龙胆苦苷在镇痛和关节炎药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及龙胆苦苷或含龙胆苦苷５０％以上的龙胆总苷在镇痛和关节炎药物中的新用途。关节炎是贫困、落后地区的常见病、多发病，临床表现有炎症和疼痛。龙胆苦苷可从秦艽或龙胆中提取的。本发明专利技术采用小鼠耳廓二甲苯致炎法，大鼠足跖清蛋白致炎法，以及大鼠腹股沟棉球肉芽肿方法观察龙胆苦苷的抗炎作用，结果可见，龙胆苦苷对二甲苯、清蛋白、棉球肉芽肿等非特异性炎症反应具有抑制作用，能抑制炎症早期的毛细血管扩张、通透性亢进引起的渗出与水肿，也能抑制炎症肉芽肿的形成。使用甩尾法、热板法和扭体法研究了龙胆苦苷对小鼠的镇痛作用。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及龙胆苦苷或含龙胆苦苷50％以上的龙胆总苷在镇痛和关节炎药物中的新用途。
技术介绍
关节炎是贫困、落后地区的常见病、多发病，特别在山区和农村。关节炎表现有炎症和疼痛，由于病因尚不清楚，西医无理想药物治疗，还会产生毒副作用。 龙胆苦苷可从秦艽或龙胆中提取，其结构式如结构图I所示。研究表明，龙胆总苷(含龙胆苦苷在50％以上)可用于制备促进胃肠消化功能药物(中国专利97108434.3)，龙胆苦苷可用于制备抑制乙型肝炎病毒药物(中国专利200410073488.7)，用于制备保肝利胆抗炎药物(中国专利03114558.2)。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供龙胆苦苷或含龙胆苦苷50％以上的龙胆总苷的新用途，即在制药中的新应用。本专利技术涉及龙胆苦苷或含龙胆苦苷50％以上的龙胆总苷作为制备治疗关节炎的药物中的应用。本专利技术涉及龙胆苦苷或含龙胆苦苷50％以上的龙胆总苷作为制备治疗镇痛药物中的应用，例如含龙胆苦苷60％、70％、80％、90％等。解决上述技术问题采用的技术方案是，从秦艽中制备出龙胆总苷(含龙胆苦苷约70％)，再精制成龙胆苦苷，二这用于镇痛和抗炎作用，可用于制备治疗关节炎的药物。龙胆苦苷的制备工艺如下取秦艽，用5-20倍量水煎煮3次，每次15分钟，合并煎煮液，离心取上清液；水煎液上D101大孔树脂柱，每克树脂上0.8mL药液，大孔树脂用2～6倍量的水洗脱，弃取水洗液，大孔树脂再用3～10倍30％的乙醇洗脱，回收洗脱液中的乙醇，减压抽干，得残留物，即龙胆总苷(含龙胆苦苷70％以上)，将龙胆总苷水溶解后再按上述方法上大孔树脂，30％乙醇洗脱，回收洗脱液后的残留物溶于2～5倍量的95％乙醇中，过滤，回收乙醇并抽干，再用95％乙醇溶解，再抽干，最后溶于浓乙醇中，放置，析出结晶，过滤，得龙胆苦苷纯品。有效成分用龙胆苦苷制备抑制乙型肝炎病毒的药物以常规药用制剂的形式来使用；所述的常规药物用制剂含作为活性成分在制剂中与药学上可接受的载体如适宜于胃肠内和胃肠外给药的有机或无机的固体或液体赋形剂混合，该药用制剂可以是固体形式如片剂、胶囊剂、散剂、丸剂、颗粒剂，也可以是液体形式如注射剂、乳剂等。上述制剂中可含有辅助物质、稳定剂、润湿剂和其它常用的添加剂，如乳糖、柠檬酸、酒石酸、硬脂酸镁、石膏粉、蔗糖、玉米淀粉、滑石粉、明胶、琼脂、果胶、花生油、橄榄油、可可脂、乙二醇、抗坏血酸、甘露醇等。上述的制剂可按照各种制剂常规的制备工艺制成。为更好地理解本专利技术的实质，下面将用龙胆苦苷的药理试验及结果来说明其在制药领域中的新用途。一、受试药物注射用龙胆苦苷注射剂。1.1提供单位陕西省生物医药重点实验室。1.2性状浅黄色或近白色的固体粉末，味苦。1.3规格80mg/瓶。1.4溶剂生理盐水。1.5配置方法生理盐水配制成1.25％和0.625％溶液，pH 5.5-6.0，置冰箱备用。1.6贮存条件4℃，密闭保存干燥。二、剂量设置小鼠静脉注射(iv)给药测得LD50为2.5g/kg；大鼠1.8g/kg。预实验结果表明，注射用龙胆苦苷125mg/kg为最佳给药剂量，此剂量为LD50的1/20，故本实验使用30-150mg/kg。三、试验材料3.1试验材料 氢化可的松，天津市氨基酸公司人民制药厂生产，批号990813氨苄青霉素，哈药集团制药总厂，批号A20000820；联苯双酯1.5mg×250丸，浙江温领制药厂，批号0003102。