针对FIV感染的免疫接种材料和方法技术

本发明专利技术涉及使用来源于灵长类动物免疫缺陷病毒（包括ＨＩＶ和ＳＩＶ）的免疫原预防猫科动物感染ＦＩＶ的方法和组合物。描述了用受试疫苗组合物接种猫科动物的方法。在用ＦＩＶ攻击时，根据本发明专利技术的方法和组合物接种的猫科动物表现出针对ＦＩＶ的保护性体液和细胞免疫应答。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】本专利技术在国家卫生研究院(National Institutes of Health)基金No.NIHAI30904支持的研究计划下由政府资助完成。政府在本专利技术中拥有一定的权利。相关申请的交叉参考本申请要求2003年5月12日递交的美国临时申请Serial No.60/470,066的权利，该申请连同其所有的附图、核酸序列、氨基酸序列和表格在此被全文引入为参考。
技术介绍
家猫易受若干逆转录病毒的感染，这包括猫白血病病毒(FeLV)、猫肉瘤病毒(FeSV)、内源C型致癌RNA病毒(RD-114)和猫合胞体形成病毒(FeSFV)。在这些病毒中，FeLV为最重要的病原体，其引起多种症状，包括淋巴网状内皮细胞和骨髓瘤、贫血、免疫介导的紊乱和与人获得性免疫缺陷综合症(AIDS)相似的免疫缺陷综合症。最近，称为FeLV-AIDS的特殊复制缺陷型FeLV突变体更特别与免疫抑制性质相关。Pedersen等人(1987)最初报道了猫T-嗜淋巴细胞慢病毒(现在称为猫免疫缺陷病毒，FIV)的发现。FIV的特征已经在Yamamoto等人(1988a)、Yamamoto等人(1988b)和Ackley等人(1990)中报道。血清流行病学数据表明FIV感染为全世界家猫和野生猫固有的。多种症状与FIV感染有关，这包括流产、脱毛症、贫血症、结膜炎、慢性鼻炎、肠炎、齿龈炎、便血、神经异常、齿根骨膜炎和脂溢性皮炎。家猫感染FIV的免疫学标志为猫CD4+外周血淋巴细胞的慢性和进行性缺失、CD4∶CD8细胞比例的降低和一些情况下形成CD8的淋巴细胞增加。基于分子、生化和免疫病理学特征，现在认为猫的FIV感染为是比FeLV-FAIDS更好的猫AIDS模型。Olmsted等人(1989a)、Olmsted等人(1989b)和Talbott等人(1989)报道了FIV的克隆和序列分析。Hosie和Jarrett(1990)描述了猫感染FIV的血清学反应。根据基于每一株系引起的交叉中和抗体水平的免疫类型可将FIV病毒亚型分类(Murphy和Kingsbury，1990)。最近根据基于核苷酸序列同源性的基因型对病毒亚型分类。虽然HIV和FIV亚型分类是基于基因型(Sodora等人，1994；Rigby等人，1993和Louwagie等人，1993)，但是关于亚型的基因型和免疫类型之间的相互关系还了解的很少。FIV病毒分离物分为四种FIV亚型A、B、C和D(Kakinuma等人，1995)。已经描述了除C亚型外所有FIV亚型的传染性分离物和传染性分子克隆(Sodora等人，1994)。C亚型FIV仅从加拿大猫的细胞DNA中鉴定出来(Sodora等人，1994；Rigby等人，1993；Kakinuma等人，1995)。本领域鉴定的FIV株系包括(株系亚型示于括号内)Petaluma(A)、Dixon(A)、UK8(A)、Dutch113(A)、Dutch19K(A)、UK2(A)、SwissZ2(A)、Sendai-1(A)、USCAzepy01A(A)、USCAhnky11A(A)、USCAtt-10A(A)、USCAlemy01(A)、USCAsam-01A(A)、PPR(A)、FranceWo、Netherlands、Bangston(A/B)、Aomori-1(B)、Aomori-2(B)、USILbrny03B(B)、TM2(B)、Sendai-2(B)、USCKlgri02B(B)、Yokohama(B)、USMAsboy03B(B)、USTXmtex03B(B)、USMCglwd03B(B)、CABCpbar03C(C)、CABCpbar07C(C)、CABCpady02C(C)、Shizuoka(D)和Fukuoka(D)。