竹节参总皂苷的制备方法及其在治疗心肌缺血的药物中的应用技术

一种竹节参总皂苷的制备方法及其在治疗心肌缺血的药物中的应用，取竹节参药材粗粉，加入粗粉乙醇溶液进行浸泡，加热回流后提取，合并提取液，减压回收溶剂至无醇味，加水稀释后放置，离心，取上清液，用含水正丁醇等量萃取，合并萃取液，减压回收溶剂至无正丁醇馏出，将稠浸膏用８５％乙醇溶液充分溶解，然后缓慢加入丙酮，加时搅拌，于常温下静置，使沉淀分离完全，离心，收集沉淀物并用丙酮洗涤，干燥后得到竹节参总皂苷。本发明专利技术能够简单有效地从竹节参中提取竹节参总皂苷，竹节参总皂苷的最高转移率可达９７．８１％，表明本提取工艺较为稳定可靠，且提取率较高；利用竹节参总皂苷为主要成份得到的药物对治疗心肌缺血的也有较好的疗效。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种竹节参总皂苷的制备方法，本专利技术还涉及到竹节参总皂苷在治疗心肌 缺血的药物中的应用。技术背景竹节参又名竹节三七、竹节人参、白三七等，为五加科人参属植物竹节参Panax japonicus C. A. Mey.的干燥呈竹鞭状根茎，具有滋补强壮、散瘀止痛、止血祛痰的功效。 竹节参的主要活性成分是皂苷类，现已分离鉴定出20余种皂苷成分，化学结构以齐墩果 烷型皂苷为主，水解后可生成齐墩果酸。现代药理研究表明，竹节参总皂苷及水提物具有 明显的抗炎、抗氧化、降血糖等作用。目前有关竹节参中总皂苷提取纯化方面的研究报道 并不多，以竹节参总皂苷为基本活性成分的药物制剂未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种竹节参总皂苷的制备方法及其在治疗心肌缺血的药物中的 应用。本专利技术的目的是这样实现的一种的竹节参总皂苷制备方法，其特征在于取竹节参药材粗粉，加入粗粉重量6—12倍的40 — 70%的乙醇溶液，浸泡1一2.5小时后，加热 回流提取1一4次，每次3h，合并提取液，减压回收溶剂至无醇味，加水稀释后放置，离 心，取上清液，用含水正丁醇等量萃取l一4次，合并萃取液，减压回收溶剂至无正丁醇 馏出，将稠浸膏用85%乙醇溶液充分溶解，然后缓慢加入4一5倍量丙酮，加时搅拌，于常 温下静置4一6 h使沉淀分离完全，离心，收集沉淀物并用丙酮洗涤，用6(T80 'C热风干 燥得到竹节参总皂苷。本专利技术的优选工艺为取竹节参药材粗粉，加入粗粉重量10倍的60%的乙醇溶液， 浸泡2h后，加热回流提取3次，每次3h，合并提取液，减压回收溶剂至无醇味，加水稀 释后放置，离心，取上清液，用含水正丁醇等量萃取3次，合并萃取液，减压回收溶剂至无正丁醇馏出，将稠浸膏用85%乙醇溶液充分溶解，然后缓慢加入4一5倍量丙酮，加时 搅拌，于常温下静置4一6 h使沉淀分离完全，离心，收集沉淀物并用适量丙酮洗涤，60 _80 'C热风干燥得到竹节参总皂苷。所述的竹节参药材粗粉为20—40目。竹节参总皂苷在治疗心肌缺血的药物中的应用。本专利技术所提供的竹节参总皂苷制备方法，能够简单有效地从竹节参中提取竹节参总皂 苷，最高的竹节参总皂苷的转移率可达97.81%,表明本提取工艺较为稳定可靠，且提取率 较高；利用竹节参总皂苷为主要成份得到的药物对治疗心肌缺血的也有较好的疗效。具体实施方式本专利技术中原材料的选择竹节参药材采自湖北恩施，经宜昌市药检所中药室鉴定为正 品竹节参Panax japonicus C. A. Mey.的干燥根茎。取20_40目的竹节参药材粗粉，加入粗粉重量10倍的60%的乙醇溶液，浸泡2h后， 加热回流提取3次，每次3 h，合并提取液，减压回收溶剂至无醇味，加水稀释后放置， 离心，取上清液，用含水正丁醇等量萃取3次，合并萃取液，减压回收溶剂至无正丁醇馏 出，将稠浸膏用85%乙醇溶液充分溶解，然后缓慢加入4一5倍量丙酮，加时搅拌，于常温 下静置4一6 h使沉淀分离完全，离心，收集沉淀物并用适量丙酮洗涤，60—80 'C热风干 燥得到竹节参总皂苷。按上述提取工艺进行3批药材的验证试验，竹节参总皂苷的转移率分别为95.28%， 97.81%， 96.97%，表明本提取工艺较为稳定可靠，且提取率较高。 竹节参总皂苷制备过程中的控制参数见表1。<table>table see original document page 4</column></row><table>竹节参总皂苷在治疗心肌缺血药物中的应用竹节参为五加科植物竹节参尸floxya/70ic^ C.A.Mey.，以干燥根茎入药，是1977年 以后各版《中国药典》收载的品种之一，有滋补强壮、散瘀止痛、止血祛痰等功效。在心 肌缺血性损伤时,由于细胞内(^2+超载可激活磷脂酶A，导致膜磷脂的分解,由黄嘌呤氧化酶途径生成的自由基增加可造成膜脂质的过氧化，这些变化均可引起细胞膜的破坏,导致细胞 的死亡。