组合S1P受体激动剂/调节剂和免疫抑制药的抗淋巴细胞抗体诱导制造技术

在治疗移植接受者的过程中将Ｓ１Ｐ受体调节剂、一种或多种免疫抑制药和抗淋巴细胞抗体组合的免疫抑制疗法延长移植同种异体移植物的存活。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】组合s1p受体激动剂/调节剂和免疫抑制药的抗淋巴细胞抗体诱导的制作方法专利说明组合S1P受体激动剂/调节剂和免疫抑制药的抗淋巴细胞抗体诱导 本专利技术涉及特别在治疗移植患者的过程中将免疫抑制药、S1P受体调节剂和抗淋巴细胞抗体组合的免疫抑制疗法。 目前的维持免疫抑制疗法、例如肾移植后的维持免疫抑制疗法将钙依赖磷酸酶抑制剂(环胞菌素或他克莫司)与一种或多种免疫抑制药、包括皮质类固醇、硫唑嘌呤(AZA)、霉酚酸吗乙酯、霉酚酸钠或大环内酯免疫抑制剂(依维莫司、西罗莫司)组合。已经作出努力来发展这些组合以尽可能地预防急性排斥发作和将不良作用降到最低或避免不良作用。这些努力已经产生了显著的进展，但是特别在排斥率和副作用方面仍然需要进行改善。 现在已经出人意料地发现S1P受体激动剂与一种或多种免疫抑制药、包括抗淋巴细胞抗体疗法的组合可提供另外的意想不到的益处。特别地，当将其它药物的剂量保持在最低水平时，可降低排斥发作、例如肾脏或心脏移植后的排斥发作，由此可改善耐受性。 因此，本专利技术提供了在接受者中抑制同种异体移植物排斥的方法，所述方法包括给所述接受者同时或依次施用治疗有效量的S1P受体调节剂以及一种或多种免疫抑制药和抗淋巴细胞抗体。 优选根据本专利技术的该方法可以用于治疗肾移植。 S1P受体调节剂或激动剂是靶向于一种或多种1-磷酸鞘氨醇受体、例如S1P1至S1P5的化合物。术语调节意欲包括S1P受体的激动作用或功能拮抗作用。与S1P受体结合的调节剂或激动剂例如可以使受体活化、内在化或脱敏。这可能与通过G蛋白进行的S1P受体信号传导的调节、不同G蛋白的结合或解离、G蛋白与S1P受体的相互作用的变化、通过RGS(G蛋白信号传导的调节剂)蛋白进行的G蛋白调节的改变、被调节剂占据的受体的磷酸化的增加和/或下游信号传导途径/激酶的活化有关。 可以在下列试验中测定S1P受体激动剂或调节剂与各种人S1P受体的结合亲和力 对人S1P受体S1P1、S1P2、S1P3、S1P4和S1P5测试化合物的S1P受体激动剂或调节剂活性。通过对化合物诱导的GTP[γ-35S]与膜蛋白的结合进行定量评价功能性受体活化，所述膜蛋白由稳定表达适当人S1P受体的转染CHO或RH7777细胞制备。所用的测定技术为SPA(基于闪烁邻近的测定法)。简言之，连续稀释DMSO溶解的化合物，在50mM Hepes、100mMNaCl、10mM MgCl2、10μM GDP、0.1％不含脂肪的BSA和0.2nM GTP[γ-35S](1200Ci/mmol)存在下加入到SPA-珠(Amersham-Pharmacia)固定的表达膜蛋白的S1P受体中(10-20μg/孔)。于RT在96孔微量滴定板中孵育120分钟后，通过离心步骤分离未结合的GTP[γ-35S]。用TOPcount平板读数仪(Packard)对膜结合GTP[γ-35S]引起的SPA珠发光进行定量。使用标准曲线拟合软件计算EC50。在本测定法中，优选S1P受体调节剂或激动剂的与S1P受体的结合亲和力＜50nM。 优选的S1P受体激动剂或调节剂例如为除其S1P结合特性外还具有加速淋巴细胞归巢特性的化合物，例如引起由淋巴细胞由循环至次级淋巴组织的再分布、优选可逆的再分布导致的淋巴细胞减少的化合物，不引起全身免疫抑制。分离原初细胞；刺激来自血液的CD4和CD8 T-细胞和B-细胞以迁移入淋巴结(LN)和派尔结(PP)。 可以在下述血液淋巴细胞消减(Blood Lymphocyte Depletion)试验中测定淋巴细胞归巢特性 通过对大鼠管饲口服施用S1P受体激动剂或调节剂或载体。在-1天获得用于血液监测的尾血以得到基线个体值，并在施用后2、6、24、48和72小时获得用于血液监测的尾血。在本试验中，当以例如＜20mg/kg的剂量施用时，S1P受体激动剂或调节剂使外周血液淋巴细胞消减例如50％。 适宜的S1P受体调节剂或激动剂的实例例如有 -如EP627406A1中公开的化合物，例如式I化合物， 其中 R1为直链或支链(C12-22)链， -其可以在链上具有选自双键、三键、O、S的键或杂原子、NR6，其中R6为H、C1-4烷基、芳基-C1-4烷基、酰基或(C1-4烷氧基)羰基和羰基；和/或 -其可以具有作为取代基的C1-4烷氧基、C2-4链烯氧基、C2-4炔氧基、芳基C1-4烷氧基、酰基、C1-4烷氨基、C1-4烷硫基、酰氨基、(C1-4烷氧基)羰基、(C1-4烷氧基)-羰基氨基、酰氧基、(C1-4烷基)氨甲酰基、硝基、卤素、氨基、羟基亚氨基、羟基或羧基；或者 R1为 -苯基烷基，其中烷基为直链或支链(C6-20)碳链；或 -苯基烷基，其中烷基为直链或支链(C1-30)碳链，其中所述的苯基烷基被如下基团取代 -任选被卤素取代的直链或支链(C6-20)碳链； -任选被卤素取代的直链或支链(C6-20)烷氧基链； -直链或支链(C6-20)链烯氧基； -苯基-C1-14烷氧基、卤代苯基-C1-4烷氧基、苯基-C1-14烷氧基-C1-14烷基、苯氧基-C1-4烷氧基或苯氧基-C1-4烷基； -被C6-20烷基取代的环烷基烷基； -被C6-20烷基取代的杂芳基烷基； -杂环C6-20烷基；或 -被C2-20烷基取代的杂环烷基； 并且，其中 烷基部分可以 -在碳链上具有选自双键、三键、O、S的键或杂原子、亚磺酰基、磺酰基或NR6，其中R6如上定义；和 -具有作为取代基的C1-4烷氧基、C2-4链烯氧基、C2-4炔氧基、芳基C1-4烷氧基、酰基、C1-4烷基-氨基、C1-4烷硫基、酰氨基、(C1-4烷氧基)羰基、(C1-4烷氧基)羰基氨基、酰氧基、(C1-4烷基)氨甲酰基、硝基、卤素、氨基、羟基或羧基；且 R2、R3、R4和R5各自独立地为H、C1-4烷基或酰基； 或其可药用盐或水合物； -如EP1002792A1中公开的化合物，例如式II化合物， 其中m为1-9且R’2、R’3、R’4和R’5各自独立地为H、C1-6烷基或酰基； 或其可药用盐或水合物； -如EP0778263A1中公开的化合物，例如式III化合物， 其中 W为H；C1-6烷基、C2-6链烯基或C2-6炔基；未取代或被OH取代的苯基；R”4O(CH2)n；或被1-3个取代基取代的C1-6烷基，所述的取代基选自卤素、C3-8环烷基、苯基和被OH取代的苯基； X为H，未取代或被取代的具有p个碳原子的直链烷基，或者未取代或被取代的具有(p-1)个碳原子的直链烷氧基，例如被1-3个取代基取代，所述的取代基选自C1-6烷基、OH、C1-6烷氧基、酰氧基、氨基、C1-6烷氨基、酰氨基、氧代、卤代C1-6烷基、卤素、未被取代的苯基和被1-3个选自如下的取代基取代的苯基C1-6烷基、OH、C1-6烷氧基、酰基、酰氧基、氨基、C1-6烷氨基、酰氨基、卤代C1-6烷基和卤素；Y为H、C1-6烷基、OH、C1-6烷氧基、酰基、酰氧基、氨基、C1-6烷氨基、酰氨基、卤代C1-6烷基或卤素，Z2为单本文档来自技高网...

