神经酰胺化合物在制备细胞活化剂中的应用制造技术

本发明专利技术提供了ＮＫＴ细胞活化剂，自身免疫疾病（例如，全身性红斑狼疮、全身性强皮症、溃疡性结肠炎、脑脊髓炎、多发性硬化病、和Ⅰ型糖尿病等）的治疗剂，和堕胎剂。按照本发明专利技术的药剂含有下式（Ⅰ）的α－糖基神经酰胺或其盐或其溶剂化物作为有效成分。（*该技术在2018年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及含有α-糖基神经酰胺的NKT细胞活化剂，自身免疫疾病治疗剂和堕胎剂。
技术介绍
已发现适当表达T细胞受体的中间TCR细胞(TCRint细胞)，在显示大颗粒淋巴细胞(LGL)样的形态，经常表达IL-2R β链，和具有perforin颗粒等方面是与Natural Killer(NK)细胞类似的细胞，但就具有TCR这一点表明是与NK细胞明显不同的细胞(Watannabe，H.等，J.Immunol.，155，2972(1995))。因此，在小鼠中，在白介素12(IL-12)活化的TCRint细胞中，表达NK1.1的NK1.1+TCRint(NKT)细胞被证明是肿瘤向肝脏或肺血原性转移抑制的重要效应器细胞(Hashimoto，W.等，J.Immunol.，154，4333(1995)；Anzai，R.等.，Immunol.，88，82(1996))。由此可见，可认为这些NKT细胞对于癌细胞、寄生虫或原生动物，以及李司忒氏菌属(Listeriamonocytogenes)或结核菌等细胞内感染细菌的排除可起到重要的作用(Seki，S.等，J.Immunol.，28，1069(1996))。另外，已知这些NKT细胞与骨髓移植引起的急性期排斥反应(Yankelevich，B.等，J.Immunol.，142，3423(1989))或辅助T细胞的Th1/Th2的分化抑制引起的IgE抗体产生的抑制(Yoshimoto，T.等，J.Exp.Med.，179，1285(1994))等密切相关。因此，这些NKT细胞，在近些年，作为新的细胞群是非常引人注目的细胞群。Vα14+NKT细胞是上述NKT细胞的一个亚型，大多数Vα14+NKT细胞表达Vα14Jα281mRNA，并将此作为TCRα链具有。近年，这些Vα14+NKT细胞被证明与自身免疫疾病的发病密切相关。即，MRLlpr/lpr小鼠，在出生后17-20周龄时异常淋巴细胞积聚引起自身免疫疾病(人全身性红斑狼疮)的模型小鼠，用该模型小鼠证明，在自身免疫疾病发病前，Vα14+NKT细胞选择性的减少(Mieza，M.A.等，J.Immunol.，156，4035(1996))。在其它自身免疫疾病模型鼠上也观察到了类似的现象，例如，gld小鼠或(NZBxNZW)F1小鼠，证明Vα14+NKT细胞与自身免疫疾病的发病密切相关(Makino，Y.等，Clin.Immunol.，28，1487(1996))。更有意思的是，在人身上也观察到了类似的现象。即，与小鼠Vα14Jα281链相同的人相应的Vα24JαQα链，在健康人末梢血的CD4-/CD8-T细胞中的存在量为20-50％，但在硬皮症患者中几乎消失了(Sumida，T.等.，J.Exp.Med，.182，1163(1995))。因此，可知鼠Vα14+NKT细胞或人Vα24JαQαT细胞与不同的遗传因子或遗传背景引起的各种自身免疫疾病相关。由此可见，具有上述的NKT细胞活化作用的IL-12，可被期待用作象人全身性红斑狼疮(systemic lupus erythematosusSEL)或全身性强皮症(systemicsclerosisSSc)这样的自身免疫疾病的治疗剂。但是，当使用IL-12对MRL lpr/lpr小鼠给药时，与未给药的小鼠相比，脾和淋巴结中异常淋巴球(CD3+B220+双阴性T细胞)有明显增加(TakenoriTsutsui等.