本发明专利技术涉及人重组蛋白ＰＤＣＤ５在制备肿瘤化疗增敏药中的应用，人重组蛋白ＰＤＣＤ５是一种非病毒的细胞内转运蛋白，它通过ｌｉｐｉｄ ｒａｆｔ／ｃａｖｅｏｌａｅ依赖的胞吞途径进入细胞；ＰＤＣＤ５能促进程序性细胞死亡，外源性人重组蛋白ＰＤＣＤ５进入细胞，可以增强多种肿瘤细胞对多种化疗药的敏感性，促进化疗药引起的肿瘤细胞的死亡。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及人重组蛋白PDCD5在制备肿瘤化疗增敏药中的应用。技术背景Pi)CZ)5 (程序性细胞死亡分子5， programmed cell death 5 ),以前被称 为7T^i^9 ( TF-1细胞凋亡相关基因19, TF-1 cell apoptosis-related gene 19 )， 是用表象差异分析法 (cDNA Representational Differences Analysis , cDNA-RDA method)克隆的(Liu et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 254, 203-210(1999)),通过撤除细胞因子的方法诱导TF-l细胞凋亡的过程中表达 增加的基因。研究显示PDCD5在细胞系中瞬时或稳定表达时可以促进由某些 刺激剂如生长因子等撤除而诱导的凋亡，并增强TAJ/TROY诱导的旁细胞凋 亡(pamptotic cell death) 。 Chen等(Chen, et al., FEBS Lett. 509, 191-196 (2001).)报告了PDCD5由细胞浆到细胞核的转位是凋亡过程的早期事件。Rui 等(Rui, etal.， Life Sci. 71,1771-1778 (2002))的研究显示抗PDCD5抗体可以 抑制VP16 ( etoposide)诱导的HeLa细胞的凋亡。用反义寡核香酸降低内源性 PDCD5的表达可以緩解VP16诱导的Jurkat细胞的凋亡。这些观察结果提示 PDCD5在凋亡和非凋亡性的程序性细胞死亡中扮演着重要的角色。细胞膜由脂质双层构成，其中镶嵌着蛋白质和糖蛋白， 一般来说蛋白不 能穿过细胞膜。然而某些较大的蛋白，可以通过内吞作用而进入细胞。这类 蛋白中已广泛用于基因治疗研究的蛋白包括人类免疫缺陷病毒(HIV)转 录激活蛋白Tat，果蝇蛋白antennapedia，单纯疱渗病毒(HSV )结构蛋白VP22， 和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)。这些蛋白有若干共同的特性它们以 一种非经典的分泌途径(有分泌信号的参与)释放到细胞外；以特异性受体 非依赖方式与靶细胞结合；它们都有高碱性区域，这些区域显示了与多聚阴 离子结合的能力，如肝素/碌u酸乙酰肝素，多聚泌涎酸和核酸。HIV转录激活 蛋白Tat和果蝇蛋白antennapedia的缺失分析显示那些短的石咸性氨基酸残基明 显地与细胞间转运功能有关(Green & Loewenstein, Ce〃 55， 1179—1188 (1988); Derossi, et al.， J历o/. C7^肌269， 10444—10450 (1994)),因此^皮命名为蛋白转 导结构域(protein transduction domains, PTDs ), 或细胞透过性多肽(cell-permeable peptides, CPPs ) 。 CPP细胞导入系统在生物
