作为免疫疾病治疗剂的可溶性淋巴毒素-β受体和抗淋巴毒素受体及配体的抗体制造技术

本发明专利技术涉及包括“淋巴毒素－β受体阻滞剂”的组合物和方法，其阻碍淋巴毒素－β受体的信号传导。淋巴毒素－β受体的阻滞剂用于治疗淋巴细胞介导的免疫疾病，特别是阻碍Ｔｈ１细胞介导的免疫应答。本发明专利技术涉及淋巴毒素－β受体胞外结构域的可溶形式，这一结构域可作为淋巴毒素－β受体的阻滞剂。本发明专利技术也涉及抗淋巴毒素－β受体或其配体表面淋巴毒素的抗体的应用，它可作为淋巴毒素－β受体的阻滞剂。本发明专利技术还提供了选择可溶性受体、抗体和其它阻碍ＬＴ－β受体信号传导的试剂的一种新的筛选方法。（*该技术在2016年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及包括“淋巴毒素-β受体阻滞剂”的组合物和方法，其阻碍淋巴毒素-β受体的信号传导。淋巴毒素-β受体的阻滞剂用于治疗淋巴细胞介导的免疫疾病，特别是阻碍Th1细胞介导的免疫应答。本专利技术涉及淋巴毒素-β受体胞外结构域的可溶形式，这一结构域可作为淋巴毒素-β受体的阻滞剂。本专利技术也涉及抗淋巴毒素-β受体或其配体表面淋巴毒素的抗体的应用，它可作为淋巴毒素-β受体的阻滞剂。本专利技术还提供了选择可溶性受体、抗体和其它阻碍LT-β受体信号传导的试剂的一种新的筛选方法。当一个免疫攻击开始时所释放的细胞因子的类型可能影响接下来的选择活化哪些免疫效应途径。免疫效应细胞机制的选择由CD4-阳性的辅助性T淋巴细胞(辅助性T细胞或Th细胞)来决定。Th细胞与抗原呈递细胞(APC)相互作用，抗原呈递细胞在其表面展示与MHC II类分子结合的被加工的外源抗原的肽段。当Th细胞识别展现在适当的APC细胞表面的外源抗原的特殊表位时，它们就被活化，表达一种特异受体。接着活化的Th细胞分泌细胞因子(淋巴因子)，这些因子激活相应的免疫效应机制。Th细胞能够活化各种各样的效应机制，包括杀伤性T细胞的活化、B细胞抗体的产生和巨噬细胞的活化。效应机制的选择主要由活化了的Th细胞所产生的细胞因子决定。根据Th细胞的细胞因子分泌类型可将其分为三个亚类(Fitch等，Ann.Rev.Immunol.，11，pp.29-48(1993))，称为Th0、Th1和Th2。在小鼠中，非激活的“天然”辅助性T细胞产生IL-2.短期的刺激导致产生Th0前体细胞，它产生的细胞因子范围很广，包括IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-5和IL-10.慢性刺激可使Th0细胞转变为Th1或Th2细胞类型，此时细胞因子的表达类型也改变了。一些细胞因子Th1和Th2细胞都释放(例如，IL-3、GM-CSF和TNF)。另一些细胞因子只由一种Th细胞亚类制造。辅助性T细胞亚类的专一性效应最初是在小鼠中被认识的。在人类中也存在辅助性T细胞的类似分类(Romagnani等，Ann.Rev.Immunol.，12，pp.227-57(1994))。Th1细胞产生LT-α、IL-2和IFN-γ。在人类中，细胞因子分泌的Th1类型通常是与细胞免疫和抵抗感染相联系的。Th1细胞因子倾向于激活巨噬细胞和某些炎症反应，例如IV类“迟发型”超敏反应(见下)。Th1细胞因子在组织移植和器官移植的细胞排斥中起重要作用。Th2细胞产生细胞因子IL-4、IL-5、IL-6和IL-10。