，日本免疫学会总会·学术集会记录，347(1996))。但是，在生物体内存在各种糖与神经酰胺以β-构型键合而成的β-半乳糖基神经酰胺或β-葡萄糖基神经酰胺(Svennerholm，L.等.，Biochem.Biophys.Acta，280，626(1972)；Karlsson，K.-A.等.，Biochim.Biophys.Acta，316，317(1973))。一方面，已知α-半乳糖基神经酰胺有显著的免疫赋活作用以及抗肿瘤作用(Morita，M.等.，J.Med.Chem，38，2176(1995))，且α-半乳糖基神经酰胺或α-葡萄糖基神经酰胺的该作用比β-半乳糖基神经酰胺或β-葡萄糖基神经酰胺的作用强的多(Motoki，K.等.，Biol.Pharm.Bull.，18，1487(1995))。另外，已知使用具有α-葡萄糖基神经酰胺结构的化合物对生物体给药时，具有射线防护作用(Motoki，K.等.，Bioorg.Med.Chem.Lett.，5，2413(1995))，具有小鼠黑素瘤B16的肺转移抑制作用(Kobayashi，E.等.，Oncology Res.，7，529(1995))，和小鼠大肠癌Colon26或小鼠T淋巴瘤EL-4的肝转移抑制作用(元木一宏等日本癌学会总会记事、523(1996))和增加血小板数或白血球数的作用(Motoki，K.等.，biol.Pharm.Bull.，19，952(1996))。但是，至今没有报道指出具有α-葡萄糖基神经酰胺结构的化合物对自身免疫疾病有效或具有堕胎作用，以及具有α-葡萄糖基神经酰胺结构的化合物会影响NKT细胞。专利技术概述本专利技术的专利技术者发现，α-葡萄糖基神经酰胺在RAG-1KO/Vα14tg/Vβ8.2tg小鼠(不存在按淋巴球划分的B细胞、T细胞和NK细胞，但存在大量NKT细胞的小鼠)中可增强NKT细胞的对于肿瘤细胞的抗肿瘤细胞毒素活性，由于α-葡萄糖基神经酰胺使得NKT细胞(特别是小鼠Vα14+NKT细胞和人Vα24+NKT细胞)的数目显著增加，α-葡萄糖基神经酰胺可抑制人全身性红斑狼疮的模型小鼠MRLlpr/lpr小鼠腋下和鼠腹股沟的淋巴结的异常肿胀(异常淋巴球的积聚)，并因此α-葡萄糖基神经酰胺可抑制4％DSS诱发的小鼠结肠炎的进行。本专利技术的专利技术者还发现，α-葡萄糖基神经酰胺可抑制实验的自身免疫性脑脊髓炎的发病。小鼠的实验的自身免疫性脑脊髓炎是人多发性硬化症的模型。本专利技术的专利技术者还发现，在NOD小鼠中，α-葡萄糖基神经酰胺可抑制糖尿病的自然发病。NOD小鼠是人I型糖尿病的模型。本专利技术的专利技术者还发现，α-葡萄糖基神经酰胺对妊娠小鼠具有堕胎效果。本专利技术的目的是提供NKT细胞活化剂以及活化的NKT细胞。本专利技术的另一目的是提供自身免疫疾病(例如，全身性红斑狼疮，全身性强皮症，溃疡性结肠炎，脑脊髓炎，多发性硬化症，和I型糖尿病等)的治疗剂。本专利技术的另一目的是提供堕胎剂。本专利技术的NKT细胞活化剂，自身免疫疾病治疗剂和堕胎剂含有下式(I)的化合物或其盐或其溶剂化物作为有效成分 其中R1是H或OH，X是7～27中的任一整数，R2选自下列(a)～(e)的取代基(其中，Y是5～17中的任一整数)，(a)-CH2(CH2)YCH3(b)-CH(OH)(CH2)YCH3(c)-CH(OH)(CH2)YCH(CH3)2(d)-CH＝CH(CH2)YCH3(e)-CH(OH)(CH2)YCH(CH3)CH2CH3、- -且R3～R9是下列i)～ii)中任一定义的取代基i)R3、R6和R8是H时R4是H、OH、NH2、NHCOCH3、或选自下面(A)～(D)中的取代基 R5是OH，或选自下面(E)或(F)的取代基 R7是OH本文档来自技高网...

