改善伤口愈合的方法技术

本发明专利技术涉及纤溶酶原和纤溶酶作为药物增强鼓膜穿孔或其它伤口的愈合，以及减少伤口愈合期的疤痕或坏死组织形成的应用。本发明专利技术还涉及一种筛选增强伤口愈合的化合物的方法，其通过评价动物模型中的鼓膜穿孔愈合来实现。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及伤口愈合的过程。特别的，本专利技术涉及改善穿孔鼓膜或伤口愈合或闭合的新方法，以及使疤痕形成最小化和除去坏死组织的方法。本专利技术还涉及用于研究伤口愈合过程的动物模型，以及鉴别和评价改善穿孔鼓膜或伤口愈合的药物和治疗方法的筛选方法。
技术介绍
缓慢或不适当的伤口愈合危害着许多人群的生活质量。一种可存在问题的伤口愈合的特别类型为鼓膜(鼓室膜)穿孔的愈合。虽然大多数的穿孔可以自然愈合，可通过先于内生结缔组织产生之前的角质化鳞状上皮增生达到闭合，但是仍然有一些穿孔无法愈合，通常导致听力丧失或其它并发症。为什么一些穿孔能愈合，然而其它的却保持未闭合，仍然是目前亟待解决的问题。此外，在美国每年有超过125万的人遭受烧伤，有650万人患有由于压力、静脉停滞、或糖尿病导致的慢性皮肤溃疡。伤口愈合为一种动态的组织改造(remodeling)过程，它包括富含纤维蛋白和纤连蛋白的基质在伤口部位的形成，中性白细胞和巨噬细胞的浸润，表皮角质细胞在伤口边缘的增殖及其通过临时基质的迁移，含有新发育的血管和迁移的炎症细胞和成纤维细胞的肉芽组织的形成，和伤口收缩。皮肤伤口愈合的研究表明，蛋白酶在许多步骤中扮演着重要的角色。现有的完备记录表明，发生于伤口愈合和其它ECM改造过程中的细胞外基质(ECM)的降解依赖于炎症细胞分泌的各种蛋白水解酶的作用，和基质组织细胞成分的作用。许多不同的蛋白酶被认为在伤口愈合过程中有利于基质的改造(Sakselaand Rifkin，Annu.Rev.Cell Biol.4，93-126(1988))。然而，该过程的精确机理，以及它们是如何调控的，都知之甚少。纤溶酶原-活化系统纤溶酶原-活化系统为一种多用的，暂时调控的酶系统，其中纤溶酶原被活化成为蛋白水解酶-纤溶酶，下述两种生理纤溶酶原激活剂(PAs)组织型纤溶酶原激活剂(tPA)和尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)中的任何一种都能促进该过程的发生。该系统的活化首先是由外部信号导致的特定细胞释放tPA或uPA而引发的，并导致局部表现出胞外蛋白酶活性(Vassalli et al.J.Exp.Med.159，1653-1668(1984)；Saksela & Rifkin，1988，supra)。PA-系统同时也由直接抑制PAs和纤溶酶的特殊抑制剂调控，抑制剂包括PA-抑制剂1(PAI-1)，PA-抑制剂2(PAI-2)，蛋白酶连接蛋白1(PN-1)和α2-抗纤溶酶(Saksela & Rifkin，1988，supra；Ny et al.，Thromb Res.71(1)1-45(1993))。所有的这些属于丝氨酸蛋白酶抑制剂家族的抑制剂，均为被同族蛋白酶酶切的自杀抑制剂(Wilczynska et al.，J Biol Chem.270(50)29652-5(1995)；Wilczynska et al.，Nat Struct Biol.4(5)354-7(1997))。PA-系统最重要的特性在于由纤溶酶原转变为纤溶酶形式导致的放大作用。研究发现PAs与一些类型的基质金属蛋白酶(MMPs)一起存在于伤口的边缘，其中的基质金属蛋白酶包括间质胶原酶(MMP-1)，溶基质素-1(MMP-3)，以及明胶酶A(MMP-2)和明胶酶B(MMP-9)的潜在形式。PAs和MMPs的表达都是由炎症介质和细胞因子诱导产生的，这表明上述两个酶系统的作用可能是一致的。目前，已知MMPs是作为能通过限制性蛋白水解作用活化的潜在前体酶合成的，但是体内发生该活化作用的确切机制还不为人知。