Th2细胞因子提高噬酸性粒细胞和肥大细胞的产生和促进B细胞的完全扩张和成熟(Howard等，“T细胞产生的细胞因子和它们的受体”，基础免疫学(Fundamental Immunology)，第三版，Raven Press，纽约(1993))。Th2细胞因子也可以加强抗体的产生，包括与变态反应相关的IgE抗体和抗移植的抗体。Th2细胞也可以参与对持续性抗原的免疫抑制和耐受。Th1和Th2相关的细胞因子在特定的超敏反应-接触以前遇到过的抗原而引发的不恰当的或不均衡的免疫应答-中起作用。有四种已识别的超敏反应类型(Roitt等，免疫学(Immunology)，pp.19.1-22.12(Mosby-Year Book Europe Ltd.，3d ed.1993))。I型“速发性超敏反应”包括变应原介导的Th2细胞活化和Th2细胞因子释放。Th2细胞因子IL-4刺激B细胞经过同种型转换产生IgE，激活肥大细胞产生急性炎症反应，例如导致湿疹、哮喘和鼻炎。II和III型超敏反应是由抗细胞表面或特异性组织抗原(II型)或可溶性血清抗原(III型)的IgG和IgM抗体引发的。这些类型的超敏反应认为不是由Th细胞介导的。IV型“迟发型”超敏反应(DTH)是Th1细胞介导的。DTH反应发展要花12个小时以上，因为它在小鼠中的转移是通过转移Th1细胞而不能只用血清，所以又被称为是“细胞介导的”。IV型DTH反应通常又被分为三类接触型、结核菌素型和肉芽肿型超敏反应。许多能引起疾病的细胞介导的反应是可以通过从染病的小鼠转移淋巴细胞到健康小鼠身上而诱发的(例如，胰岛素依赖性糖尿病和实验自身免疫脑炎)。这一特征将IV型DTH与其他三种类型的超敏反应区别开，其他三种类型是主要由抗体引起的体液免疫应答，可以经无细胞血清转移而得。辅助性T细胞也参与新生免疫球蛋白同种型转换的调节。不同的Th亚类可以影响免疫攻击产生的给定的同种型免疫球蛋白的相对比例。例如，Th2细胞因子IL-4可以将活化的B细胞转变为IgG1同种型而抑制其他的同种型。正如上面所讨论的，在I型超敏反应中IL-4也激活IgE的过量产生。Th2细胞因子IL-5诱导IgA同种型。这些Th2细胞因子对同种型转换的影响由Th1细胞产生的IFN-γ来抗衡。Th1和Th2细胞分泌的不同类型的细胞因子介导不同免疫效应机制。激活细胞介导的或体液效应机制的转变通过Th1和Th2细胞之间的交叉抑制而致敏Th1细胞产生的IFN-γ阻碍Th2细胞的增殖，而Th2细胞分泌的IL-10减少Th1细胞分泌细胞因子。基于细胞因子与其靶分子的相对亲和性，Th1和Th2的负调节循环可以扩增Th1和Th2细胞因子之间的很小的浓度差别造成的影响。一个被扩增了的Th1或Th2细胞因子信号可以在Th1和Th2细胞因子的相对浓度发生小变化的基础上开启细胞介导的或体液的效应机制之间的转变。这种通过调节Th1和Th2细胞因子的相对浓度而控制该转变的能力对于治疗各种导致免疫紊乱和疾病的Th1和Th2细胞依赖性的免疫反应中的不平衡将很有帮助。病理性Th1反应与大量器官特异性的和系统的自身免疫情况、慢性炎症和迟发型超敏反应有关。正如上面讨论的、Th1反应也与细胞反应有关，导致被移植的组织和器官的排斥反应。目前，对各种基于Th1细胞的免疫不良状态的治疗通常采用免疫调节剂和免疫抑制剂，以及各种机理不明的药物(例如，金或青霉胺)。现在常用的三种免疫抑制剂是类固醇、环孢菌素和硫唑嘌呤。类固醇是多向性的抗炎症试剂，它能抑制活化的巨噬细胞和在逆转Th1细胞因子IFN-γ许多效应的途径中抑制抗原呈递细胞的活性。