在疫苗中使用FIV衍生免疫原的一个顾虑是兽医也许不能辨别测试为FIV抗体或FIV蛋白质阳性的猫是否已经感染了FIV或者抗体是来自针对FIV使用FIV衍生免疫原接种的猫。因此，本领域还需要这样的疫苗，其预防FIV感染但允许兽医确定FIV抗体是猫感染还是免疫接种的结果。专利技术概述本专利技术涉及使用来自灵长类动物免疫缺陷病毒(包括HIV和SIV)的免疫原预防猫科动物感染FIV的方法和组合物。本文描述了用受试疫苗组合物接种猫科动物的方法和组合物。当用FIV攻击时，根据本专利技术的方法和组合物接种的猫科动物表现出对FIV的保护性免疫应答。本专利技术也涉及选择免疫缺陷病毒中进化保守的表位的方法。使用本专利技术的方法鉴定的免疫缺陷病毒中进化保守的表位也构成本专利技术的一部分。本专利技术还涉及预防人和其他动物感染免疫缺陷病毒(如HIV和FIV)的方法。序列简述SEQ ID.NO1为HIV-1UCD1包膜蛋白的氨基酸序列。SEQ ID NO2为HIV-1UCD1gag蛋白质的氨基酸序列。SEQ ID NO3为编码包膜蛋白的HIV-1UCD1多核苷酸的核苷酸序列。SEQ ID NO4为编码gag蛋白质的HIV-1UCD1多核苷酸的核苷酸序列。SEQ ID.NO5为HIV-1IIIB包膜蛋白的氨基酸序列。SEQ ID NO6为HIV-1IIIBgag蛋白质的氨基酸序列。SEQ ID NO7为编码包膜蛋白的HIV-1IIIB多核苷酸的核苷酸序列。SEQ ID NO8为编码gag蛋白质的HIV-1IIIB多核苷酸的核苷酸序列。专利技术详述本专利技术涉及通过给动物施用来自灵长类动物免疫缺陷病毒(如人免疫缺陷病毒(HIV)和猿猴免疫缺陷病毒(SIV)的免疫原预防猫科动物感染FIV的材料和方法。在一个实施方案中，给猫科动物施用有效数量的包含来自灵长类动物免疫缺陷病毒免疫原的组合物。此外，本文所述的多种免疫原组合物可分开和彼此组合使用。有利的是，本专利技术能够预防FIV感染，其中动物中针对FIV的免疫应答的产生允许兽医或本领域其他技术人员确定动物对FIV或者FIV免疫原或抗原的免疫应答究竟是免疫接种以预防FIV感染的结果，还是否为动物感染FIV的结果。在一个实施方案中，使用本专利技术的疫苗组合物免疫接种的动物不产生与FIV gp95交叉反应的抗体。感染FIV或接受含FIV衍生的免疫原或抗原的疫苗的动物产生与FIV gp95结合的抗体。包括在本专利技术范围之内的猫科动物包括家猫、野生猫和包括美洲野猫、美洲豹、山狮、老虎、美洲虎、金钱豹、美洲狮、印度豹和狮子在内的其他野猫。本专利技术也可用于使用来自灵长类动物免疫缺陷病毒(如HIV和SIV)的免疫原在猫科动物中产生针对FIV的细胞和/或体液免疫应答。在一个实施方案中，给猫科动物施用数量足以诱导针对FIV的免疫应答的免疫原。可用健康的未感染HIV的人PBMC作为指示细胞测试免疫猫的血清抗体针对HIV的病毒中和抗体活性。可测试免疫的猫的HIV特异性T辅助细胞(Th)和细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性。可通过Th细胞因子和CTL细胞毒素的水平测量Th和CTL活性，其中所述的Th细胞因子和CTL细胞毒素由未免疫接种和免疫的猫的淋巴细胞应答于灭活的HIV全病毒体外刺激产生，灭活HIV全病毒可与免疫原株相同(同源)和不同(异源)。用于体外刺激的灭活异源株可来自与免疫原株相同或不同的亚型。优选的免疫原在具有来自免疫的猫的CD4+T淋巴细胞的培养物中产生本文档来自技高网...