【技术保护点】
与一种或多种免疫抑制药和抗淋巴细胞抗体组合的Ｓ１Ｐ受体调节剂的用途，用于制备在接受者中抑制实体器官同种异体移植物排斥的药物，由此所述药物同时或依次施用。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】US 2005-2-8 60/651,0451.与一种或多种免疫抑制药和抗淋巴细胞抗体组合的S1P受体调节剂的用途，用于制备在接受者中抑制实体器官同种异体移植物排斥的药物，由此所述药物同时或依次施用。2.根据权利要求1的用途，其中抗淋巴细胞抗体在移植前施用和/或在移植后立即施用。3.根据权利要求2的用途，其中抗淋巴细胞抗体在移植前施用，抗淋巴细胞抗体选自抗CD25化合物和具有至少一部分CTLA4或其突变体的胞外域的重组结合分子。4.根据权利要求1的用途，其中实体器官同种异体移植物为肾脏。5.在接受者中抑制实体器官同种异体移植物排斥的方法，所述方法包括给所述接受者同时或依次施用治疗有效量的S1P受体调节剂以及一种或多种免疫抑制药和抗淋巴细胞抗体。6.在接受者中抑制实体器官同种异体移植物排斥的方法，所述方法包括给所述接受者同时或依次施用治疗有效量的S1P受体调节剂以及一种或多种免疫抑制药和抗淋巴细胞抗体...

【专利技术属性】
技术研发人员：S阿拉德耶，
申请(专利权)人：诺瓦提斯公司，
类型：发明
国别省市：CH[]