环孢菌素-一种强免疫抑制剂-抑制细胞因子的产生和减少淋巴细胞在活化过程中IL-2受体的表达。硫唑嘌呤是一种抗增殖剂，它抑制DNA的合成。这些非特异性的免疫抑制剂通常需要大剂量使用，这就提高了它们的毒性(例如，肾毒性和肝毒性)并引起有害的副作用，因此不适合用于长期的治疗。为了决用非特异性免疫抑制剂进行传统治疗所引起的问题，目前许多治疗策略的目标是选择免疫系统的某些方面进行抑制或活化。一个特别具有吸引力的方向是控制Th1和Th2细胞因子之间的平衡，从而操纵细胞介导的和体液的效应机制之间的平衡。为了完成细胞介导的和体液的效应机制之间的转移，能够调节可以改变Th1和Th2细胞亚类相对活性的分子的活性是很有帮助的。这样的分子的候选者包括细胞因子和它们的受体。最近的资料表明，LT-α、IL-12，IFN-α和IFN-γ促进Th1反应的发展，而IL-1和IL-4极化朝向Th2效应机制的反应(Romagnani等，Ann.Rev.Immunol.，12，pp.本文档来自技高网...

【技术保护点】
淋巴毒素－β受体阻滞剂用于制备治疗Ｔｈ１细胞介导的免疫应答的药物的用途，其中所述淋巴毒素－β受体阻滞剂选自：与一个或多个异源蛋白结构域融合的可溶性淋巴毒素－β受体、含有选自ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１的氨基酸功能性序列的可溶性淋巴毒素－β受体和针对淋巴毒素－β受体的抗体。

【技术特征摘要】
US 1995-7-21 08/505,6061.淋巴毒素-β受体阻滞剂用于制备治疗Th1细胞介导的免疫应答的药物的用途，其中所述淋巴毒素-β受体阻滞剂选自与一个或多个异源蛋白结构域融合的可溶性淋巴毒素-β受体、含有选自SEQ.ID.NO.1的氨基酸功能性序列的可溶性淋巴毒素-β受体和针对淋巴毒素-β受体的抗体。2.权利要求1的用途，其中可溶性淋巴毒素-β受体含有一个能选择性结合表面淋巴毒素配体的配体结合结构域，所述配体含有至少一个淋巴毒素β亚基。3.权利要求1的用途，其中可溶性淋巴毒素-β受体包含淋巴毒素-β受体的胞外结构域。4.权利要求1的用途，其中异源蛋白结构域选自免疫球蛋白、血清白蛋白、脂蛋白、载脂蛋白和转铁蛋白。5.根据权利要求1-4中任一项的用途，其中可溶性淋巴毒素-β受体是人淋巴毒素-β受体。6.权利要求1的用途，其中抗体是重组抗体。7.权利要求1的用途，其中抗体是人源化抗体。8.权利要求1的用途，其中抗体是单克隆抗体。9.根据权利要求8的用途，其中单克隆抗体含有由杂交瘤细胞系BD.A8.AB9，ATCC保藏号HB11798，产生的抗人淋巴毒素-β受体的单克隆抗体BDA8。10.权利要求1-9中任一项的用途，其中Th1-细胞介导的免疫应答参与动物中IV型迟发型超敏反应。11.权利要求13的用途，其中IV型迟发型超敏反应是结核菌素型超敏反应或肉芽肿反应。12.权利要求1-9中任一项的用途，其中Th1细胞介导的免疫应答参与动物接受组织移植后体内组织的细胞排斥反应。13.权利要求1-9中任一项的用途，其中Th1细胞介导的免疫应答参与动物接受器官移植后体内的组织的细胞排斥反应。14.权利要求1-9中任一项的用途，其中Th1细胞介导的免疫应答参与动物体内的自...

【专利技术属性】
技术研发人员：JL布朗宁格，CD本扎明，PS霍克曼，
申请(专利权)人：拜奥根IDEC马萨诸塞公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]