肌肉生长抑制素（GDF-8）拮抗剂用于增进创伤愈合和防止纤维变性疾病的用途制造技术

本发明专利技术涉及通过利用一种或多种肌肉生长抑制素拮抗剂抑制肌肉生长抑制素（ＧＤＦ－８）活性而增进人或动物患者的创伤愈合的方法。本发明专利技术还涉及治疗纤维变性疾病或病症的方法，包含施用肌肉生长抑制素拮抗剂。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】肌肉生长抑制素(gdf-8)拮抗剂用于增进创伤愈合和防止纤维变性疾病的用途的制作方法肌肉生长抑制素(GDF-8)拮抗剂用于增进创伤愈合和 防止纤维变性疾病的用途专利
本专利技术涉及用于增进创伤愈合、并尤其用于防止在创伤自然愈合期间 在受损组织中出现的疤痕形成及由此的功能丧失的方法和组合物。
技术介绍
创伤是典型地与生物物质的丧失相关的对组织完整性的破坏。单纯创 伤包括皮肤的切伤和擦伤，而较深的对肌肉组织、骨骼系统或内部器官的 损伤被定义为复杂伤、无论创伤类型或组织损害程度，每种创伤都有相似的修复过程1，2，3。已 认识到创伤愈合有三个不同阶段。首先是炎性或渗出阶段，以使恶化组织 脱离并清洁创伤；第二是肉芽组织发育的增殖阶段；而第三是分化或再生 阶段，用于成熟和疤痕形成1。炎性阶段的特征在于止血和发炎。组织损伤发生后，由于创伤形成而 被损坏的细胞膜释放出血栓素八2和前列腺素2-a，其为强效血管收缩剂。 该最初的应答帮助限制出血。然后发生毛细血管舒张，而且炎性细胞(血 小板、嗜中性粒细胞、白细胞、巨噬细胞、和T淋巴细胞)迁移到创伤位点。尤其是，嗜中性粒细胞通过吞噬作用而在伤口清洁中起着核心作用。创伤 中接下来出现的细胞是白细胞和巨噬细胞。巨噬细胞对创伤愈合是必需的。大量酶和细胞因子由巨喧细胞分泌，其包括胶原酶，其能对创伤清创； 白细胞介素和胂瘤坏死因子(TNF)，其刺激成纤维细胞(以产生胶原)并促进 血管生成；和转化生长因子(TGF)，其刺激角质化细胞2。该步骤标志着转 换进入组织重建的过程中，即增殖阶段。增殖阶段的特征在于上皮形成、血管生成、肉芽组织形成、和胶原沉 积。TNFa刺激的血管生成对于将营养物递送到创伤位点中及其周围而言是 必需的，并且对有效的创伤愈合而言是关键的。肉芽组织形成是复杂的事 件，其涉及白细胞、组织细胞、浆细胞、肥大细>9包，并尤其涉及成纤维细胞，其通过产生胶原而促进组织生长。控制增殖阶段的精确步骤和机理是未知的。 一些牵涉的细胞因子包括血小板衍生的生长因子(PDGF)、胰岛素 样生长因子(IGF)和上皮生长因子(EGF)。它们都是胶原形成所必需的2。创伤愈合的最后阶段是分化阶段。创伤进行收缩，而且肉芽组织变得 液体和血管越来越少，开始变硬，并进行重塑用以形成疤痕组织。当创伤 包括皮肤损伤时，创伤愈合的最后阶段是上皮形成，其中表皮细胞迁移， 以重新覆盖棵露的表面。当创伤包括骨骼肌损伤时，由新的肌肉细胞通过 分化以形成成肌细胞的卫星细胞而铺成(除了增殖阶段中的肉芽组织)4。在 创伤愈合的最后阶段中，成肌细胞分化以形成肌管，其成熟并4参入肌肉纤 维。尽管该过程能在创伤位点处恢复出一些肌肉功能，而肌肉创伤总是会 丧失肌肉组织、结疤并丧失原有肌肉功能。当前对组织创伤的治疗包括改善循环、由此4吏氧气和营养物递送到创 伤位点以改善愈合时间的方法。这可由机械来实现，如通过超声波处理、 磁和电刺激、凝涡疗法和氧气疗法。可是，尽管这些疗法能刺激并甚至加 速创伤愈合进程，但它们仍旧会在创伤位点上造成功能和/或美容上的损害5当前利用细胞因子和生长因子，如TGF-卩、EGF和IGF-1，来研究新的 疗法。TNF激动剂和拮抗剂也可用于改变血管生成，由此提供显著的潜力 来直接增进愈合进程。可是至今，生长因子只在临床实践中起着有限的作 用。