【技术保护点】
抑制或预防猫科动物感染猫免疫缺陷病毒（ＦＩＶ）的方法，所述方法包括给所述动物施用有效数量的来源于灵长类动物免疫缺陷病毒的免疫原。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】US 2003-5-12 60/470,0661.抑制或预防猫科动物感染猫免疫缺陷病毒(FIV)的方法，所述方法包括给所述动物施用有效数量的来源于灵长类动物免疫缺陷病毒的免疫原。2.根据权利要求1的方法，其中所述灵长类动物免疫缺陷病毒为人免疫缺陷病毒(HIV)或猿猴免疫缺陷病毒(SIV)。3.根据权利要求2的方法，其中所述HIV为HIV-1或HIV-2。4.根据权利要求3的方法，其中所述HIV-1选自HIV-1IIIB、HIV-1UCD1和HIV-1BRU。5.根据权利要求1的方法，其中所述免疫原为病毒感染的细胞或无细胞全病毒。6.根据权利要求5的方法，其中所述病毒以灭活或减毒病毒的方式处理或者该病毒为复制缺陷。7.根据权利要求6的方法，其中所述病毒通过多聚甲醛、福尔马林、苯酚、紫外线或高温处理灭活或减毒。8.根据权利要求1的方法，其中所述免疫原为所述灵长类动物免疫缺陷病毒的多肽或其免疫原性片段。9.根据权利要求8的方法，其中所述多肽由所述灵长类动物免疫缺陷病毒的env、gag、pol、tat、rev、vif、vpr、vpu或nef基因编码。10.根据权利要求8的方法，其中所述多肽为选自gp120和gp160的包膜蛋白或其免疫原性片段。11.根据权利要求8的方法，其中所述多肽为包含SEQ ID NO1或SEQ ID NO5所示氨基酸序列的HIV包膜蛋白或其免疫原性片段。12.根据权利要求8的方法，其中所述多肽为HIV的p24蛋白质或其免疫原性片段或者SIV的p27蛋白质或其免疫原性片段。13.根据权利要求12的方法，其中所述p24蛋白质为HIV-1UCD1的p24蛋白质。14.根据权利要求1的方法，其中所述免疫原为包含灵长类动物免疫缺陷病毒多核苷酸序列的重组病毒或重组表达构建体。15.根据权利要求14的方法，其中所述多核苷酸序列为HIV-1、HIV-2或SIV序列。16.根据权利要求14的方法，其中所述多核苷酸序列包含所述灵长类动物免疫缺陷病毒的一个或多个env、gag、pol、tat、rev、vif、vpr、vpu或nef基因或其免疫原性片段。17.根据权利要求14的方法，其中所述多核苷酸序列编码HIV gp160、gp120、gp41、p31、p24、p17或p7多肽或者其免疫原性片段。18.根据权利要求1的方法，其中所述方法还包括在施用来源于所述灵长类动物免疫缺陷病毒的所述免疫原后施用有效数量的来源于猫免疫缺陷病毒(FIV)的免疫原。19.根据权利要求1的方法，其中所述免疫原与可药用载体或稀释剂一起提供或施用。20.根据权利要求1的方法，其中所述免疫原与一种或多种增强所述动物对该免疫原免疫应答的佐剂一起提供或施用。21.根据权利要求1的方法，其中所述免疫原经皮下、腹膜内、肌内、口腔施用或由鼻内施用。22.根据权利要求20的方法，其中所述佐剂选自苏氨酰胞壁酰二肽(MDP)、包含细胞壁骨架(CWS)的Ribi佐剂系统、弗氏完全佐剂、弗氏不完全佐剂、铝、氢氧化铝和皂苷。23.根据权利要求1的方法，其中所述免疫原与细胞因子或淋巴因子组合施用。24.根据权利要求23的方法，其中所述细胞因子或淋巴因子为猫细胞因子或淋巴因子。25.根据权利要求1的方法，其中所述免疫原与白细胞介素-12、白细胞介素-15或白细胞介素-18组合施用。26.根据权利要求1的方法，其中所述免疫原包含灵长类动物免疫缺陷病毒蛋白质的免疫原性或抗原性肽。27.在猫科动物中抑制或产生针对FIV的免疫应答的方法，该方法包括给所述动物施用有效数量的来源于灵长类动物免疫缺陷病毒的免疫原。28.根据权利要求27的方法，其中所述灵长类动物免疫缺陷病毒为人免疫缺陷病毒(HIV)或猿猴免疫缺陷病毒(SIV)。29.根据权利要求28的方法，其中所述HIV为HIV-1或HIV-2。30.根据权利要求29的方法，其中所述HIV-1选自HIV-1IIIB、HIV-1UCD1和HIV-1BRU。31.根据权利要求27的方法，其中所述免疫原为病毒感染的细胞或无细胞全病毒。32.根据权利要求31的方法，其中所述病毒以灭活或减毒病毒的方式处理或者该病毒为复制缺陷。33.根据权利要求32的方法，其中所述病毒通过用多聚甲醛、福尔马林、紫外线和高温处理灭活或减毒。34.根据权利要求27的方法，其中所述免疫原为所述灵长类动物免疫缺陷病毒的多肽或者其免疫原性片段。35.根据权利要求34的方法，其中所述多肽由所述灵长类动物免疫缺陷病毒的env、gag、pol、tat、rev、vif、vpr、vpu或nef基因编码。36.根据权利要求34的方法，其中所述多肽为选自gp120和gp160的包膜蛋白或其免疫原性片段。37.根据权利要求34的方法，其中所述多肽为HIV的p24蛋白质或者其免疫原性片段，或者为SIV的p27蛋白质或其免疫原性片段。38.根据权利要求37的方法，其中所述p24蛋白质为HIV-1UCD1的p24蛋白质。39.根据权利要求27的方法，其中所述免疫原为包含灵长类动物免疫缺陷病毒多核苷酸序列的重组病毒或重组表达构建体。40.根据权利要求39的方法，其中所述多肽序列为HIV-1、HIV-2或SIV序列。41.根据权利要求39的方法，其中所述多核苷酸序列包含该灵长类动...

【专利技术属性】
技术研发人员：JK亚马莫托，
申请(专利权)人：佛罗里达大学研究基金公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]