本发明专利技术涉及一种前列地尔脂肪乳剂方法及主药的测定方法。采用９１５ＭＨｚ或２４５０ＭＨｚ频率微波设备，对放置在微波设备内的１ｍｌ和２ｍｌ安瓿前列地尔注射液进行微波照射，使安瓿温度升高至６５－１４０℃，并维持１０秒－５分钟，进行灭菌，可完全杀灭制剂中微生物。制剂中主药ＰＧＥ↓［１］和杂质ＰＧＡ↓［１］的测定采用冷冻干燥的方法去乳化，使样品成为油状物，然后用有机溶剂抽提油状物，得到供试液，采用高效液相色谱法，在波长２０４～２１４ｎｍ处，按照外标法或内标法测定ＰＧＥ↓［１］及ＰＧＡ↓［１］。本发明专利技术有效减少前列地尔脂肪乳剂因传统灭菌工艺造成的主药降解，同时提供一种简单准确的前列地尔脂肪乳剂的测定方法。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种前列地尔脂肪乳剂(前列地尔注射液)灭菌工艺及测定的方法，前列地尔脂肪乳剂是一种含有前列腺素E1的脂肪乳脂微球制剂，主要用于治疗肢未端缺血症、糖尿病并发症、脉管炎和一些心血管疾病，属于药品
技术介绍
前列地尔脂肪乳剂的制备方法在日本公开特许公报昭58-222014已经公开，是采用高压乳匀机设备将主药前列地尔(PGE1)溶于大豆油中，在磷脂类乳化剂作用下，高压乳化而成，在该专利中，未说明灭菌方法。目前已上市的该品种通常采用全程无菌操作的方法，即在百级净化车间，原辅料均已灭菌的情况下进行生产。前列地尔注射液是一种水包油型脂肪乳剂，乳剂物理稳定性较差，受很多灭菌因素影响，而主药前列地尔也是一种不稳定药物，不耐热，在高温情况下容易分解，采用常规的已知的方法，如湿热灭菌法，即采用热压115℃30分钟，或121℃15分钟，或流通蒸汽30分钟，这些灭菌方法虽然可达到完全灭菌状态，但是主药将有较大的分解，主药降解率超过50％，乳剂物理稳定性也差，有飘油等现象发生。辐射灭菌法同样将使前列地尔产生较大降解。紫外线和化学法不适合注射液的灭菌。而采用全程无菌的方法，控制条件非常严格，实际很难操作，不能保证所有产品处于无菌状态。另外一种方法，是采用以0.22μm微孔滤膜过滤，由于前列地尔脂肪乳剂的粒径通常在0.1～2μm之间，很难使全部含药脂微球通过膜，部分细菌在压力下，有挤过的可能，难以保证全部产品无菌。微波灭菌曾有作者庞淳在文献“西南师范大学学报，1986，2期”报道在针剂安瓿灭菌中进行应用，但文献未提供乳剂药液采用微波灭菌的方法，至今，在前列地尔注射液灭菌方面未见有关灭菌的应用文献或专利报道。控制前列地尔脂肪乳剂中的前列腺素E1(PGE1)及其相关物质前列腺素A1含量是质量标准中重要部分，以往前列腺素E1的含量测定，一般采用紫外分光光度法和高效液相法，紫外分光光度法主要采用将PGE1碱化转变为PGB1后在紫外278nm波长处进行测定，由于不能区分PGE与PGA、PGB，已很少采用。高效液相法采用较多，一般采用柱后碱化衍生将PGE转化为PGB，在278nm波长进行测定或者将PGE甲脂化上机测定，也有采用PGE未端吸收方法，在205nm、214nm直接进行测定。前列地尔脂肪乳剂中由于含有多种与前列腺素结构类似的磷脂及脂肪酸，破乳困难，测定干扰较大，一直是该制剂质量标准测定难点。中国国家药品监督管理局(SFDA)公布的前列地尔注射液国家标准(WS1-(X-041)-2002Z)中，PGE1含量测定方法是采用固相萃取，然后经液相色谱仪安置长达10m的柱后衍生管转化为PGB1后进行含量测定，该方法安置的柱后衍生管增加液相色谱仪泵负担，需两台液相泵，强碱液易损坏仪器，损耗较大，不易控制。采用该方法中固相萃取制备的样品通常是混浊的，破乳不完全，易损害层析柱，经前处理的样品供试液定量不准确，回收率低，重现性不好，导致测定不够准确。所使用的衍生管及固相萃取柱是非标设备，价格高昂，而固相萃取柱是一次性的，市场较少提供，衍生反应管在使用几次后就被腐蚀掉，浪费较大。前列地尔脂肪乳剂测定的关键是解决破乳问题，而采用一般化学方法破乳，很难达到测定要求。微波灭菌是近年发展起来的一种灭菌新方法，在对液体药物灭菌中取得显著效果，但在注射液中目前没有实际应用。微波灭菌主要利用微波照射，使微生物细胞受到强烈微波幅射，同时使物体温度急剧升高，导致微生物死亡，这主要依靠热效应和生物效应进行灭菌，该方法较适合对含水液体的灭菌。微波灭菌针对不同的介质溶液，达到灭菌的条件存在差别，前列地尔脂肪的注射液由于是乳剂，具有水包油微球结构，吸收微波能量完全不同于一般水溶液，升温和灭菌过程变化也将不同，它对微波辐射有一定耐受限度，当超过这个限度时，乳剂结构会遭到破坏，造成飘油、分层等现象发生。另一方面，前列地尔脂肪主药在微波辐射升温，时间超过限度时，也会发生降解。因此，需要研究开发前列地尔脂肪乳注射微波灭菌方法。
技术实现思路