当前唯一可用的商品是PDGF,其显示出能减少愈合时间，但其不能成 功地对创伤愈合的美容或功能方面起改善作用2。因此，有需求提供新的创伤愈合疗法，其能控制创伤愈合进程从而使 新组织替代没有功能或有美容损害的受损组织。本专利技术的目的是以某些方式实现该需求和/或为公众提供有用的选择。专利技术简述令人惊讶地，生长因子——肌肉生长抑制素(myostatin), TGF-P家族 的生长因子成员，首次显示出涉及创伤愈合过程中。抑制肌肉生长抑制素 活性被发现能显著增进创伤愈合进程。因此，本专利技术提供了增进组织创伤愈合的方法，其包括以下步骤向 有需要的患者施用有效量的至少一种肌肉生长抑制素拮抗剂。本专利技术可用于动物和人的创伤愈合中。在动物和人患者中，通过一种或多种以下机制来增进创伤愈合(a) 减少创伤恢复的时间；(b) 加速并增加炎性应答；和(c) 减少或抑制疤痕组织形成，由此改善治疗的组织的功能和美容表观。肌肉生长抑制素拮抗剂可选自任意 一 种或多种已知的肌肉生长抑制素 抑制剂。例如，US 6096506和US 6468535披露了抗肌肉生长抑制素抗体。 US 6369201和WO 01/05820教导了肌肉生长抑制素肽免疫原、月几肉生长抑 制素多聚体和肌肉生长抑制素免疫缀合物，其能引发免疫应答并阻断肌肉 生长抑制素活性。肌肉生长抑制素的蛋白质抑制剂在WO 02/085306中有公 开，其包括截短的II型激活蛋白(Activin)受体、肌肉生长抑制素前域、和 卵泡抑素。其他衍生自肌肉生长抑制素肽的肌肉生长抑制素抑制剂也是已肌肉生长抑制素抑制齐'J(WO 00/43781);显性阴性的肌肉生长抑制素(WO 01/53350),其包括Piedmontese等位基因(第313位上的半胱氨酸替换为酪氨 酸)和成熟的肌肉生长抑制素肽，所述成熟的肌肉生长抑制素肽在氨基酸第 335至375位上或氨基酸第335至375位之间具有C-末端截短。 US2004/0181033也教导了包含氨基酸序列WMCPP的小肽，而且其能结合 并抑制肌肉生长抑制素。一种或多种肌肉生长抑制素拮抗剂优选包含一种或多种选自由肌肉生 长抑制素肽和Piedmontese等位基因组成的组的显性阴性产物，所述肌肉生 长抑制素肽在氨基酸第335、 350位上或氨基酸第335、 350位之间被C-末 端截短了。一种或多种肌肉生长抑制素拮抗剂还可包括肌肉生长抑制素剪接变 体，所述剪接变体包含SEQ ID NO: 8-14之任一项的多肽、或其功能片段 或变体、或与其具有95%、 90%、 85%、 80%、 75%或70%序列同一性的序列。一种或多种肌肉生长抑制素拮抗剂还可包括与肌肉生长抑制素途径有 关的调节剂，所述调节剂包含多肽SEQ1DNO: 16或SEQIDNO: 18、或 其功能片段或变体、或与其具有至少95%、 90%、 85%、 80%、 75%或70%序列同一性的序列。月几肉生长抑制素拮抗剂还可包括反义多核苷酸、干扰RNA分子(例如 RNAi或siRNA)、或抗肌肉生长抑制素核酶，其能通过抑制肌肉生长抑制 素的基因表达来抑制肌肉生长抑制素活性。当一种或多种肌肉生长抑制素拮抗剂包括抗体时，则抗体可以是源自 哺乳动物或非哺乳动物的抗体，例如源自鲨鱼的IgNAR抗体，或者抗体可 以是人源化抗体、或包含源自抗体的功能片段。本专利技术还提供了 一种或多种肌肉生长抑制素拮抗剂在制备用于增进有 需要的患者的创伤愈合的药物中的用途。一种或多种肌肉生长抑制素拮抗剂可以选自以上公开的肌肉生长抑制 素拮抗剂组。药物可配制成用于局部或全身施用的配方，例如，药物可配制成向外 伤位点局部施用的配方，或可配制成向内伤位点注射的配方。本专利技术进一步提供了组合物，其包含一种或多种肌肉生长抑制素拮抗 剂和药学上可接受的载体，其用于增进有需要的患者的创伤愈合的方法中。本发本文档来自技高网...

