负性免疫调节因子的调节和免疫疗法应用制造技术

本发明专利技术包括，通过抑制细胞的负性免疫调节因子而提高免疫细胞免疫功能的组合物和方法。本发明专利技术提供疫苗和疗法，其中通过抑制负性免疫调节因子增强抗原呈递。本发明专利技术也提供了依赖于自体肿瘤抗原呈递的肿瘤接种方法中破坏自体耐受性的机制。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】负性免疫调节因子的调节和免疫疗法应用
技术介绍
在人中不足的抗原呈递以及先天免疫和获得性免疫激活导致人免疫系统不能控制和淸除多种病原感染和恶性细胞生长。慢性感染和癌症的成功的治疗疫苗 和免疫疗法依赖于诱导强烈免疫应答的有效途径的新方法的发展，该强烈免疫应 答能够控制和清除与其病理相关的攻击性抗原。 T细胞识别抗原的能力依赖于抗原与主要组织相容性复合体(MHC)I或者 (MHC)II蛋白的关联。例如，细胞毒性T细胞应答与MHC-I蛋白关联呈递的抗原。 这样，如果细胞也不表达合适的MHC-I蛋白，应该杀死病毒感染细胞的细胞毒性 T细胞不会杀死该细胞。辅助性T细胞识别MHC-II蛋白。辅助性T细胞活性一般 地依赖于抗原对抗原呈递细胞的识别和在具有"自体"MHC-II蛋白的这些细胞上 的存在。对与自体MHC蛋白关联的抗原的识别要求称为MHC限制性。MHC-I 蛋白在几乎所有的有核细胞的表面上发现。MHC-II蛋白在包括巨噬细胞，B细胞 和脾的树突状细胞和皮肤的朗格汉斯细胞在内的特定细胞的表面上发现。 在哺乳动物中安置免疫应答的关键步骤是激活识别MHC-II限制的外源性 抗原的CD4+辅助性T细胞。这些抗原在抗原呈递细胞如树突状细胞(DCs)的细胞 内体途径被俘获和加工。在内体和溶酶体中，抗原被加工成小抗原肽，该抗原肽 被复合到高尔基区室的MHC-II上以形成抗原-MHC-II复合体。该复合体在细胞表 面表达，其表达诱导了 CD4+T细胞的激活。诱导有效的哺乳动物免疫应答的其它关键事件涉及CD8+T细胞和B细胞的 激活。当期望的蛋白以在细胞表面作为与MHC-I抗原复合的加工蛋白而呈递的方 式穿过细胞时，CD8+T细胞被激活。B细胞通过它们的表面免疫球蛋白(IgM和IgD) 能够与抗原相互作用，而不需要MHC蛋白。然而，CD4+T细胞的激活刺激免疫 系统的所有分支(arm)。激活后，CD4+T细胞(辅助性T细胞)产生白细胞介素。 这些白细胞介素帮助激活免疫系统的其它分支。例如，辅助性T细胞产生白细胞 介素-4(IL-4)和白细胞介素-5(IL-5),这有利于B细胞产生抗体；白细胞介素-2(IL-2), 其激活CD4+T和CD8+T细胞；和7干扰素，其激活巨噬细胞。因为识别MHC-II 限制抗原的辅助性T细胞在激活和克隆扩增细胞毒性T细胞、巨噬细胞、自然杀 伤细胞和B细胞中发挥重要作用，在应答抗原时激活辅助性T细胞的初始事件对 针对该抗原的有效免疫应答的诱导是关键的。已经报到了利用来自溶酶体跨膜蛋9白的序列刺激辅助性T-细胞激活的尝试。然而，这些尝试对所试验的哺乳动物中 的CD8+T细胞和B细胞来说，没有获得有效的免疫应答诱导。 除了 T细胞在免疫应答中发挥的关键作用，DCs同样重要。DCs是专职的 抗原呈递细胞，其在维持自体抗原的耐受性和激活先天免疫与获得性免疫中发挥 关键的调节作用(Banchereau等人，1998， Nature 392:245-52; Steinman等人，2003， Annu. Rev. Immunol. 21:685-711)。当DCs遇到促炎刺激物如微生物产物时，细胞 的成熟过程就会通过上调细胞表面表达的抗原肽负载的MHC分子和共刺激分子 引发。在成熟和归巢到局部淋巴结后，DCs通过形成免疫突触，建立起与T细胞 的接触，其中T细胞受体(TCR)和共刺激分子聚集在粘附分子包围的中央区 (Dustin等人，2000, Nat. Immunol. 1:23-9)。 一旦被激活，CD8+T细胞能够G主增 殖儿代并且获得细胞毒性功能而无需进一歩的抗原刺激(Kaech等人，2001, Nat. Immunol. 