本发明专利技术涉及ＩＬ－１５多核苷酸、多肽或能结合特异性地识别ＩＬ－１５多肽的抗体，或能特异性地结合ＩＬ－１５受体α链的化合物在制备用于刺激毛发生长或用于治疗、预防和／或改善脱发的组合物中的用途。此外，本发明专利技术包括转基因的非人动物，其包含ＩＬ－１５多核苷酸。本发明专利技术还涉及刺激非人动物中毛发生长的方法和生产动物毛发的方法。最后，本发明专利技术涉及治疗、预防和／或改善遭受脱发的受试者的方法。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】本专利技术涉及IL-15多核苷酸、多肽或能结合特异性地识别IL-15多肽的抗体，或能特异性地结合IL-15受体α链的化合物在制备用于刺激毛发生长或用于治疗、预防和/或改善脱发的组合物中的用途。此外，本专利技术包括转基因的非人动物，其包含IL-15多核苷酸。本专利技术还涉及刺激非人动物中毛发生长的方法和生产动物毛发的方法。最后，本专利技术涉及治疗、预防和/或改善遭受脱发的受试者的方法。从医学和化妆的观点看，脱发是人类的严重问题。脱发在人类中具有多种原因，包括先天的或获得的疾病状况，和由医学治疗(例如化疗)或环境影响造成的这样的状况。到目前为止，在人类中毛发紊乱的最常见的原因是毛发生长控制缺陷，如斑秃或雄激素性脱发。除了人类外，脱发或缓慢的毛发生长是各种动物的问题，特别是用于生产毛发的那些动物，例如羊、马、lama或骆驼。通常通过剃剪，从那些动物得到毛发。动物已经被剃剪后，在诱导毛发重新生长和可以再次剃剪动物之前，存在一定的时间间隙。所述时间间隙是使用动物生产毛发的重要的限速步骤。毛发生长由存在于皮肤中的毛囊控制。毛囊是复杂的圆柱状结构，由不同的上皮细胞层组成。外室是根鞘。该室连接表皮，且在这里发生细胞增殖(29)。毛囊是高度动态的，在整个生命中，它们以生长(生长期)、退化(退化期)和静止(毛发生长终期)的周期重复地重新塑造自身。在退化期阶段，发生增殖，且在毛囊的较低部分，可以观察到大量的细胞凋亡(30)。已经提示，几种细胞因子，其中有TNF-α、IL-1-β和IFN-γ，在退化期的过程中，在控制和促进毛球角质细胞的细胞凋亡中起作用(33)。显示IL-15能干扰环磷酰胺-诱导的毛囊角质细胞中的细胞凋亡(34)。IL-15是一种多效性的细胞因子，它对于免疫细胞稳态以及外周免疫功能是重要的(1-4)。许多体外和体内研究已经证实了IL-15在NK细胞谱系的发育和存活中的关键作用(5，6)。在小鼠中的其它研究已经表明，IL-15是记忆CD8+(而不是CD4+T)细胞以及某些上皮内淋巴细胞亚群的选择性生长因子(7-10)。因此，IL-15-/-和IL-15Rα-/-小鼠是淋巴细胞减少的(lymphopenic)，且特异性地缺少NK细胞、NKT细胞、肠衍生的上皮内淋巴细胞亚群以及活化的CD8+T细胞(5，11)。在MHC I类启动子控制下的IL-15的普遍存在的转基因超表达，会导致NK和记忆表型CD8+T细胞的初步扩增，且然后导致致命的白血病的发展，从而造成这些突变体小鼠的过早死亡。因此，难以研究IL-15的长期体内作用(6)。而且，IL-15参与肌细胞的合成代谢途径，作为肥大细胞的生长因子起作用，并作为T细胞、B细胞和成纤维细胞中的细胞凋亡的一般抑制剂起作用(12-15)。这些研究与IL-15在多种细胞类型和组织中的广泛表达相一致。因此，几个报道表明在许多组织和细胞类型中存在丰富的IL-15 mRNA转录物(3，16)。但是，IL-15表达受到在转录、翻译和胞内运输水平的紧密控制(17-19)。具体地，IL-15蛋白受到几种控制元件的转录后调节，例如，在5′UTR中的12AUG(其能阻止翻译)、2种不足的信号肽和在前体蛋白C-末端的负调节剂。因而，对IL-15的体内功能的研究受到了极大的消弱。在皮肤内，IL-15的主要细胞来源是角质细胞。