叶加工废水，经40目筛网过滤，去除固体颗粒杂质，滤液备用；2)在滤液中加入滤液体积30%的无水乙醇，放入搅拌机中，在200rpm下搅拌lOmin， 静置lOmin，放入离心机中，在4000 rpm下离心10 min，得到上清液A和沉渣B ；将上清液A 在温度45°C、压力0. 06 Mpa下进行真空减压浓缩，回收乙醇循环使用，浓缩废液用作饲养、 农田灌溉用水或厌氧消化原料；3)向沉渣B中加入体积分数为90%的乙醇，放入搅拌机中，在60°C、200rpm下避光搅拌 1.5 h，之后放入离心机中，在4000 rpm下离心10 min，得到上清液C和沉渣D ；将上清液C 放入容器中待用；4)对沉渣D重复步骤3)，得到上清液E和沉渣F；5)将上清液E倒入上清液C的容器中，在温度45°C、压力0.06 Mpa下进行真空减压浓 缩，回收乙醇循环使用同时得到浓本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从红三叶加工废水中同时提取叶绿素和蛋白质的方法，其特征在于，包括以下步骤：１）预处理：将红三叶加工废水经筛网过滤，滤液备用；２）有机溶剂沉降：向滤液中加入有机溶剂，搅拌，离心，得到上清液Ａ和沉渣Ｂ；３）有机溶剂浸提：向步骤２）得到的沉渣中加入有机溶剂，搅拌，离心，得到上清液和沉渣；４）浓缩／干燥：将步骤３）得到的上清液进行真空减压浓缩，得到浓缩液，经干燥，得到叶绿素；将步骤３）得到的沉渣进行干燥，得到蛋白质。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：孔维宝，曾家豫，杨红，刘雄雄，刘娜，葸玉琴，张继，曹云涛，
申请(专利权)人：西北师范大学，
类型：发明
国别省市：62