卵铁离子传递蛋白补铁剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及卵铁离子传递蛋白补铁剂，该补铁剂含有卵铁离子传递蛋白和三价铁离子形成的配合物，该配合物中卵铁离子传递蛋白与铁离子的摩尔比为１∶０．５－２，该配合物在４６５ｎｍ处有最大吸收峰。其制备方法：用生理盐水稀释禽蛋清；将三氯化铁溶液加入其中直至溶液中的卵铁离子传递蛋白完全饱和；然后经透析或超滤得到初品；经冷冻干燥后得到补铁剂原粉；进而制得各种制剂产品。这种补铁剂不仅制备方法简单，而且补铁效果明显、使用安全。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种铁离子传递蛋白，特别是卵铁离子传递蛋白，具体属于一种卵铁离子传递蛋白补铁剂及其制备方法和应用。
技术介绍
缺铁性贫血(IDA)是最常见的贫血，严重影响人类的健康。世界卫生组织2002年发布的严重影响人类健康的危险因素中第九位即为缺铁。IDA至今仍是世界各国普遍而严重的健康问题，改善铁营养状况，是世界也是我国迫切需要解决的公共卫生问题。铁营养强化剂的发展经历了三个阶段是以硫酸亚铁为代表的无机铁盐，即第一代强化剂产品。其副作用如恶心、呕吐、腹泻、金属异味等，甚至铁中毒等发生率为10％-15％，甚至大于70％，多数病人难以忍受。包括乳酸亚铁、葡萄糖酸亚铁等有机酸铁盐的第二代产品。但此类药物依赖胃酸释放铁，所以胃酸缺乏患者吸收较差，个体对于药物的生物利用度差异较大，同时亚铁盐性质较不稳定，生产或储存都很困难，可溶性铁化合物和食品中某些物质结合，引起食品颜色改变，易产生异味，导致补铁效果仍然不太理想。目前较多使用的是螯合物配体如EDTA，因为EDTA可以形成具有较高稳定性常数的铁螯合物。然而，尽管铁EDTA螯合物可以从肠顺利地吸收入血，但是，高的稳定性产生了与铁EDTA螯合物相关的问题，稳定性过高以至于机体不能轻易的将铁从配体上分离出来。而且，即使金属离子和EDTA配体能够分开，但由于EDTA是很强的螯合剂，该物质也会对身体造成损害。基于现有的技术，合成一种比现有无机铁化合物、具有更强生物活性的有机铁化合物是非常必要的。而且，合成一种结构稳定、配体对身体小或无副作用，同时能使铁轻易的释放，被组织和器官利用的化合物，更加能够满足广大临床的需求。据钱忠明主编的《铁代谢—基础与临床》(科学出版社2000年)，转铁蛋白(Transfeerins)是脊椎动物体内Fe3+的运输者，通过与细胞表面转铁蛋白受体的结合，将其携带的铁转入细胞内。转铁蛋白是一大类遗传相关、基本结构和生物功能相似的铁结合蛋白。典型转铁蛋白如在脊椎动物血浆、脊髓液、精液以及鸟类和哺乳动物的神经元中存在的血清转铁蛋白(Serotansferrin)，一般简称转铁蛋白(用Tf表示)，在禽蛋和爬虫蛋蛋白中存在的卵转铁蛋白(Ovotransferrin，用OTf表示，也称卵铁离子传递蛋白)，以及哺乳动物乳汁、胰腺液、泪液和白细胞胞浆内存在的乳转铁蛋白(Loactofeerin用LTf表示)。从铁的代谢来看，药物口服后，从胃肠道吸收，但在胃(批pH1.6～7)内滞留时间较短，故主要的吸收部位在小肠(十二指肠pH6.0～6.5，空肠pH6.5～7)。作为补铁剂释放的铁离子，如Fe2+必须通过细胞膜才能进入血浆，氧化成Fe3+，与去铁转铁蛋白(apotransgerrin，简称apo-Tf)结合形成铁转铁蛋白(transferrin)，这样，以apoTf为载体的Fe(血浆铁)被分别运送到骨髓以制造血红蛋白及到肝、脾、骨等储铁组织中与去铁铁蛋白结合称为铁蛋白而储存之。排列在肠壁上的细胞象一层混合溶剂(脂质和蛋白质)，细胞膜也是带电荷的大分子类脂体，蛋白质和粘多糖所组成，他们会吸收或排斥离子，使离子不易通过细胞膜。所以，按照药理学和生物化学的观点，Fe2+和Fe3+必须首先为肠溶液中的配体配合，生成具有适当稳定性的非解离形式而具有脂溶性才易透过黏膜进入血浆。进入血浆后，Fe2+和Fe3+必须被释放，Fe2+在血液pH7.4条件下氧化成Fe3+，才能与apoTf结合，根据这种观点，不管是Fe2+还是Fe3+，只要有适当的配体与之结合形成相当稳定的配合物，能有效防止或抑制Fe3+(在肠pH条件下)聚合，又能与apoTf顺利交换铁离子，作为补铁剂即铁代谢中的铁离子给予体的设想是合理可行的。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种卵铁离子传递蛋白补铁剂，这种补铁剂不仅使用安全、效果明显，而且补铁剂制备方法简单。