【技术保护点】
增进组织创伤愈合的方法，包括向有需要的人或非人患者施用有效量的至少一种肌肉生长抑制素拮抗剂的步骤。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】NZ 2005-2-7 5380971. 增进组织创伤愈合的方法，包括向有需要的人或非人患者施用有效 量的至少 一种肌肉生长抑制素拮抗剂的步骤。2. 如权利要求l所述的方法，其中至少一种肌肉生长抑制素拮抗剂选自 由下列所组成的组-抗月几肉生长抑制素抗体；-肌肉生长抑制素肽免疫原、肌肉生长抑制素多聚体或肌肉生长抑制 素免疫缀合物，其能引发免疫应答并阻断肌肉生长抑制素活性；-肌肉生长抑制素的蛋白质抑制剂，其选自截短的激活蛋白II型受体、 肌肉生长抑制素前域和卵泡抑素、或所述蛋白质抑制剂的功能片段；-从过量表达肌肉生长抑制素的细胞中释放到培养物中的肌肉生长抑 制素抑制剂；-显性阴性的肌肉生长抑制素，其选自Piedmontese等位基因和成熟的 肌肉生长抑制素肽，所述成熟的肌肉生长抑制素肽在氨基酸第335至375位 上或氨基酸第335至375位之间具有C-末端截短；-包含氨基酸序列WMCPP的小肽，而且其能结合并抑制肌肉生长抑 制素；-肌肉生长抑制素的剪接变体；-肌肉生长抑制素途径的调节剂；和-反义多核苷酸、RNAi、 siRNA或抗肌肉生长抑制素核酶，其能通过3. 如权利要求2所述的方法，其中至少一种肌肉生长抑制素拮抗剂是显 性阴性的肌肉生长抑制素，所述显性阴性的肌肉生长抑制素选自 Piedmontese等位基因和成熟的肌肉生长抑制素肽，所述成熟的肌肉生长抑 制素肽在氨基酸第335至375位上或氨基酸第335至375位之间具有C-末端截短。4. 如权利要求3所述的方法，其中至少一种肌肉生长抑制素拮抗剂是成 熟的肌肉生长抑制素肽，所述成熟的肌肉生长抑制素肽在氨基酸第335或 350位上具有C-末端截短。5. 如权利要求2所述的方法，其中至少一种肌肉生长抑制素拮抗剂是肌 肉生长抑制素的剪接变体，所述剪接变体选自多肽SEQIDNO: 8-14、或其 功能片段或变体、或与其具有95%、 90%、 85%、 80%、 75%或70%序列同一性的序列。6. 如权利要求2所述的方法，其中至少一种肌肉生长抑制素拮抗剂是肌 肉生长抑制素途径的调节剂，其包含强效肽SEQIDNO: 16或SEQIDNO: 18、或其功能片段或变体、或与其具有至少95%、卯％、 85%、 80%、 75% 或70%序列同一性的序列。7. 如权利要求l-6任一项所述的方法，其用于增进以下的创伤的愈合 浅表皮肤创伤，包括割伤和擦伤；贯穿皮肤和肌肉的深层创伤，包括外科 手术切口；内伤，包括由运动损伤或外伤造成的肌肉和肌腱创伤，挫伤和 血肿；和烧伤。8. 如权利要求l-7任一项所述的方法，其中一种或多种额外的免疫应答 化合物与至少一种肌肉生长抑制素拮抗剂分开、顺序或同时联合施用以进 一步增进创伤愈合，所述免疫应答化合物选自由糖皮质激素、非甾族抗炎 药(NSAID)、 PDGF、 EGF、 IGF和TNF-a拮抗剂组成的组。9. 如权利要求l-7任一项所述的方法，其中至少一种肌肉生长抑制素拮 抗剂配制成用于局部或全身施用。10. 如权利要求9所述的方法，其中至少一种肌肉生长抑制素拮抗剂配 制成用于口服、静脉内、经皮、皮下、皮内、局部、鼻腔、肺部、肌肉内 或腹膜内施用。11. 