【技术保护点】
式（Ⅰ）化合物或其盐或其溶剂化物在制备ＮＫＴ细胞活化剂中的应用＊＊＊（Ⅰ）其中Ｒ↑［１］是Ｈ或ＯＨ，Ｘ是７～２７中的任一整数，Ｒ↑［２］是选自下列（ａ）～（ｅ）的取代基，其中，Ｙ是５～１７中的任一 整数，（ａ）－ＣＨ↓［２］（ＣＨ↓［２］）↓［Ｙ］ＣＨ↓［３］（ｂ）－ＣＨ（ＯＨ）（ＣＨ↓［２］）↓［Ｙ］ＣＨ↓［３］（ｃ）－ＣＨ（ＯＨ）（ＣＨ↓［２］）↓［Ｙ］ＣＨ（ＣＨ↓［３］）↓［２］（ｄ）－ＣＨ＝ＣＨ （ＣＨ↓［２］）↓［Ｙ］ＣＨ↓［３］（ｅ）－ＣＨ（ＯＨ）（ＣＨ↓［２］）↓［Ｙ］ＣＨ（ＣＨ↓［３］）ＣＨ↓［２］ＣＨ↓［３］、且Ｒ↑［３］～Ｒ↑［９］是下列ｉ）～ｉｉ）中任一定义的取代基：ｉ）Ｒ↑［３］、Ｒ↑［６］和 Ｒ↑［８］是Ｈ时Ｒ↑［４］是Ｈ、ＯＨ、ＮＨ↓［２］、ＮＨＣＯＣＨ↓［３］、或选自下面（Ａ）～（Ｄ）中的取代基：＊＊＊Ｒ↑［５］是ＯＨ，或选自下面（Ｅ）和（Ｆ）的取代基：＊＊＊Ｒ↑［７］是ＯＨ或选自下面 （Ａ）～（Ｄ）的取代基：＊＊＊Ｒ↑［９］是Ｈ、ＣＨ↓［３］、ＣＨ↓［２］ＯＨ、或选自下面（Ａ’）～（Ｄ’）的取代基：＊＊＊ｉｉ）Ｒ↑［３］、Ｒ↑［６］和Ｒ↑［７］是Ｈ时Ｒ↑［４］是Ｈ、ＯＨ、ＮＨ↓［２ ］、ＮＨＣＯＣＨ↓［３］、或选自下面（Ａ）～（Ｄ）的取代基：＊＊＊Ｒ↑［５］是ＯＨ、或选自下面（Ｅ）和（Ｆ）的取代基：＊＊＊Ｒ↑［８］是ＯＨ、或选自下面（Ａ）～（Ｄ）的取代基：＊＊＊Ｒ↑［９］ 是Ｈ、ＣＨ↓［３］、ＣＨ↓［２］ＯＨ或选自下面（Ａ’）～（Ｄ’）的取代基：＊＊＊。...

【技术特征摘要】
JP 1997-4-10 92412/971.式(I)化合物或其盐或其溶剂化物在制备NKT细胞活化剂中的应用 其中R1是H或OH，X是7～27中的任一整数，R2是选自下列(a)～(e)的取代基，其中，Y是5～17中的任一整数，(a)-CH2(CH2)YCH3(b)-CH(OH)(CH2)YCH3(c)-CH(OH)(CH2)YCH(CH3)2(d)-CH＝CH(CH2)YCH3(e)-CH(OH)(CH2)YCH(CH3)CH2CH3、且R3～R9是下列i)～ii)中任一定义的取代基i)R3、R6和R8是H时R4是H、OH、NH2、NHCOCH3、或选自下面(A)～(D)中的取代基R5是OH，或选自下面(E)和(F)的取代基 R7是OH或选自下面(A)～(D)的取代基R9是H、CH3、CH2OH、或选自下面(A’)～(D’)的取代基ii)R3、R6和R7是H时R4是H、OH、NH2、NHCOCH3、或选自下面(A)～(D)的取代基R5是OH、或选自下面(E)和(F)的取代基 R8是OH、或选自下面(A)～(D)的取代基R9是H、CH3、CH2OH或选自下面(A’)～(D’)的取代基2.权利要求1中记载的应用，其中式(I)化合物中，R3和R6表示H，R4表示OH或(A)～(D)中的任一取代基，R5表示OH或(E)或(F)表示的取代基，R7和R8分别表示H或OH，但R7和R8不表示同一取代基，R9表示CH2OH、CH3、H、或(A’)～(D’)中任一取代基。3.权利要求1中记载的应用，其中式(I)化合物中，X是21～25的整数，R2表示取代基(b)，式中Y是11～15的整数。4.权利要求1中记载的应用，其中式(I)化合物中，X是9～13的整数，R2表示取代基(a)，式中Y是11～15的整数。5.权利要求1中记载的应用，其中式(I)化合物是(2S，3S，4R)-1-(α-D-吡喃半乳糖基氧)-2-二十六烷酰氨基-3，4-十八烷二醇。6.活化NKT细胞的方法，包括在式(I)化合物或其盐或其溶剂化物存在下，体外培养包含NKT细胞的单核细胞部分 其中R1是H或OH，X是7～27中的任一整数，R2是选自下列(a)～(e)的取代基，其中，Y是5～17中的任一整数，(a)-CH2(CH2)YCH3(b)-CH(OH)(CH2)YCH3...

【专利技术属性】
技术研发人员：谷口克，河野铁，肥塚靖彦，
申请(专利权)人：麒麟麦酒株式会社，
类型：发明
国别省市：JP[日本]