治疗非缺血性心力衰竭的药物组合物制造技术

治疗非缺血性心力衰竭的药物组合物，其包含作为活性成分的集落刺激因子。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】本专利技术涉及治疗非缺血性心力衰竭的药物组合物，其包含作为活性成分的集落刺激因子。本专利技术也涉及治疗非缺血性心力衰竭的方法，其包含施用集落刺激因子。背景领域心力衰竭是这样的状态，即减弱的心脏功能使其无法保证全身组织代谢所需的射血，或者此射血只在心室填充压力升高时完成[ShinRinsho Naikagaku(New Clinical Internal Medicine)，IgakuShoinLtd.，Japan]。缺血性心力衰竭是无法接收到代谢所需的血量而引起的诱导缺痒的心力衰竭，而非缺血性心力衰竭指缺血性心力衰竭之外的心力衰竭。非缺血性心力衰竭包括由心肌病如特发的、继发的或其它形式心肌病的恶化所导致的类型。人粒细胞-集落刺激因子(G-CSF)是被发现作为粒细胞谱系造血祖细胞的分化和增殖因子的造血因子，因为其促进体内中性粒细胞的造血，临床上用作治疗伴随骨髓移植或癌症化疗的中性粒细胞减少的药剂。除上述效应之外，人G-CSF作用于造血干细胞以刺激它们的分化和增殖。此外，本专利技术的专利技术人近来报道了G-CSF诱导造血干细胞从骨髓补充到外周血液中，促进它们移动到心肌梗死损伤和分化成心肌细胞，以此减缓心肌梗死后的左心室重建和心力衰竭(Minatoguchi，S.等Circulation，2004(in press))。然而，不清楚G-CSF是否也对心肌病如扩张性心肌病导致的非缺血性心力衰竭有效。
技术实现思路
本专利技术的目标是提供治疗由心肌病恶化引起的非缺血性心力衰竭的药物组合物。本专利技术的专利技术人发现在心肌病动物模型中，长时间的施用G-CSF，改善了进行性心肌纤维化、左心室重建(remodeling)和心力衰竭。此发现导致了本专利技术的完成。即，本专利技术提供治疗非缺血性心力衰竭的药物组合物，其包含作为活性成分的集落刺激因子。本专利技术也提供治疗非缺血性心力衰竭的方法，其包含对有此需要的患者以治疗非缺血性心力衰竭的有效量施用作为活性成分的集落刺激因子。本专利技术进一步涉及集落刺激因子在用于治疗非缺血性心力衰竭的药物组合物的制备中的应用。本专利技术进一步提供治疗非缺血性心力衰竭的试剂盒(kit)，其包含了治疗非缺血性心力衰竭所需的有效剂量的集落刺激因子和使用指南。附图简述附图说明图1显示被Masson’s三色染剂染色的心室横切标本的显微照片。(A)对照组，(B)G-CSF组。染成蓝色的区域是纤维化的区域(用箭头指出)。图2显示骨髓细胞来源的心肌细胞在聚焦激光扫描显微镜下观察的显微照片。(A)DiI标记的骨髓细胞(红色，细箭头)，(B)核的染色(蓝色，粗箭头)，(C)被α-肌节肌动蛋白染色的心肌细胞(绿色)，(D)(A)到(C)的合并图。标尺是20μm。实行本专利技术的最佳方式本专利技术涉及治疗非缺血性心力衰竭的药物组合物，其包含作为活性成分的集落刺激因子。非缺血性心力衰竭包含，例如，由心肌病恶化引起的类型。心肌病的例子包括特发性心肌病如扩张性、肥大的和限制性形式的心肌病，也包括继发心肌病如心肌炎和结节病。本专利技术可用于，例如，扩张性心肌病。集落刺激因子的例子包括粒细胞-集落刺激因子(G-CSF)、粒细胞-单核细胞-集落刺激因子(GM-CSF)和单核细胞-集落刺激因子(M-CSF)。例如，G-CSF可在本专利技术中应用。在G-CSF以本专利技术药物组合物中的活性成分应用的病例中，任何G-CSF都能应用，但优选高度纯化的产品。具体例子包括哺乳动物G-CSF，尤其人G-CSF或基本具有相同生物活性的其等价物。其中应用的G-CSF可以是任何来源的，包括那些自然产生或那些重组产生的。此重组产生的G-CSF可以具有与自然产生的G-CSF相同的氨基酸序列(例如，JP 2-5395B，JP 62-236488A)，或在氨基酸序列中含有一个或多个氨基酸残基的删除、替换和/或添加，而只要它保持了与天然产生的G-CSF相同的生物活性。