全蚕粉中降血糖活性物质的分离方法技术

技术编号:588577 阅读:219 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术涉及一种全蚕粉中降血糖活性物质的分离方法。其分离步骤为首先将全蚕粉与浸提缓冲液按1∶1的比例混匀,置4~8℃环境下浸提、过滤、分离,进行全蚕粉降血糖有效成分的提取;然后将全蚕粉浸提液上离子交换柱层析,进行阳离子交换柱层析,并调整pH值;再洗脱、样品收集、浓缩与干燥。本发明专利技术保持了家蚕体内的原有活性物质,降血糖活性成分单一;产出量高,获得率为2.7%。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种活性物质的分离方法,特指一种全蚕粉中降血糖活性物质的分离方法
技术介绍
用家蚕制成的全蚕粉具有降血糖作用。如专利“含有蚕粉末为有效成分的降血糖剂及其制造方法(CN95115559.8)”,“含乳铁蛋白全蚕粉的生产方法(CN03115855.2)”,“一种全蚕粉保健食品制备方法(CN03116235.5)”,“桑蚕粉的制备方法及其应用(CN200410017227.3)”。但家蚕是真核生物,具有完整生命特征的有机体,用其制备的全蚕粉成分复杂,特别是蚕体内含有一些大分子物质如糖、脂等,对某些人群可能是过敏原;家蚕在饲养过程中有可能受到来自多方面的污染等有可能对人(特别是病人)造成损害。分离全蚕粉中降血糖活性物质,对全蚕粉的有效成分和药效学的检测指标提供规范科学的标准,有利于实现产品质量的有效控制等。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种全蚕粉中降血糖活性物质的分离方法,其保持了家蚕体内的原有活性物质,产出量高。实现上述目的的技术方案,其特征是1、全蚕粉降血糖有效成分的提取将全蚕粉与浸提缓冲液按1∶1的比例混匀,置4~8℃环境下浸提、过滤、分离等。2、上离子交换柱层析将全蚕粉浸提液上离子交换柱层析,进行阳离子交换柱或阴离子交换柱层析,并调整pH值大于3.0。3、洗脱分别用水和NH4OH洗脱。4、样品收集收集样品每管10ml,用测麦芽糖糖苷酶抑制剂活性的方法,检测并收集有葡萄糖苷酶抑制剂活性部分。5、浓缩、干燥将有葡萄糖苷酶抑制剂活性部分,进行超低温冷冻干燥,保存备用。本专利技术的优点(1)保持家蚕体内的原有生物活性物质整个全蚕粉的制备过程,都是在低温环境下完成的,有利于家蚕体内原有活性物质的保存。(2)降血糖活性成分单一通过离子交换柱层析,分离出的活性成分单一,降血糖效果上佳。(3)分离物产出率高使用本分离方法,最终得率可达2.7%。降血糖效果显著。具体实施例方式本专利技术的分离步骤如下1、全蚕粉降血糖有效成分的提取按1∶1的比例将全蚕粉与浸提缓冲液混匀,置4~8℃环境下浸提24小时;然后,过滤、分离浸提液。2、上离子交换柱层析将全蚕粉浸提液上离子交换柱层析,进行阳离子交换柱柱层析,并调整pH值大于3.0。3、洗脱分别用水和NH4OH洗脱3-4次。4、样品收集收集样品每管10ml,用测麦芽糖糖苷酶抑制剂活性的方法,检测并收集有葡萄糖苷酶抑制剂活性部分。5、浓缩、干燥将有葡萄糖苷酶抑制剂活性部分,进行超低温冷冻干燥,保存备用。将上述分离的降血糖有效成分溶于水,进行实验小鼠的罐胃实验,服用该分离物有效成分0.045mg/天·克体重剂量,30天后空腹和餐后2小时的血糖值分别比模型对照组降低25%和16%;服用相同剂量的“拜糖平”,30天后空腹和餐后2小时的血糖值分别比模型对照组降低31%和18%。而添食15mg/天·克体重剂量的全蚕粉,30天后实验鼠空腹和餐后2小时的血糖值分别降低了18.81%和11.07%。总之,全蚕粉的使用剂量为该分离有效成分的330倍,而降血糖效果仅为分离有效成分的70%-75%。当全蚕粉与浸提缓冲液在4~8℃环境下浸提时间低于12小时,最终分离物的得率不足1%,降血糖效果为浸提24小时的78.6%,效果明显降低。但当浸提时间超过24小时,最终分离物的得率及其降血糖效果,与浸提24小时相比较没有显著差异。综上所述,本专利技术的制备工艺流程全蚕粉——降血糖有效成分的提取——上离子交换柱层析——洗脱——样品收集——浓缩干燥。本文档来自技高网...

【技术保护点】
全蚕粉中降血糖活性物质的分离方法,其特征是:    (1)全蚕粉降血糖有效成分的提取:将全蚕粉与浸提缓冲液按1∶1的比例混匀,置4~8℃环境下浸提、过滤、分离;    (2)上离子交换柱层析:将全蚕粉浸提液上离子交换柱层析,进行阳离子交换柱层析,并调整pH值大于3.0;    (3)洗脱:分别用水和NH↓[4]OH洗脱;    (4)样品收集:收集样品每管10ml,用测麦芽糖糖苷酶抑制剂活性的方法,检测并收集有葡萄糖苷酶抑制剂活性部分;    (5)浓缩、干燥:将有葡萄糖苷酶抑制剂活性部分,进行超低温冷冻干燥,保存备用。

【技术特征摘要】
1.全蚕粉中降血糖活性物质的分离方法,其特征是(1)全蚕粉降血糖有效成分的提取将全蚕粉与浸提缓冲液按1∶1的比例混匀,置4~8℃环境下浸提、过滤、分离;(2)上离子交换柱层析将全蚕粉浸提液上离子交换柱层析,进行阳离子交换柱层析,并调整p...

【专利技术属性】
技术研发人员:桂仲争傅志强侯成香
申请(专利权)人:江苏科技大学
类型:发明
国别省市:32[中国|江苏]

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