而血清中CK、 LDH、 SOD和MDA正是这种变化的反应。本文研究发现TSPJ (即 竹节参总皂苷)能抑制ISO所致心肌缺血时的血清LDH、 CPK水平的升高；并降低血清 中MDA含量，升高SOD含量，显示TSPJ的抗脂质过氧化作用是保护心肌重要途径之一。1. 材料与方法 1.1药品与试剂竹节参总皂苷，自制，总皂苷含量在80%以上。异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)，为 sigma公司产品。复方丹参片，河南天方药业中药有限公司。SOD、 MDA、 FFA试剂盒购 于南京建成生物工程研究所产品。 1.2动物雄性SD大鼠，清洁级，体重200士20g。 1.3方法实验前在麻醉下记录大鼠正常心电附图说明图1次,对心电图异常者予以剔除。实验大鼠随机 分为5组，每组8组。正常对照组和缺血模型组，以生理盐水20ml/kg， 1次/天，连续灌 胃8天。复方丹参片组、竹节参总皂苷高剂量组和低剂量组，分别以320mg/kg ， 400mg/kg， 200mg/kg剂量灌胃8天。除正常对照组外，其他各组于第7天开始，灌胃后lh,皮下注 射IS03mg/kg。间隔24h后，第二次皮下注射IS03mg/kg 2h后，心主动脉采血5ml， 3000r/min 离心10min，分离血清，-20匸保存，待测血清中CK, LDH， MDA， SOD， FFA等药理指 标。1.4心电图测定用20。/。乌拉坦麻醉大鼠(5ml/kg)，每组大鼠开始皮下注射ISO前，记录n导联心电图。 最后一次皮下注射ISO后，记录3min，8min，15min时心电图，以T波高耸并伴有J点位移 超过O.lmv为心肌缺血阳性评价标准。 1.5数据处理结果以(S士s)表示，组间比用单因素方差分析，两两比较用q检验，所有数均用SPSS11.5统计软件处理。2. 结果2.1大鼠心电图分析模型组两次给异丙肾上腺素后，心电图表现为T波高耸伴J点下 移，且幅度较大，有部分大鼠出现ST段下移，主波倒置；15min后，心电图还未恢复到正常状态。而阳性药物组，TSPJ高、低剂量组T波高耸和J点下移幅度较模型组小，且无大 鼠出现主波倒置，另外15min后，多数给药组大鼠心电图都恢复到正常状态。可见，TSPJ 对大鼠急性心肌缺血有较显著保护作用。 2.2对血清中CK和LDH的影响(表2)与正常对照组比较，缺血模型组中CK和LDH含量升高，具有显著差异。TSPJ的高、 低剂量组和复方丹参片组均能降低大鼠血清中CPK和LDH的含量，与缺血模型组比较， 复方丹参片组和TSPJ组具有显著差异,与正常对照组比较没有显著差异。表2: TSPJ对ISO诱导的心肌缺血模型大鼠血清中LDH和CPK的影响(；b，『8)<table>table see original document page 6</column></row><table>注与正常对照组比较，*P<0.05, **P<0.0;与缺血模型组比较，AP<0.05,AAP<0.01。 2.3对大鼠血清中MDA、 SOD和FFA影响(表3)TSPJ高高剂量组和复方丹参片组对心肌缺血大鼠MDA、 SOD和本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种的竹节参总皂苷制备方法，其特征在于：　　　　取竹节参药材粗粉，加入粗粉重量６－１２倍的４０－７０％的乙醇溶液，浸泡１－２．５小时后，加热回流提取１－４次，每次３ｈ，合并提取液，减压回收溶剂至无醇味，加水稀释后放置，离心，取上清液，用含水正丁醇等量萃取１－４次，合并萃取液，减压回收溶剂至无正丁醇馏出，将稠浸膏用８５％乙醇溶液充分溶解，然后缓慢加入４－５倍量丙酮，加时搅拌，于常温下静置４－６ｈ使沉淀分离完全，离心，收集沉淀物并用丙酮洗涤，用６０～８０℃热风干燥得到竹节参总皂苷。

【技术特征摘要】
1、一种的竹节参总皂苷制备方法，其特征在于取竹节参药材粗粉，加入粗粉重量6-12倍的40-70％的乙醇溶液，浸泡1-2.5小时后，加热回流提取1-4次，每次3h，合并提取液，减压回收溶剂至无醇味，加水稀释后放置，离心，取上清液，用含水正丁醇等量萃取1-4次，合并萃取液，减压回收溶剂至无正丁醇馏出，将稠浸膏用85％乙醇溶液充分溶解，然后缓慢加入4-5倍量丙酮，加时搅拌，于常温下静置4-6h使沉淀分离完全，离心，收集沉淀物并用丙酮洗涤，用60~80℃热风干燥得到竹节参总皂苷。2、 根据权利要求1所述的竹节参总皂苷的制备方法，其特征在于取竹节参药材粗 粉...

【专利技术属性】
技术研发人员：袁丁，张长城，何毓敏，黄晓飞，卢训丛，鲁科明，周志勇，黄鹤飞，胡远浪，赵海霞，
申请(专利权)人：三峡大学，
类型：发明
国别省市：42[中国|湖北]