2:415-22; van Stipdonk等人，2001, Nat. Immunol. 2:423-9)。因此，已经 提出DCs提供的肽-MHC复合体(信号l)和共刺激分子(信号2)的水平和持续时间 对于决定抗原特异性T细胞应答的强度和命运是必要的(Lanzavecchia等人，2001， Nat. Immunol. 2:487-92; Gett等人，2003， Nat. Immunol. 4:355-60)。 抗原呈递细胞(APCs)，如树突状细胞(DCs)和巨噬细胞在激活先天免疫和获 得性免疫以及维持免疫耐受性中发挥重要的作用。过去几年已经很好地研究了 APCs认识微生物和引起免疫应答的机制。APCs利用模式识别受体如toll样受体 (TLRs)，识别保守的微生物结构如脂多糖(LPS)、未甲基化细菌DNA (CpG)、和 RNA。 TLRs属于TIR(Toll/白细胞介素-l (IL-1)受体)超家族，其分为两个主要的亚 型IL-1受体和TLRs。 TLRs由11个成员(TLR1-TLR11)组成。该超家族的所有 成员以相似的方式进行信弓-传导，这是由于存在保守的胞质TIR结构域，其激活 共同的信号传导途径，特别是那些导致转录因子核因子-KB (NF《B)和应激活化蛋 白激酶激活的信号途径。通过分泌促炎细胞因子如肿瘤坏死因子(TNF)、 IFN、白 细胞介素1 (IL-l)、IL-6和IL-12以及通过表达共刺激分子如CD80、CD86和CD40， NF-kB的激活催化了免疫应答。TNF家族成员，如TNFa和CD40L，与它们的受 体或者配体相互作用，并也激活NF-kB。已经尝试了开发肿瘤疫苗的重要努力，以促进DC成熟和共刺激，作为增 强抗肿瘤免疫的手段。然而，自体肿瘤相关抗原(TAAs)的免疫诱导被内在的抑制 机制限制，其中许多的这些机制有待于被解释。细胞毒性T-淋巴细胞抗原4(CTLA4) 和T细胞上的相关分子利用已知的抑制机制，通过与DCs或其它细胞上的B7家 族分子的细胞-细胞接触控制效应T-细胞激活的程度。DC成熟在维持自体耐受性 到诱导免疫性中起着关键的开关作用。然而，仍然不清楚的是，成熟的抗原呈递 DCs是否具有负性免疫调节机制，该机制允许它们控制成熟点之外的获得性免疫 性的强度和持续时间。人们在促炎信号传导方面集中了很大的注意力，却对抑制和解决炎症的机制知道很少。TLR引起的免疫应答的强度和持续时问受促炎信号传导的强度和持 续时间以及受信号转导途径的调节控制。因为TLR诱导的转录因子NF-kB的激活 对大量的促炎基因的转录是必要的，那么可以利用多种机制在多个水平负调节 TLR信号传导，以保护宿主免受过度的免疫应答如败血症休克和在暴露于慢性微 生物如肠道微环境的情况下维持免疫内稳态。TLR信号途径的负性免疫调节因子 包括IRAK-M、 MyD88s、 P13K、 TOLLIP、 A20、 TRIAD3A、 NOD2、可溶性TLR2/4 和含有TIR结构域的膜结合分子如SIGIRR和ST2 (Nat Rev. Immunol. 5:446, 2005)。 细胞因子关键性地参与多种免疫细胞功能的调节(Curtsinger等人，2003， J. Exp. Med. 197:1141-51; Valenzuela等人，2002， J. Immunol. 169:6842-9)。 DCs利用 识别保守微生物结构如脂多糖(LPS)的toll样受体(TLRs)，通过激活本文档来自技高网...

【技术保护点】
提高免疫细胞的免疫效能的组合物，所述组合物包括负性免疫调节因子的抑制剂，其中，所述抑制剂干扰所述细胞中的所述负性免疫调节因子，以及其中所述负性免疫调节因子选自参与分子稳定的蛋白质，和诱导ＮＦκＢ的抑制因子表达或者抑制ＮＦκＢ靶向基因转录的转录因子，或者它们的任意结合。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：SY陈，KC埃弗尔卡布勒，X宋，XF黄，A沙拉比，
申请(专利权)人：贝勒医学院，
类型：发明
国别省市：US[美国]