3.2动物 Sprague-Dawley(SD)大鼠，体重180-220g；由第四军医大学实验动物中心提供，生产合格证号为陕医动字08-014号。昆明种小鼠体重18-22g；由第四军医大学实验动物中心提供，生产合格证号为陕医动字08-013。豚鼠250-300g，由西安医科大学实验动物中心提供，医动证字08-019号。分笼饲养于空调室内，室温23±2℃，相对湿度45％-60％，自动控制昼夜各12h，颗粒饲料喂养，自动饮用自来水。四、实验方法与结果4.1注射用龙胆苦苷对二甲苯致小鼠耳壳炎症的保护作用。4.1.1昆明种小鼠60只，雌雄各半，按性别与体重随机分为5组，即正常对照组，氢化可的松(20mg·kg-1)阳性对照组，龙胆苦苷(150、75、37.5mg·kg-1)给药组。每天日8:00分别肌肉注射(im)不同剂量的龙胆苦苷(20mL·kg-1)，等体积的生理盐水或ip 20mg·kg-1氢化可的松，每天1次，共3次。最后一次给药0.5h后用二甲苯涂于小鼠右耳，耳内外侧各0.01ml，左耳涂以同样的蒸馏水作为对照。0.5h后再涂一遍，再过0.5h处死动物，取左、右耳廓，用9号打孔器打取左右耳相同部位耳片称重，以右耳片重量减左耳片重之差比左耳片重量作为右耳炎症肿胀度。4.1.2结果(表1)可见，龙胆苦苷大、中剂量组和氢化可的松组能明显减轻二甲苯引起的炎症反应，呈现出明显的剂量依赖关系。表明注射用龙胆苦苷对二甲苯引起的小鼠耳壳炎症反应具有明显的对抗作用。表1.注射用龙胆苦苷对二甲苯致小鼠耳壳炎症的保护(n＝10，X±s) ap＜0.05，bp＜0.01与对照组比较。4.2注射用龙胆苦苷对蛋清致大鼠足跖肿胀性炎症的保护作用4.2.1 SD大鼠50只，雌雄各半，按性别与体重随机分为5组，包括正常对照组，氢化可的松(15mg·kg-1)阳性对照组，龙胆苦苷(120、60、30mg·kg-1)三个剂量给药组。每天8:00分别im不同剂量的龙胆苦苷，ip氢化可的松，每天1次，共3天。于末次给药1小时后用10％的蛋清溶液致炎(每只鼠右足跖皮下注射0.1ml)，用游标卡尺测量致炎前及致炎后0.5，1.0，2.0，3.0，4.0小时足跖同一部位厚度。4.2.2试验结果(表2)可见，氢化可的松与龙胆苦苷大、中剂量组都可抑制蛋清引起的炎症反应，与对照组比较有显著性差别。表2 龙胆苦苷对蛋清致大鼠足跖肿胀性炎症的保护作用(n＝10，X±s) ap＜0.05，bp＜0.01与对照组比较4.3注射用龙胆苦苷对大鼠棉球肉芽肿炎症的保护作用4.3.1 SD大鼠50只，雌雄各半，按性别与体重随机分为5组正常对照组，氢化可的松(15mg·kg-1)阳性对照组，龙胆苦苷(120、60、30mg·kg-1)三个剂量组。在戊巴比妥钠麻醉下，将大鼠左右蹊部剪一小口，皮下埋入一无菌棉球(重量为10±1mg)，在伤口处各加氨苄青霉素2mg，缝合伤口，整个手术过程为无菌操作。手术当天开始im给予不同剂量的龙胆苦苷，每日一次，氢化可的松组隔日ip1次，连续10天。于末次给药后24h处死动物，取出棉球，剔尽脂防组织，在60℃烤箱烘干，称重，减去原棉球重，即为肉芽肿重量。4.3.2实验结果(表3)表明，龙胆苦苷大、中、小三个剂量组对大鼠棉球肉芽肿呈现剂量依赖性抑制作用。表3 龙胆苦苷抗大鼠棉球肉芽肿(n＝10，X±s) aP＜0.05，bP＜0.01与对照组比较。4.4注射用龙胆苦苷对去肾上腺二甲苯引起的小鼠耳廓炎症反应的影响4.4.1昆明种小鼠36只，雌雄各半，分为正常对照组，去肾上腺模型组，龙胆苦苷150mg·kg-1给药组。模型组和给药组小鼠在戊巴比妥钠麻醉下去肾上腺，3d后对正常对照组和去肾上腺模型组im(20m本文档来自技高网...

【技术保护点】
龙胆苦苷或含龙胆苦苷５０％以上的龙胆总苷在制备治疗关节炎药物中的用途。

【技术特征摘要】
1.龙胆苦苷或含龙胆苦苷50％以上的龙胆总苷在制备治疗关节炎药物中的用途。2.龙胆苦苷或含龙胆苦苷50％以上的龙胆总苷在制备...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙文基，陈雷，孙晓莉，尚平平，张勇民，
申请(专利权)人：西北大学，
类型：发明
国别省市：87[中国|西安]