例如，定点突变(Gotoh，T.等(1995)Gene 152，271-275；Zoller，M.J.和Smith，M.(1983)MethodsEnzymol.100，468-500；Kramer，W.等(1984)Nucleic Acids Res.12，9441-9456；Kramer，W.和Fritz H.J.(1987)MethodsEnzymol.154，350-367；Kunkel，T.A.(1985)Proc.Natl.Acad.Sci.USA，82，488-492；Kunkel(1988)Methods Enzymol.85，2763-2766)或其它技术能被用于在G-CSF的氨基酸序列中引入合适的突变，以此制备在功能上与G-CSF等同的多肽。同样地，氨基酸突变也会在自然界中发生。已经众所周知，通过一个或多个氨基酸残基的删除和/或添加，和/或其它氨基酸对它们的置换，由一种氨基酸序列修饰得到的另一种氨基酸序列的多肽，保持了与原始多肽相同的生物活性(Mark，D.F.等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA(1984)81，5662-5666；Zoller，M.L.和Smith，M.Nucleic Acids Research(1982)10，6487-6500；Wang，A.等，Science(1984)224，1431-1433；Dalbadie-McFarland，G.等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA(1982)79，6409-6413)。因此，其氨基酸序列包含了G-CSF氨基酸序列一个或多个氨基酸突变而功能上与G-CSF等同的多肽也能在本专利技术的药物组合物中应用。在这样的多肽中的突变氨基酸数目通常高达30个氨基酸，优选高达15个氨基酸，更优选高达5个氨基酸(例如，多达3个氨基酸)。在替换突变体中，氨基酸替换最好以保持氨基酸侧链的特性方式产生。这种氨基酸替换可利用的氨基酸实例包括疏水性氨基酸(A、I、L、M、F、P、W、Y、V)，亲水性氨基酸(R、D、N、C、E、Q、G、H、K、S、T)，具有脂肪族侧链的氨基酸(G、A、V、L、I、P)，具有含羟基侧链的氨基酸(S、T、Y)，具有含硫侧链的氨基酸(C、M)，具有含羧酸或氨基侧链的氨基酸(D、N、E、Q)，具有含碱侧链的氨基酸(R、K、H)，和具有芳香族侧链的氨基酸(H、F、Y、W)(括号中的大写字母指单字母符号中的对应氨基酸)。含有在G-CSF氨基酸序列中数个氨基酸残基的添加的多肽包括了含有G-CSF的融合多肽。融合多肽是G-CSF和其它多肽间的融合产物，而这些多肽也能在本专利技术中应用。为制备融合多肽，例如，可将编码G-CSF的DNA和编码不同多肽的DNA在阅读框中连接在一起，引入合适的表达载体，然后在合适的宿主中表达。其他与G-CSF融合的多肽没有限制，而无论如何只要得到的融合多肽保持与G-CSF一样的生物活性。已有许多关于G-CSF氨基酸序列中带有突变的G-CSF衍生物的报道，而应用这些已知的G-CSF衍生物也有可能(例如，USP 5,581,476，USP 5,214,132，USP 5,362,853，USP 4,904,584)。此外，应用化学性修饰的G-CSF也有可能。化学性修饰的G-CSF实例包括那些对糖链结构性改变，添加和/或删除而修饰的类型，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.治疗非缺血性心力衰竭的药物组合物，其包含作为活性成分的集落刺激因子。2.根据权利要求1的药物组合物，其中非缺血性心力衰竭由心肌病恶化引起。3.根据权利要求2的药物组合物，其中心肌病是特发性心肌病。4.根据权利要求3的药物组合物，其中特发性心肌病是扩张性心肌病。5.根据权利要求1到4中的任一项的药物组合物，其中集落...

【专利技术属性】
技术研发人员：藤原久义，竹村元三，
申请(专利权)人：藤原久义，
类型：发明
国别省市：