本发明专利技术公开了两种地钱提取物，地钱总黄酮提取物和地钱萜烯提取物，证实地钱两个提取部位的具有抗肝癌和抗乙型肝炎病毒的作用，并公开其在制备治疗乙型肝炎和肝癌药物中的应用。其提取方法是：将地钱原料粉碎，加溶媒１０－２０倍量，于５０－１００℃条件下，提取２－３次，每次０．５－１．５小时，提取液过滤，浓缩至干，得地钱粗提物。粗提物依次分别用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，正丁醇萃取液减压蒸馏，回收溶剂，浓缩至干，甲醇溶解后，通过层析柱（以硅胶或硅藻土等为填料），先用氯仿洗柱，再经甲醇洗柱，或通过大孔吸附树脂柱，先用水洗，再用乙醇洗脱，甲醇或乙醇液于４０－５０℃减压浓缩，浓缩液经真空干燥或喷雾干燥或冷冻干燥得到总黄酮含量为７０－９０％的提取物。乙酸乙酯萃取液减压蒸馏，回收溶剂，浓缩至干，甲醇溶解后，通过硅胶层析柱，用二氯甲烷洗脱，二氯甲烷洗脱液于３０－４０℃减压浓缩，浓缩液经真空干燥或喷雾干燥或冷冻干燥得到萜烯含量为７０－９０％的提取物。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及植物提取物及其医疗用途，尤其是地钱提取物的制备工艺及其 在制备治疗肝癌和乙型肝炎药物中的应用，属于中药领域。
技术介绍
地钱属植物(Marchantineae)属于苔藓植物门(Bryophyta)苔纲(Hepaticae) 地钱目(Marchantiales)。又名脓痂草(陕西)，地浮萍、 一团云、地梭椤(贵 州)，地龙皮(西藏)，龙眼草(秦岭巴山)，巴骨龙、米海苔(陕西)(参见高谦 等.东北苔类植物志.北京:科学出版社，1981; 192)。我国地钱属植物除有地钱 (MarcA。ria / o/拜o—a L.)分布夕卜，还有拳巻地钱(A/a/r/w油'a convo/她Gao et Chang)、粗裂地钱(Aforc/i。tof pa/eacea Bert.)和风兜地钱(MGw/wf/ c^&ra Mont,)等3种，它们混生在一起，难以区别(参见中国科学院植物研究所编.中 国高等植物图鉴(第一册).北京:科学技术出版社,1972; 27)。地钱是地钱目的代表植物，是具有叶状体的苔类植物中形态构造最复杂,进化比较高等的种类;是苔 藓植物中最常见的草药之一。地钱属植物的药用始载于《名医别录》，明代李时 珍《本草纲目》中谓之石衣，味淡，性凉，归肝经，有清热利湿，解毒敛疮，清心明目 之功效(参见胡人亮，苔藓植物学.高等教育出版社，1987; 2)。拳巻地钱 (Mm /wnftV3 covo/wto Gao Chang)为苔藓植物门苔纲地钱属植物，为中国特有 植物(参见朱华等，商品药材地钱原植物叶状体显微构造特征及检索，世界卫 生杂志，2003; 3: 110，)。国外对地钱属植物的化学成分研究取得了不少进展, 但对我国的传统草药地钱有效成分的提取、分离和结构鉴定研究却是一个空白。 相关文献及査新报告表明，国外学者对日本、德国、南非和印度的地钱科植物进 行了广泛的研究，而很少涉及到中国出产的地钱。植化研究表明，地钱主要含有相关文献及查新报告表明，国外学者对日本、德国、南非和印度的地钱科植物进 行了广泛的研究,而很少涉及到中国出产的地钱。植化研究表明，地钱主要含有 黄酮类化合物和挥发油类化合物(参见[l]肖建波，等，反相高效液相色谱法用 于地钱中黄酮类化合物的分离和测定,分析试验室,2005; 4: 17; [2]肖建波，等，拳巻地钱中挥发油的C02超临界流体萃取及其GC-MS分析，中药新药与临床药 理，2005; 3:33; [3曹慧,等,拳巻地钱不同提取部位的GC-MS分析比较和部分 生物活性研究.