本专利技术是为了解决目前已知的灭菌方法不适合前列地尔注射液这一技术问题而开发的，本专利技术通过试验研究提供了一种前列地尔脂肪乳注射微波灭菌方法，从根本上解决了上述技术问题。按照本专利技术的微波灭菌技术方法，采用915MHz或2450MHz频率微波设备，对放置在微波设备内的1ml和2ml安瓿前列地尔注射液进行微波照射，使安瓿温度升高至65-140℃，并维持10秒-5分钟，迅速冷却至室温。其中温度越高，所需要的时间越少。对应的温度时间关系是120-140℃需要10-30秒；110-120℃需要20-60秒；90-110℃需要60-180秒；65-90℃需要90-300秒。采用这种方法主药降解量小于5％或没有分解。本专利技术前列地尔脂肪乳剂的灭菌工艺如下采用915MHz或2450MHz频率微波灭菌设备，对已灌封的前列地尔脂肪乳剂安瓿灭菌10-300秒，即得。所述灭菌工艺是将已灌封的前列地尔脂肪乳剂，采用微波设备，以915MHz或2450MHz照射，使安瓿升温120-140℃，维持10-30秒。所述灭菌工艺是将已灌封的前列地尔脂肪乳剂，采用微波设备，以915MHz或2450MHz照射，使安瓿升温110-120℃，维持20-60秒。所述灭菌工艺是将已灌封的前列地尔脂肪乳剂，采用微波设备，以915MHz或2450MHz照射，使安瓿升温90-110℃，维持60-180秒。所述灭菌工艺是将已灌封的前列地尔脂肪乳剂，采用微波设备，以915MHz或2450MHz照射，使安瓿升温65-90℃，维持90-300秒；所述对前列地尔脂肪乳剂灭菌优选2450MHz频率微波设备。验证上述灭菌技术的灭菌效果的方法如下采用嗜热性杆菌芽孢接种前列地尔注射液中，数量为1×106，按照上述灭菌条件进行灭菌，取出后，按照中国药典2005版附录登载的微生物限度检查法和无菌检查法进行检查计数。安瓿温度的测定采用红外温度遥测仪。本专利技术的另一个目的是提供一种简单准确的前列地尔脂肪乳剂中主药PGE1和其有关物质PGA1的测定方法。本专利技术前列地尔脂肪乳剂的测定方法1、前处理步骤，将前列地尔脂肪乳剂冷冻干燥去乳化后，使其成为油状物；2、萃取步骤，采用有机溶媒萃取法，即向干燥的上述油状物中加入适量的有机溶媒进行萃取，弃油层，合并有机溶媒层，定容，为供试液；3、测定步骤，将上述供试液直接在高效液相色谱仪上进行测定，即在波长204nm～214nm处按照外标法或内标法或加校正因子的主成分自身对照法测定、计算前列地尔脂肪乳剂主药PGE1及杂质PGA1含量。所述萃取步骤中加入有机溶媒进行萃取还可以采用如下方法，定量加入甲醇或乙酸乙酯或丙酮或二氯甲烷溶解油状物，对提取液进行冷冻处理、过滤，将除掉其中大多数溶解度低的磷脂和脂肪酸类物质，续滤液为供试液。所述测定步骤在测定前列地尔脂肪乳剂主药PGE1时优选204nm为测定波长，测定前列地尔脂肪乳剂杂质PGA1时优选214nm为测定波长。所述对前列地尔脂肪乳剂定容时，定量加入内标物，本专利技术加入二甲氨基苯甲醛作为内标物或将PGE1作为PGA1的内标物。所述冷冻干燥去乳化时间在20～50小时之间，优选30～36小时。本专利技术的优点及效果如下前列地尔脂肪乳剂经过本专利技术提供的灭菌本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种前列地尔脂肪乳剂的灭菌工艺，其特征在于采用９１５ＭＨｚ或２４５０ＭＨｚ频率微波灭菌设备，对已灌封的前列地尔脂肪乳剂安瓿灭菌，灭菌过程是升温至６５－１４０℃，维持１０～３００秒。
【技术特征摘要】
CN 2004-12-21 200410100425.61.一种前列地尔脂肪乳剂的灭菌工艺，其特征在于采用915MHz或2450MHz频率微波灭菌设备，对已灌封的前列地尔脂肪乳剂安瓿灭菌，灭菌过程是升温至65-140℃，维持10～300秒。2.按照权利要求1所述的前列地尔脂肪乳剂的灭菌工艺，其特征在于所述前列地尔脂肪乳剂安瓿灭菌过程是升温至120-140℃，维持10-30秒；或升温至110-120℃，维持20-60秒；或升温至90-110℃，维持60-180秒；或升温至65-90℃，维持90-300秒。3.一种前列地尔脂肪乳剂的测定方法，其特征在于包括下述步骤(1)、前处理步骤，将前列地尔脂肪乳剂冷冻干燥去乳化后，使其成为油状物；(2)、萃取步骤，采用有机溶媒萃取法，即向干燥的上述油状物中加入适量有机溶媒进行萃取，弃油层，合并有机溶媒层，定容，为供试液；(3)、测定步骤，将上述供试液直接在高效液相色谱...
【专利技术属性】
技术研发人员：董英杰，
申请(专利权)人：董英杰，
类型：发明
国别省市：89[中国|沈阳]
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。