角质细胞表达IL-15mRNA，但是仅仅在刺激(例如紫外线辐射或受伤)后和在牛皮癣性病变中产生IL-15蛋白(15，20，21)。还已经在新分离的人郎格汉斯细胞(LC)中检测了IL-15转录物。甚至报道IL-15参与人LC从单核细胞的体外发生。IL-15是一种14-15kDa蛋白，其在许多组织和广泛的细胞类型中是在mRNA水平表达的，包括活化的单核细胞、树突细胞、破骨细胞和成纤维细胞(1，3)。异源三聚的IL-15受体(IL-15R)由IL-2Rβ-链和γ-链、以及独特的α-链(IL-15Rα)组成，后者负责向IL-15的高亲和力结合。尽管IL-2Rα主要在活化的T细胞上表达，但已经在多种组织和细胞中鉴别出了IL-15RαmRNA。如IL-2一样，IL-15Rαβγ复合物通过JAK1/3和STAT3/5途径传递信号(3，28)。已经将IL-15描述为对于CD8+记忆T细胞的增殖和维持是必需的，且在高剂量时，起pan T细胞和肥大细胞生长因子的作用(2，26，27)。但是，仍然不能得到用于促进毛发生长和用于治疗、预防和/或改善上文所述的疾病的有效方法，但是非常需要。因而，作为本专利技术的基础的技术问题必须视为，提供用于有效地促进毛发生长和用于治疗、预防和/或改善由疾病造成的或伴随疾病的脱发的方法。通过权利要求书表征的实施方案，解决了该技术问题。因此，本专利技术涉及下述物质在制备用于刺激毛发生长的组合物中的用途(i)多核苷酸，其包含(a)如SEQ ID NO1或3所示的核酸序列，(b)能编码SEQ ID NO2或4所示的氨基酸序列的核酸序列，(c)能编码SEQ ID NO2或4所示的氨基酸序列的核酸序列，该氨基酸序列具有修饰的信号肽、修饰的N-末端和/或修饰的C-末端，或(d)能在严格条件下与(a)-(c)中的任一项杂交的核酸序列；(ii)由(a)-(d)中的任一项定义的核酸编码的多肽；或(iii)化合物，其能结合特异性地识别在(ii)中定义的多肽的抗体，或其能特异性地结合IL-15受体α链。术语“多核苷酸”涉及能编码具有白细胞介素15(IL-15)的生物活性或抗原活性的多肽的多核苷酸。本领域已经描述了各种IL-15多肽的结构，且代表性的IL-15多肽显示在SEQ ID NO2(人IL-15，登记号BC018149；gi34783292)和SEQ ID NO4(小鼠IL-15，登记号BC023698；gi23271448)。本领域还报道了IL-15的几种生物功能，且已经在本文前面讨论。IL-15的基本生物活性是它特异性地结合在(对于小鼠IL-15Rα，登记号为BC022705，和对于人IL-15Rα登记号为AY316538，(2，Lodolce，Immunity 1998，9669-676))下保藏的IL-15受体α链的能力。其它很好地表征的生物活性包括它刺激NK-/NKT细胞和记忆T-细胞的能力(Flamand，J.Clin.Invest，1996，971373-81；Kv，Science 2000，288675-678)和它对淋巴样细胞或间充质细胞的增殖作用以及用细胞凋亡物质诱导后的细胞凋亡预防(14)。优选地，所述生物活性是刺激毛发生长和角质细胞，如所附实施例所证实的。基本的抗原活性是它被如Shinozcki，J.Clin.Invest，2002，109951-960公开的特异性的(即，非交叉反应性的)IL-15抗体特异性地识别的能力。这样的IL-15抗体也可以通过常规方法得到。优选地，抗体是单克隆抗体。通过本领域众所周知的和上面引用的文献详细描述的常规方法，可以测试这些活性。最优选地，本专利技术的多核苷酸具有如SEQ ID NO1(人IL-15)或SEQID NO3(小鼠IL-15)所示的核酸序列。优选地，IL-15多核苷酸也包括变体多核苷酸，其能在严格的杂交条件下与SEQ ID NO1或本文档来自技高网...