质谱学报,2005, 1:1; [4]朱华,等,硅胶柱色谱/RP-HPLC/LC-ESI-MS 分离纯化鉴定拳巻地钱中斧菜素-7-0-P-D-葡萄糖醛酸甙,天然产物研究与开 发,2005,1:38; [5]邹登峰,等,地钱、拳巻地钱和粗裂地钱的紫外谱线组法鉴别,天 然产物研究与开发,2005, 4:463和[6]肖建波，等，拳巻地钱中黄酮类化合物的含 量测定,天然产物研究与开发,2005, 2:186)。关于地钱的治疗作用未见相关报道。 应用方面，未见地钱及其它地钱属植物作为药物的专利和文献。 肝癌是全球高发恶性肿瘤之一，在我国肝癌的死亡率居各种恶性肿瘤第二 位。目前肝癌有有效的根治措施是早期肝癌的肝叶切除术或肝移植术，但肝癌 起病隐匿，早期确诊机会并不多，而肝移植术供体肝有限，费用高昂，难以普 及。其他治疗比如肝动脉栓塞化疗、经皮肝穿瘤内无水乙醇或乙酸注射、射频 或冷冻治疗、超声波治疗等，均可在一定程度上抑制肿瘤的生长，但均属姑息 性治疗。因此，很多肝癌患者自确诊后其平均生存期不到一年，术后复发和转 移、化疗药物的毒副作用、肝功能衰竭等是影响患者预后及生存期的主要因素。 现己公认，治愈肝癌最有希望的手段是包括手术、栓塞化疗、免疫及生物治疗 等在内的综合治疗，其中生物治疗近年来发展尤有前景。乙型肝炎(HepatitisB)是由乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus, HBV)引起的 一种严重的世界范围内危害人类健康的疾病，其传染性强、发病率高。根据WHO的统计，目前，全世界约有3.5亿的慢性乙肝病毒携带者，其中我国人群中HBV 的感染率高居不下。我国的慢性无症状HBV携带者(ASC)已远远超过1.2亿 人。现患乙型肝炎病人为2800万人，现患病率约为2770 / 10万，年发病率约 230/ 10万。慢性乙型肝炎(CHB)的流行率为0.1% 1.0%。 15% 25%的慢 性乙型肝炎患者将过早地死于肝硬化和肝细胞癌。HBV感染已经成为我国乃至 全世界最主要的传染病之一。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供二种两种地钱提取物及总黄酮提取物和萜烯提取物。本专利技术的目的还在于证实地钱提取物具有抗肝癌和抗乙型肝炎病毒的作用。本专利技术所说的地钱总黄酮提取物是通过下述方法获得的 将地钱原料粉碎，加溶媒10-20倍量，于50-10(TC条件下，提取2-3次，每 次0.5-1.5小时，提取液过滤，浓縮至干,得地钱粗提物。粗提物依次分别用石油 醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，正丁醇萃取液减压蒸馏,回收溶剂,浓縮至干,甲醇溶 解后，通过层析柱(以硅胶或硅藻土等为填料)，先用氯仿洗柱，再经甲醇洗柱， 或通过大孔吸附树脂柱，先用水洗，再用乙醇洗脱，甲醇或乙醇液于40-5(TC减 压浓縮，浓縮液经真空干燥或喷雾干燥或冷冻干燥得到总黄酮含量为70-90%的 提取物。本专利技术所说的地钱萜烯提取物是通过下述方法获得的将地钱原料粉碎，加溶媒10-20倍量，于50-10(TC条件下，提取2-3次，每 次0.5-1.5小时，提取液过滤，浓縮至干,得地钱粗提物。粗提物依次分别用石油 醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，乙酸乙酯萃取液减压蒸馏，回收溶剂，浓縮至干,甲醇 溶解后，通过硅胶层析柱，用二氯甲烷洗脱，二氯甲烷洗脱液于30-40°C减压 浓縮，浓縮液经真空干燥或喷雾干燥或冷冻干燥得到萜烯含量为70-90%的提取 物。