及制药 领域有着广阔的应用前景，将会成为细胞生物学研究和临床药物治疗的重要 工具。体内外研究显示，CPP可携带蛋白质和核酸等靶分子进入多种细胞， 甚至神经细胞，调控基因转录、细胞信号转导、细胞的生长、分化与凋亡； 可进入各种组织器官，包括通过血脑屏障，进入中枢神经系统，可用于中枢 神经、心血管、内分泌、消化、呼吸、泌尿、生殖系统多种组织器官的疾病 的治疗。上述各种蛋白、多肽及其它大分子进入细胞的途径一直是研究的关键所 在。胞吞作用的机制复杂，包括几个不同的途径clathrin (笼形蛋白或网格 蛋白)依赖的胞吞途径，起始于质膜包被有clathrin的内陷，然后组装成笼形 蛋白包裹的小泡，和非clathrin依赖的途径，包括lipid raft (脂筏)及caveolae(小 窖)介导的胞吞作用。Clathrin介导的胞吞作用是一种细胞膜特异受体内化的主要机制。网格蛋 白小窝参与受体内化接下来的降解和再循环，以及营养的输入、突触小泡的 形成。脂我(lipid raft)和Caveolae功能相似，是由质膜内陷形成的一个富含胆 固醇和鞘磷脂的抗去污剂的膜的区域，参与信号转导和脂拔相关分子的细胞内的运專lr。大量证据表明细胞表面HS蛋白多糖通过胞吞途径内化与之GAG链连接 的配体。这样的入胞机制已经在其它HS蛋白多糖的配体描述过，包括Tat、 碱性成纤维细胞生长因子。PDCD5也有同样机制入胞，肝素(细胞膜相关的 HSPGs的可溶性竟争剂)处理的细胞抑制PDCD5内化并呈剂量依赖，PDCD5 的摄取需要细胞表面的疏酸乙酰肝素蛋白多糖(HSPGs) ( Wang, et al.， / CTzew. 281,24803-24817(2006))。Caveolae是具有脂我特性的一组细胞膜结构，典型的瓶状膜内陷。 Caveolin-l是caveolae的标志蛋白。曱基-p-环糊精(M(3CD )耗竭胆固醇，破 坏脂我。用MpCD处理的HEK293和U937细胞，PDCD5的内化被明显抑制， 脂筏参与了PDCD5内化的过程。荧光显微镜分析FITC标记的PDCD5重组蛋白 的内化与caveolin-1部分共定位；Triton X-100抵抗实验进 一 步确定 PDCD5-FITC定位脂摸(Wang, et al., /所o/. C7ze肌281, 24803-24817(2006))。化学药物治疗肿瘤仍然是目前主要的治疗手段之一，但由于化疗药的毒 性作用，限制了化疗的应用。化疗增敏剂是指在所用浓度或剂量下提高化学 药物疗效或降低其对正常组织细胞毒性的一类物质，能产生抗肺瘤细胞的协同效应，表现为肿瘤细胞的凋亡增加，具有重要的临床意义。PDCD5能促进 程序性细胞死亡，外源性人重组蛋白PDCD5进入细胞，可以增强多种肺瘤 细胞对多种化疗药的敏感性，促进化疗药引起的肿瘤细胞的死亡。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供人重组蛋白PDCD5在制备肿瘤化疗增敏药中的 应用。本专利技术另一目的在于提供一种肿瘤化疗增敏药，其特征在于，该肿瘤化 疗增敏药物中含有人重组蛋白PDCD5 。本专利技术提供人重组蛋白PDCD5在制备肿瘤化疗增敏药中的应用。本专利技术提供的一种肿瘤化疗增敏药，其特征在于，该肿瘤化疗增敏药物 中含有人重组蛋白PDCD5 。本专利技术的专利技术人经过研究显示人重组蛋白PDCD5是利用窖蛋白 (caveolae)/脂我介导的胞吞作用进入细胞的。细胞摄取人重组PDCD5蛋白是 通过温度依赖的内吞途径，起源于细胞膜脂我。外源性加入人重组PDCD5蛋 白，细胞内吞后还可以到达细胞核。可以开发PDCD5作为各种分子在细胞中 转导的工具。本专利技术人进一步观察到外源性PDCD5进入细胞没有显现出细胞类型的 特异性，在目前验i正的细胞中，如HeLa， MGC-803, HT-29, A549, PC-3, U937, HL-60细胞，JurkatT淋巴细胞，K562细胞，Raji细胞和TF-l细胞均显 现出进细胞的能力。人重组PDCD5蛋白可携带蛋白质大分子药物导入细胞， 它是一个细胞内转运载体系统的有前景的候选者，可以成为研究细胞生物学 和其他生物技术应用的一个工具。特别是，PDCD5是进化保守的人类蛋白， 本文档来自技高网...
【技术保护点】
人重组蛋白ＰＤＣＤ５在制备肿瘤化疗增敏药中的应用。
【技术特征摘要】
1.人重组蛋白PDCD5在制备肿瘤化疗增敏药中的应用。2、...
【专利技术属性】
技术研发人员：王应，马大龙，宋泉声，张颖妹，娄雅欣，克晓燕，史琳，王艳芳，
申请(专利权)人：北京大学，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。