一种用于治疗肿瘤的药物组合物制造技术

本发明专利技术属于生物医药领域，涉及一种用于治疗肿瘤的药物组合物。肿瘤疾病现已上升为世界第２号“杀手”，药物耐受（ｄｒｕｇ　　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ）是肿瘤治疗过程中的一个难题。因此，寻找能够降低抗药性的化合物一种是肿瘤研究领域的热点之一。本发明专利技术提供了一种用于抗肿瘤的药物组合物，它包含序列为５‘－ＣＣＵＧＧＡＡＧＣＣＵＣＣＡＣＵＧＧＣ－３’或者５‘－ＣＣＴＧＧＡＡＧＣＣＴＣＣＡＣＴＧＧＣ－３’的核酸分子和柔红霉素。本发明专利技术的核苷酸分子与柔红霉素联用，可以大大降低肿瘤细胞的抗药性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医药领域，涉及一种用于治疗肿瘤的药物组合物。技术背景肿瘤疾病现已上升为世界第2号〃杀手〃，其死亡人数仅次于心血管病。几年来， 国外医学界对于肿瘤疾病的发病机理在细胞基础上又有了新的认识。基于对肿瘤发 病机制的进一步理解，人们利用各种途径来研制和开发能够特异，有效地杀伤肿瘤细 胞而对正常细胞无毒性的药物。目前，对于癌症的治疗仍以化疗及放疗为首选，两 者虽对肿瘤的治疗取得了相当的疗效，但由于缺乏对肿瘤细胞的特异性因而具有较大 的毒副作用以及某些肿瘤细胞对化疗和放疗处理的不敏感，因此在很大程度上限制了 它们在临床中的应用。近年来，为了开发出能特异性地杀伤癌细胞而对正常细胞无 毒负作用的药物，人们对癌症的发病机制从细胞，分子水平上的研究予以高度重视和 巨额投资。药物耐受(drug resistance)是肿瘤治疗过程中的一个难题。肿瘤细胞对药物 的耐受性不仅使得抗癌药物达不到治疗的目的，同时还会产生副作用，让正常细胞更 容易受到药物的损伤，直接危害到病人的生命。因此，寻找能够降低抗药性的化合物 一种是肿瘤研究领域的热点之一。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种用于治疗肿瘤的药物组合物。本专利技术提供了一种用于治疗肿瘤的药物组合物，它包含序列为5 '-CCUGGAAGCCUCCACUGGC-， 3或者5 '- CCTGGAAGCCTCCACTGGC-， 3的核酸分子和柔红 霉素。其中的核苷酸分子在本专利技术中被称为CRYL1SI12。其中，A、 T、 U、 G和C分别是腺嘌呤核苷酸、胸腺嘧啶核苷酸、尿嘧啶核苷酸、鸟嘌呤核苷酸和胞嘧啶核苷酸。在本专利技术中，术语"核苷酸分子CRYL1SI12 "该术语还包括 5' -CCUGGAAGCCUCCACUGGC-3，或者5' - CCTGGAAGCCTCCACTGGC -3'的核苷酸序列 变异形式。这些变异形式包括若干个(通常为l-15个，较佳地1-10个，更佳地l-5 个)核苷酸的缺失、插入和/或取代，以及在5'和/或3'端添加数个(通常为IO个以 内，较佳地为5个以内)核苷酸。例如，在5' -CCUGGAAGCCUCCACUGGC-3'后(3 '端) 加入若干dT (脱氧胸苷)后形成的序列。本专利技术中的药物组合物，它包含序列为5 CCUGGAAGCCUCCACUGGC-' 3的核 酸分子和柔红霉素。本专利技术中的药物组合物，它的活性成分是序列为5 ^ -CCUGGAAGCCUCCACUGGCdTdT-' 3的核酸分子和柔红霉素。本专利技术中的药物组合物，它的活性成分是序列为5 CCTGGAAGCCTCCACTGGC-' 3的核酸分子和柔红霉素。在本专利技术中，可选用本领域已知的各种载体，如市售的载体，与CRYL1SI12连 接成为重组载体。例如，可以采用慢病毒、腺病毒或者森林脑炎病毒表达系统(Semliki Forest Virus)。慢病毒(Lentivirus)属于逆转录病毒亚属，以人类免疫缺陷病毒 (human immunod efficiency virus, HIV)为代表.慢病毒不仅具有感染分裂耙 细胞并整合其基因组中，尤其是具有感染包括神经元细胞、巨噬细胞、肝细胞、心肌 细胞和干细胞等在内的多种非分裂细胞能力，因而，慢病毒载体已作为基因转移的有 效工具，被广泛应用于基因功能尤其是基因治疗的研究。本专利技术的核苷酸分子CRYL1SI12可以采用各种常规的制备方法制备。