本专利技术所说的地钱原料是指地钱属植物中的任何一种，包括地钱 (MaArZ/aa / o/>wo—o )、 拳巻地钱(Ma/r/zaf/a covo/wto)、 粗裂地钱 (Man:/7a油.a戸/eacea)禾口风兜地钱(Mw:/2ato却&ra)等。将地钱总黄酮或萜烯提取物，或含有地钱总黄酮或萜烯提取物的组合物， 与制药中可以被接受的辅助添加成分混合，按常规的制剂工艺，即可制成口服 型药物制剂或注射型药物制剂。如与口服制剂中可以被接受的崩解剂、赋型剂、 润滑剂、粘合剂、填充剂等常用的辅助添加成分混合后，按常规方法即可制成 为片剂、胶囊剂、软胶囊剂、颗粒剂和丸剂等口服固体药物制剂；与常用的增 溶剂、乳化剂、润湿剂、起泡或消泡剂等表面活性剂、稀释剂、防腐剂、稳定 剂、增稠剂等混合，按相应的常规方法，即可制成为水剂、糖浆剂等口服液体 药物制剂；与注射剂中常用的适当溶剂和附加剂配合和操作，还可以制备成相 应的冻干粉针、水针等肌肉注射药物制剂。以下细胞试验证实地钱提取物及总黄酮提取物和萜烯提取物分别具有抗乙 型肝炎病毒和抑制肝癌细胞的作用实验例1(1)地钱总黄酮提取物在乙肝病毒2. 2. 15细胞培养中的细胞本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种地钱总黄酮提取物，它通过下述方法获得：将地钱原料粉碎，加溶媒１０－２０倍量，于５０－１００℃条件下，提取２－３次，每次０．５－１．５小时，提取液过滤，浓缩至干，得地钱粗提物。粗提物依次分别用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，正丁醇萃取液减压蒸馏，回收溶剂，浓缩至干，甲醇溶解后，通过层析柱（以硅胶或硅藻土等为填料），用氯仿洗柱，再经甲醇洗柱，或通过大孔吸附树脂柱，先用水洗，再用乙醇洗脱，甲醇或乙醇洗脱液于４０－５０℃减压浓缩，经真空干燥或冷冻干燥或喷雾干燥得到总黄酮含量为７０－９０％的提取物。
【技术特征摘要】
1、一种地钱总黄酮提取物，它通过下述方法获得将地钱原料粉碎，加溶媒10-20倍量，于50-100℃条件下，提取2-3次，每次0.5-1.5小时，提取液过滤，浓缩至干，得地钱粗提物。粗提物依次分别用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，正丁醇萃取液减压蒸馏，回收溶剂，浓缩至干，甲醇溶解后，通过层析柱(以硅胶或硅藻土等为填料)，用氯仿洗柱，再经甲醇洗柱，或通过大孔吸附树脂柱，先用水洗，再用乙醇洗脱，甲醇或乙醇洗脱液于40-50℃减压浓缩，经真空干燥或冷冻干燥或喷雾干燥得到总黄酮含量为70-90％的提取物。2 、 一种地钱萜烯提取物，它通过下述方法获得将地钱原料粉碎，加溶媒10-20 倍量，于50-100。C条件下，提取2-3次，每次0.5-1.5小时，提取液过滤，浓 缩至干，得地钱粗提物。粗提物依次分别用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，乙 酸乙酯萃取液减压蒸馏，回收溶剂，浓縮至干，...
【专利技术属性】
技术研发人员：徐明，肖建波，徐晓萌，
申请(专利权)人：徐明，肖建波，徐晓萌，
类型：发明
国别省市：43[中国|湖南]
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。