青蒿琥酯在制备抗肝纤维化制剂中的应用制造技术

本发明专利技术涉及青蒿琥酯在制备抗肝纤维化制剂中的应用，属于有机有效成分是内酯类的医药配制品的用途。本发明专利技术提供的青蒿琥酯对不同原因的肝纤维化有防治作用，并减轻过氧化损伤，无肝毒性；青蒿琥酯能抑制肝星状细胞增殖、阻止其由Ｇ↓［０］／Ｇ↓［１］向Ｓ期进展，诱导活化的肝星状细胞凋亡，降低胶原分泌和脂质过氧化作用，且无细胞毒活性，可用于防治肝纤维化，抑制肝纤维化－肝硬化－肝癌的病理过程。本发明专利技术为发现新的原理和药物作用靶点提供重要依据，为青蒿素类药物的新用途开发提供依据。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及有机有效成分是内酯类的医药配制品的用途，具体是一种青蒿琥酯在制备抗肝纤维化制剂中的应用。
技术介绍
肝纤维化存在于一切慢性肝病的发病过程中，是慢性肝病的特征性变化，其结局是肝硬化和肝癌，严重影响民众健康。据统计，慢性乙型、丙型病毒性肝炎患者中1/3可转化为肝硬化，后者的1/3可转化为肝癌；酒精性肝病、血吸虫病以及其它原因的慢性肝病使肝纤维化的发生率增高。一般认为肝纤维化是可以逆转的，而肝硬化则否。因而阻断了肝纤维化向肝硬化及肝癌的发病过程，但迄今为止未见确有疗效的抗肝纤维，化药物。肝星状细胞(hepatic stellate cell，HSC)是肝脏细胞外基质的主要来源，肝脏的炎症、损伤等各种因素均可使HSC活化，HSC的活化是肝纤维化的核心。抑制HSC的活化即可使细胞外基质生成减少，诱导活化的HSC凋亡等于消除了细胞外基质的来源，这就从不同环节阻断了肝纤维化的发生。1970年代我国科学家首次从黄花蒿(Artemisia annua L.)中分离鉴定出抗疟有效成分青蒿素，为一种新型的倍半萜内酯。其后人工合成了蒿甲醚、二氢青蒿素、青蒿琥酯等衍生物。青蒿琥酯(artesunate)是青蒿素的水溶性衍生物，蒿甲醚是青蒿素的脂溶性衍生物，双氢青蒿素是青蒿素、青蒿琥酯、蒿甲醚的活性代谢产物，已作为我国开发的抗疟新药。青蒿琥酯对红细胞内期滋养体有杀灭作用，作用机制与青蒿素相同，即可能是血红素或Fe2+催化青蒿琥酯(青蒿素)形成自由基破坏疟原虫表膜和线粒体结构，导致疟原虫死亡，作为起效快、疗效确切、副作用小的新型抗疟药，青蒿素用于治疗间日疟和恶性疟。青蒿琥酯抗疟效果强于青蒿素，近期复发率比青蒿素低，主要用于脑型疟和各种危重疟疾的抢救，并可用于预防血吸虫病。中国专利85 1 00781 A公开了“抗疟药物青蒿酯及其制备方法”，其是由二氢青蒿素与琥珀酸酐在氯仿溶液中，在弱碱性物质的催化下，经酯化反应生成。其抗疟活性是青蒿素的5倍，可制成水溶性制剂。《中国药理学报》1987；8(1)72-76以“青蒿素丁二酸酯钠对小鼠脾细胞[3H]尿核苷掺入及细胞膜的作用”为题，报道了青蒿琥酯能抑制小鼠纤维母细胞的[3H]UR渗入。《医学研究通讯》1998；27(2)417-8报道了“青蒿素对实验性矽肺预防、病后治疗观察”，介绍了蒿甲醚50mg腹腔注射或灌胃对实验性矽肺有预防及病后早期治疗作用，能使肺重、肺胶原、肺组织矽含量显著降低。《重庆医科大学学报》1998；23(3)260-262“青蒿素局部治疗增殖性瘢痕临床观测”，介绍了青蒿素局部用于烧伤后增生性瘢痕，治疗后瘢痕厚度及硬度显著降低。《Int J Oncol》(国际肿瘤学杂志)2001，18(4)767-73介绍了青蒿素及其衍生物对白血病、结肠癌等多种肿瘤细胞株有抑制作用。《Blood Cells Mol Dis》(血液细胞分子疾病)2002，28(2)160-168报告了青蒿琥酯诱导肝癌细胞HepG2株凋亡。青蒿琥酯，化学名为二氢青蒿素-12-α-琥珀酸单酯，分子式为C19O8H28，分子量是384.4 3，结构式见图1，是一种新型的具有倍半萜内酯结构的抗疟药青蒿素的衍生物，分子内存在过氧基团。青蒿琥酯为无色结晶或白色结晶性粉末，无臭，几乎无味。略溶于水，易溶于乙醇、丙酮、氯仿。熔点131℃～136℃，比旋度+10～+14，酸碱度pH 3.5～5.5。青蒿琥酯的结构式
技术实现思路