本专利技术的 核苷酸分子CRYL1SI12序列通常可以用酶解法或人工合成的方法获得。柔红霉素(daunorubicin)，和它的衍生物去甲基柔红霉素，又称阿霉素 (doxorubicin)，是最早发现的两类蒽环类抗生素。两者自被开发以来一直被临床 上广泛和有效的用于对白血病，乳腺癌，恶性淋巴瘤，软组织瘤等肿瘤疾病的治疗当 中。但是耐药性比较高。本专利技术给肿瘤细胞加药时，柔红霉素终浓度为0.4虚。本专利技术还提供了上述的药物组合物在制备治疗肿瘤药物中的应用。本专利技术的CRYL1SI12显著促进了H印3B细胞在柔红霉素作用条件下凋亡的发生， 将CRYL1SI12与柔红霉素联用，可以大大降低肿瘤细胞对柔红霉素的抗药性。本专利技术的核苷酸分子CRYL1SI12及其类似物，当在治疗上进行施用(给药)时， 可提供不同的效果。通常，可将这些物质配制于无毒的、惰性的和药学上可接受的水 性载体介质中，其中pH通常约为5-8，较佳地pH约为6-8，尽管pH值可随被配制 物质的性质以及待治疗的病症而有所变化。配制好的药物组合物可以通过常规途径进 行给药，其中包括(但并不限于)肌内、腹膜内、皮下、皮内、或局部给药。以本专利技术的核苷酸分子CRYL1SI12为例，可以将其与合适的药学上可接受的载 体联用。这类药物组合物含有治疗有效量的化合物和药学上可接受的载体或赋形剂。 这类载体包括(但并不限于)盐水、缓冲液、葡萄糖、水、甘油、乙醇、及其组合。 药物制剂应与给药方式相匹配。本专利技术的核苷酸分子CRYL1SI12可以被制成针剂形 式，例如用生理盐水或含有葡萄糖和其他辅剂的水溶液通过常规方法进行制备。诸如 片剂和胶囊之类的药物组合物，可通过常规方法进行制备。药物组合物如针剂、溶液、 片剂和胶囊宜在无菌条件下制造。活性成分的给药量是治疗有效量，例如每天约1微 克/千克体重-约10毫克/千克体重。此外，本专利技术的CRYL1SI12还可与其他治疗剂一起使用。当本专利技术的核苷酸分子CRYL1SI12被用作药物时，可将治疗有效剂量的该多肽施 用于哺乳动物，其中该治疗有效剂量通常至少约10微克/千克体重，而且在大多数情 况下不超过约8毫克/千克体重，较佳地该剂量是约10微克/千克体重-约l毫克/千克体 重。当然，具体剂量还应考虑给药途径、病人健康状况等因素，这些都是熟练医师技 能范围之内的。本专利技术中，所述的治疗肿瘤药物是由含有效治疗量的核苷酸分子CRYL1SI12和 药学上的载体或者赋形剂组成的药物组合物。所述药物组合物可以是针剂或者片剂。 其有效治疗量可以为每天1微克/千克至10毫克/千克体重。所述药物可以是针剂、 粉剂或者片剂。本专利技术的CRYL1SI12显著促进了H印3B细胞在柔红霉素作用条件下凋亡的发生， 将CRYL1SI12与柔红霉素联用，可以大大降低肿瘤细胞对柔红霉素的抗药性，因此，本专利技术为肿瘤的治疗提供了一种新的途径和方法。具体实施方式CRYL1SI12对细胞周期的影响采用上海吉凯基因技术有限公司的GeneChem Easy-siRNA合成的CRYL1SI12。 用Lipofectamine 2000转染siRNA的实验操作步骤(1) 细胞于转染前一天接种于24孔板，所加培养基体积为500ul。转染时细胞 融合率应为40%-50%.(2) 配制工作母液2. 5nmo1 (1. OOD)的双链siRNA中加入125ul 1 XUniversal Buffer,得到浓度为20uM的siRNA母液。(3) 以下稀释步骤(4和5)中可以用不含血清的Opti-MEM(Invitrogen),也可以用其他不含血清的培养基。(4) 对于24孔板的每个孔，用0.84ug siRNA双链。把3ul20uM的siRNA双链 与50ul0pti-MEM混合。(5) 本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于治疗肿瘤的药物组合物，其特征在于，它包含序列为５‘－ＣＣＵＧＧＡＡＧＣＣＵＣＣＡＣＵＧＧＣ－’３或者５‘－ＣＣＴＧＧＡＡＧＣＣＴＣＣＡＣＴＧＧＣ－’３的核酸分子和柔红霉素。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：余龙，张琳，
申请(专利权)人：复旦大学，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]