纤溶酶是涉及金属蛋白酶一些亚基活化作用的推测因子之一(Lijnen，Thromb Haemost 86(1)324-33(2001))。许多报道表明，MMPs，金属蛋白酶抑制剂(TIMPs)，PAs和PA-抑制剂的表达或活化在伤口愈合过程中发生变化，同时还表明，纤溶酶在皮肤伤口愈合中起作用(Romer et al.，Nat.Med.2287-292(1996))。此外，Verheijen的美国专利5925350和6033664描述了采用uPA或tPA促进慢性或非愈合性伤口愈合的应用。在这些研究中，强调了上述促进机制不与纤维蛋白溶酶活性或坏死组织清除相关。同时，还提供了一种改善鼓膜愈合的特殊方法，即在局部给药高浓度的透明质酸盐(hyaluronan)(Laurent et al.，ArchOtolaryngol Head Neck Surg1141435-1441(1988))或碱性成纤维细胞生长因子(bFGF；Fina et al.，Laryngoscope103(7)804-809(1993))。虽然对伤口愈合及其各种调控机制的理解加深了，以及提出了有前景的治疗方法，但是慢性或非愈合性鼓膜穿孔或其它伤口的愈合仍然是现存的医学问题和社会问题。因此，本领域需要提出新的加速伤口愈合过程的改进方法，例如鼓膜穿孔、烧伤和皮肤溃疡的愈合，任何坏死组织的除去，和疤痕形成的最小化等。同时，还需要提出新的筛选方法，通过该方法能鉴别和评估用于上述治疗方法的药物。本专利技术满足了该领域的这些需要以及其它需求。专利技术概述本专利技术涉及一种通过给药纤溶酶原，改善鼓膜穿孔愈合，或在愈合过程中使疤痕形成最小化的新方法。因此，本专利技术提供了一种改善需要治疗的受治疗者的鼓膜穿孔愈合的方法，该方法包括向受治疗者给药一种包含有效量改善鼓膜穿孔愈合的纤溶酶原的组合物的步骤。优选的，所述的受治疗者为人类，所述的纤溶酶原为人纤溶酶原。该组合物还包括一种药学上可接受的载体，同时也可以是水性溶液形式，胶体，洗液，软膏，粉剂，糊剂，绷带，伤口敷料，或其它合适的输送载体形式。所述的纤溶酶原可以是局部的或全身的给药。在局部给药的情况下，所给药的组合物可以包含约为0.05mg至约10mg的纤溶酶原，优选约为0.5至约5mg的纤溶酶原。所述的组合物可以通过加速穿孔愈合，减少坏死组织，和减少伤口部位疤痕组织形成来改善愈合。在一具体实施方案中，纤溶酶原的给药重复至少一次，优选每天至少一次。本专利技术还提供了一种在需要治疗的受治疗者的愈合伤口上减少疤痕形成的方法，该方法包括向受治疗者给药一种包含有效量的减少疤痕形成的纤溶酶原的组合物的步骤。例如，所述的纤溶酶原可以减少纤维蛋白的沉积。所述的受治疗者优选为人类受治疗者，所述的纤溶酶原优选为人纤溶酶原。在一具体实施方案中，所述的纤溶酶原局部给药，所述的组合物包含约为0.5mg至约5mg纤溶酶原/平方厘米伤口面积。本专利技术还提供了一种加速需要治疗的患病个体的伤口愈合的方法，该方法包括向患病个体给药一种包含有效量的改善伤口愈合的纤溶酶原的组合物的步骤。可选的，所述的伤口为慢性伤口。所述的受治疗者可以是人类受治疗者，在该情况下，所述的纤溶酶原优选为，虽然不是必须的，人纤溶酶原。在所述的纤溶酶原局部给药的情况下，可以按每平方厘米伤口面积，大约0.5mg至约5mg纤溶酶原的量给药。本专利技术还提供了一种加速需要治疗的患病个体的伤口愈合的方法，该方法包括向患病个体给药一种包含有效量的改善伤口愈合的纤溶酶的组合物的步骤。可选的，所述的伤口为慢性伤口。在一具体实施方案中，所述的受治疗者为人类受治疗者，所本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种减少正在愈合的伤口疤痕形成的方法，其包括向需要这种治疗的受治疗者给药一种包含有效量的纤溶酶原的组合物，用于减少疤痕形成。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：托尔尼，李季男，斯滕赫尔斯特龙，珀奥洛夫埃里克森，
申请(专利权)人：奥姆尼奥治疗有限责任公司，
类型：发明
国别省市：SE[瑞典]