本专利技术的目的是这样实现的一种卵铁离子传递蛋白补铁剂，其中含有卵铁离子传递蛋白和三价铁离子形成的配合物，该配合物中卵铁离子传递蛋白与铁离子的摩尔比为1∶0.5--2，最佳为1∶2；该配合物在465nm处有最大吸收峰(见图1、图2)。本专利技术卵铁离子传递蛋白补铁剂的制备方法，包括如下步骤(1)将禽蛋清经10-40MPa均质后，用1-6倍生理盐水稀释，均匀搅拌，用滤布过滤除去其中的不溶物；(2)配置质量比0.1％-5％铁盐溶液，在室温下滴定到上述稀释后的蛋清溶液中，均匀搅拌，直至蛋清溶液中的卵铁离子传递蛋白完全饱和； (3)待反应溶液澄清后，经透析或超滤，得到初品；(4)初品经冷冻干燥得到补铁剂原粉，并在4-8℃条件下密封保存，防止吸潮并隔绝氧气。所述的禽蛋清可以是鸡蛋清、鸭蛋清、鹅蛋清或鹌鹑蛋清。所述的铁盐，为三价铁盐，可以选自三氯化铁、硫酸铁或柠檬酸铁等。以本专利技术中的补铁剂原粉为主要活性成分，可以和医药上可接受的辅料配置成片剂、胶囊、口服颗粒剂等剂型。各种剂型的本专利技术补铁剂可通过本领域常规方法制备得到。本专利技术补铁制剂的原粉以及用原粉进一步制备的各种剂型，可用于制备治疗或辅助治疗铁缺乏症以及与缺铁有关的其它疾病药物中的应用。使用此制剂可以满足生命体对铁的需求。与现有技术相比，本专利技术补铁剂中含有Fe3+与卵铁离子传递蛋白合成的蛋白铁配合物，它结构稳定、直接对机体补充三价铁，无刺激性气味，具有在动物体内不沉淀和易吸收的特点，配体不仅对身体无副作用，而且能提高机体的免疫力，促进核酸和蛋白质的代谢，减少机体内氧化导致的副作用，对机体的细胞损伤具有保护作用。本专利技术补铁剂可用于治疗铁缺乏症，并可辅助治疗与铁有关的其它疾病如缺铁性贫血等。附图说明图1卵铁离子传递蛋白补铁剂的紫外吸收光谱，它在465nm处有最大吸收峰。图2Fe3+滴定卵铁离子传递蛋白的曲线，该配合物中铁离子与卵铁离子传递蛋白的摩尔比为2∶1。图3质量比1％三氯化铁溶液滴定鸡蛋清溶液的曲线。具体实施例方式以下结合实施例进一步说明本专利技术。实施例1卵铁离子传递蛋白补铁剂原粉的制备原料三氯化铁、鸡蛋清制备方法包括如下步骤(1)将鸡蛋清经30MPa均质后，用4倍生理盐水稀释，均匀搅拌，用滤布过滤除去其中的不溶物；(2)配置质量比1％三氯化铁溶液，在室温下将0.44ml三氯化铁溶液滴加到10ml上述稀释后的蛋清中，均匀搅拌，卵铁离子传递蛋白可使铁离子饱和(见图3)；(3)待反应溶液澄清后，用玻璃纸透析，得到初品，其中铁的含量0.465mg/ml；(4)初品放入冷冻干燥机干燥，制得补铁剂原粉。实施例2卵铁离子传递蛋白补铁剂动物试验(对贫血模型小鼠红细胞数量(RBC)及肝脏SOD、血清MDA活性的影响)实验材料昆明种小鼠，8周龄，体重(20.0±2.0)g，雌雄各半；本补铁剂含Fe量为3.1mg/ml；红细胞稀释液；超氧化物歧化酶(SOD)测试盒和丙二醛(MDA)测试盒。实验方法将50只小鼠随机分为阳性对照组(I)、阳性对照组(II)、实验组及阴性对照组等四组，每组雌雄对半。按0.04ml/kg体重计量进行皮下注射2％苯肼，小鼠活动正常无死亡，从而建立小鼠贫血模型。分组、灌服方法及剂量，见表1。注射2d后测定小鼠红细胞含量。10天后，检测了小鼠肝脏SOD和血清MDA的活性。各组上述指标的变化如下(见表2、表3)表1、小鼠本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种卵铁离子传递蛋白补铁剂，特征在于，其中含有卵铁离子传递蛋白和三价铁离子形成的配合物。

【技术特征摘要】
1.一种卵铁离子传递蛋白补铁剂，特征在于，其中含有卵铁离子传递蛋白和三价铁离子形成的配合物。2.如权利要求1的补铁剂，特征在于，所述的配合物中卵铁离子传递蛋白与铁离子的摩尔比为1∶0.5-2。3.如权利要求1的补铁剂的制备方法，包括如下步骤(1)将禽蛋清经10-40MPa均质后，用1-6倍生理盐水稀释，均匀搅拌，用滤布过滤除去其中的不溶物；(2)配置质量比0.1％-5％铁盐溶液，在室温下滴定到上述稀释后的蛋清溶液中，均匀搅拌，直至蛋清溶液中的卵铁离子传递蛋白完全饱和；(3)待反应溶液澄清后，...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄登宇，赵艮贵，宗艳，杨斌盛，张立伟，宋强，任瑞霞，刘超，卢臣，
申请(专利权)人：山西大学，
类型：发明
国别省市：14[中国|山西]