本专利技术就是为了解决当今临床上治疗肝纤维化药物贫乏和治疗效果不理想的问题，而提供一种用于防治或逆转肝纤维化的青蒿琥酯在制备抗肝纤维化制剂中的应用。本专利技术的医药新用途是1.青蒿琥酯在制备抗肝纤维化制剂中的应用。2.青蒿琥酯在制备对四氯化碳复合因素所致肝纤维化防治作用制剂中的应用。3.青蒿琥酯在制备对牛血清白蛋白免疫性肝纤维化的防治作用制剂中的应。4.青蒿琥酯在制备抑制大鼠肝星状细胞增殖、调节肝星状细胞周期和诱导肝星状细胞凋亡制剂中的应用。本专利技术证实了青蒿琥酯有抗肝纤维化的作用并初步探讨了其作用机制。研究结果对肝纤维化的防治有重要价值。青蒿琥酯的制备青蒿琥酯是以二氢青蒿素和琥珀酸酐为原料，在氯仿溶剂中，在弱碱性介质三乙胺或碳酸氢钠存在下，酯化反应而成。反应路线参见图10。使用方法青蒿琥酯用于防治或逆转实验性肝纤维化，采用口服给药。对四氯化碳复合因素所致肝纤维化，使用28.8mg青蒿琥酯/kg体重，每日一次，用药44天；对牛血清白蛋白免疫性肝纤维化，使用18.75mg青蒿琥酯/kg体重，每日一次，用药6周；毒副作用青蒿琥酯及其制剂对肝功能无不良影响；并对肝星状细胞无细胞毒作用。药理作用青蒿琥酯能有效的降低模型大鼠的脂质过氧化物水平，在明显抑制肝星状细胞增殖、阻止肝星状细胞由G0/G1期进入S期、诱导活化的肝星状细胞凋亡的同时，显著降低肝星状细胞分泌羟脯氨酸水平及脂质过氧化物含量。一.青蒿琥酯对四氯化碳复合因素所致肝纤维化的防治作用的体内实验采用Wistar大鼠，清洁级，雌雄各半，饲养于清洁级动物室。青蒿琥酯原料药由桂林南药股份有限公司提供。秋水仙碱为Sigma公司产品。羟脯氨酸(hydroxyproline，Hyp)(AR，上海康达氨基酸厂，批号920506)。其它试剂为市售分析纯试剂。参照韩德五的方法(“葫芦素B对实验型肝炎与肝硬变的防治作用”《中华医学杂志》，1979；59(4)206-9)，以四氯化碳复合因素造模。分别对雄性和雌性大鼠按体重随机区组法分组。设大、中、小剂量的青蒿琥酯用药组(5.75mmol·L-1，1.92mmol·L-1，0.64mmol·L-1)，同时设正常对照，模型对照(灌胃等体积的蒸馏水)，秋水仙碱对照组。预防性用药。肝组织Hyp检测按Jamall等的方法(Jamall IS，Finelli VN，QueHee SS.A simple method to determine nanogram levels of 4-hydroxyprolinein biological tissues.Analytical Biochemistry，1981；112(1)70～5)。常规制备肝组织石蜡切片，HE染色、胶原纤维染色(Masson结缔组织三合染色)。纤维化程度判别，根据Scheuer分期(Scheuer PJ.Classification of chronicviral hepatitisa need for reassessment.J Hepatol，1991；13(3)372～4)。脂质过氧化物(lipid peroxide，LPO)的测定方法(Yagi K.A simplefluorometric assay for lipoperoxide in blood plasma.Biochem Med，1976，15，212～6)。统计分析计量资料用单因素方差分析，方差齐性时用Tukey检验，方差不齐时用Tamhane’s检验；等级资料用Ridit分析。病理形态学观察模型对照组鼠肝汇管区纤维结缔组织增生，并向肝小叶内延伸。把肝小叶分隔成许多大小不等的肝细胞岛，部分形成假小叶，增生的纤维组织内见炎症细胞浸润，肝细胞胞浆疏松、气球样变及脂肪样变；青蒿琥酯用药组肝汇本文档来自技高网...

【技术保护点】
青蒿琥酯在制备抗肝纤维化制剂中的应用。

【技术特征摘要】
1.青蒿琥酯在制备抗肝纤维化制剂中的应用。2.青蒿琥酯在制备对四氯化碳复合因素所致肝纤维化防治作用制剂中的应用。3.青蒿琥酯在制备对牛血清...

【专利技术属性】
技术研发人员：方步武，
申请(专利权)人：方步武，
类型：发明
国别省市：12[中国|天津]