至少一种肌肉生长抑制素拮抗剂在制备用于增进有需要的人或非 人患者的组织创伤愈合的药物中的用途。12. 如权利要求ll所述的用途，其中至少一种肌肉生长抑制素拮抗剂选 自由下列所组成的组-抗肌肉生长抑制素抗体；-肌肉生长抑制素肽免疫原、肌肉生长抑制素多聚体或肌肉生长抑制 素免疫缀合物，其能引发免疫应答并阻断肌肉生长抑制素活性；-肌肉生长抑制素的蛋白质抑制剂，其选自截短的激活蛋白n型受体、肌肉生长抑制素前域和卵泡抑素、或所述蛋白质抑制剂的功能片段；-从过量表达肌肉生长抑制素的细胞中释放到培养物中的肌肉生长抑 制素抑制剂；-显性阴性的肌肉生长抑制素，其选自Piedmontese等位基因和成熟的 肌肉生长抑制素肽，所述成熟的肌肉生长抑制素肽在氨基酸第335至375位 上或氨基酸第335至375位之间具有C-末端截短；-包含氨基酸序列WMCPP的小狀，而且其能结合并抑制肌肉生长抑 制素；-肌肉生长抑制素的剪接变体；-肌肉生长抑制素途径的调节剂；和-反义多核苷酸、RNAi、 siRNA或抗肌肉生长抑制素核酶，其能通过13. 如权利要求12所述的用途，其中至少一种肌肉生长抑制素拮抗剂是 显性阴性的肌肉生长抑制素，所述显性阴性的肌肉生长抑制素选自 Piedmontese等位基因和成熟的肌肉生长抑制素肽，所述成熟的肌肉生长抑 制素肽在氨基酸第335至375位上或氨基酸第335至375位之间具有C-末端截短。14. 如权利要求13所述的用途，其中至少一种肌肉生长抑制素拮抗剂是 成熟的肌肉生长抑制素肽，所述成熟的肌肉生长抑制素肽在氨基酸第335或 350位上具有C-末端截短。15. 如权利要求12所述的用途，其中至少一种肌肉生长抑制素拮抗剂是 肌肉生长抑制素的剪接变体，所述剪接变体选自多肽SEQIDNO: 8-14、或 其功能片段或变体、或与其具有95%、 90%、 85%、 80%、 75%或70%序列同 一性的序列。16. 如权利要求12所述的用途，其中至少一种肌肉生长抑制素拮抗剂是 肌肉生长抑制素途径的调节剂，所述调节剂包含强效肽SEQ ID NO: 16 或SEQIDNO: 18、或其功能片段或变体、或与其具有至少95%、 90%、 85%、 80%、 75%或70%序列同 一性的序列。17. 如权利要求11-16任一项所述的用途，其用于增进以下的创伤的愈 合浅表皮肤创伤，包括割伤和擦伤；贯穿皮肤和肌肉的深层创伤，包括 外科手术切口；内伤，包括由运动损伤或外伤造成的肌肉和肌腱创伤，挫 伤和血肺；和烧伤。18. 如权利要求11-17任一项所述的用途，其中所述药物进一步包含选 自由糖皮质激素、非甾族抗炎药(NSAID)、 PDGF、 EGF、 IGF和TNF-a拮抗剂组成的组的 一种或多种额外的免疫应答化合物，并且其中该药物配制成 用于至少一种肌肉生长抑制素拮抗剂和所述额外的化合物分开、顺序或同 时施用。19. 如权利要求11-17任一项所述的用途，其中该药物配制成用于局部 或全身施用。20. 如权利要求19所述的用途，其中所述药物配制成用于口服、静脉内、 经皮、皮下、皮内、局部、鼻腔、肺部、肌肉内或腹月莫内施用。21. 药物化合物，其包含至少一种肌肉生长抑制素拮抗剂和药学...

【专利技术属性】
技术研发人员：拉维坎巴德，姆里杜拉沙玛，亚历克斯亨内布里，莫妮卡森纳塞勒诺德莫拉，
申请(专利权)人：奥里科有限公司，
类型：发明
国别省市：NZ[新西兰]