【技术保护点】
下述物质在制备用于刺激毛发生长的组合物中的用途： （ｉ）多核苷酸，其包含 （ａ）如ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１或３所示的核酸序列， （ｂ）能编码ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２或４所示的氨基酸序列的核酸序列， （ｃ）能编码ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２或４所示的氨基酸序列的核酸序列，该氨基酸序列具有修饰的信号肽、修饰的Ｎ－末端和／或修饰的Ｃ－末端，或 （ｄ）能在严格条件下与（ａ）－（ｃ）中的任一项杂交的核酸序列； （ｉｉ）由（ａ）－（ｃ）中的任一项定义的核酸编码的多肽；或 （ｉｉｉ）化合物，其能结合特异性地识别在（ｉｉ）中定义的多肽的抗体，或其能特异性地结合ＩＬ－１５受体α链。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】EP 2003-12-29 03029899.61.下述物质在制备用于刺激毛发生长的组合物中的用途(i)多核苷酸，其包含(a)如SEQ ID NO1或3所示的核酸序列，(b)能编码SEQ ID NO2或4所示的氨基酸序列的核酸序列，(c)能编码SEQ ID NO2或4所示的氨基酸序列的核酸序列，该氨基酸序列具有修饰的信号肽、修饰的N-末端和/或修饰的C-末端，或(d)能在严格条件下与(a)-(c)中的任一项杂交的核酸序列；(ii)由(a)-(c)中的任一项定义的核酸编码的多肽；或(iii)化合物，其能结合特异性地识别在(ii)中定义的多肽的抗体，或其能特异性地结合IL-15受体α链。2.权利要求1所定义的多核苷酸、多肽或化合物在制备用于治疗、预防和/或改善脱发的组合物中的用途。3.权利要求1或2的用途，其中所述组合物还包含第二种毛发生长刺激剂。4.权利要求3的用途，其中所述第二种毛发生长刺激剂选自羧酸的锌盐，皂苷类，三萜类，优选地齐墩果酸或熊果酸，山楂酸，南蛇藤醇，亚洲积雪草酸，5-[α]-还原酶的抑制剂，优选孕酮，1，4-甲基-4-氮杂类固醇，优选17-[β]-N，N-二乙基氨甲酰基-4-甲基-4-氮杂-5-[α]-雄烷-3-酮，雄激素受体拮抗剂，优选醋酸环丙氯地孕酮，米诺地尔(R)，azaelaic acid和其衍生物，环孢菌素，三碘甲腺原氨酸，二氮嗪，钾通道开放剂，优选cromakalin，苯妥英和其混合物，和雌激素的衍生物，优选戊酸雌二醇。5.权利要求1-4中的任一项的用途，其中所述组合物还包含药学上或化妆上可接受的载体。6.权利要求1-5中的任一项的用途，其中所述组合物是药物组合物。7.权利要求1-5中的任一项的用途，其中所述组合物是化妆品组合物。8.权利要求1-7中的任一项的用途，其中所述组合物配制成生发油、生发药组合物、洗发剂、粉剂、胶冻、护发素、软膏、美发乳、糊剂、发乳、发胶和/或毛发气雾剂...
【专利技术属性】
技术研发人员：S贝泽尔特，K洛泽尔，
申请(专利权)人：明斯特大学临床医学院，
类型：发明
国别省市：DE[德国]
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